| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-53页 |
| 1.1 动物转基因技术的研究历史及进展 | 第16-27页 |
| 1.1.1 动物转基因技术研究的初级阶段 | 第16-18页 |
| 1.1.2 动物转基因技术研究的初级应用阶段 | 第18-20页 |
| 1.1.3 动物转基因技术研究的飞速发展阶段 | 第20-27页 |
| 1.2 转基因动物的制备方法及其进展 | 第27-45页 |
| 1.2.1 传统制备转基因动物的主要方法 | 第28-32页 |
| 1.2.2 新型发展的高效转基因方法 | 第32-45页 |
| 1.3 动物转基因技术的应用 | 第45-49页 |
| 1.3.1 动物转基因技术在基础医学研究领域的应用 | 第45-46页 |
| 1.3.2 生物反应器 | 第46-47页 |
| 1.3.3 动物转基因技术在农业生产中的应用 | 第47-48页 |
| 1.3.4 动物转基因技术存在的问题 | 第48-49页 |
| 1.4 FGF5在皮肤毛囊中的作用及其研究进展 | 第49-51页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第51-53页 |
| 2 靶除绒山羊FGF5基因载体的构建 | 第53-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 2.1.1 实验设备 | 第53页 |
| 2.1.2 试剂及耗材 | 第53页 |
| 2.1.3 载体及菌种 | 第53-54页 |
| 2.2 实验方法 | 第54-60页 |
| 2.2.1 靶除绒山羊FGF5基因打靶载体的构建 | 第54-57页 |
| 2.2.2 靶除绒山羊FGF5基因RNA干扰载体的构建 | 第57页 |
| 2.2.3 靶除绒山羊FGF5基因TALEN载体的构建 | 第57-60页 |
| 2.3 实验结果 | 第60-63页 |
| 2.3.1 靶除绒山羊FGF5基因打靶载体的构建 | 第60-62页 |
| 2.3.2 靶除绒山羊FGF5基因RNA干扰载体的构建 | 第62页 |
| 2.3.3 靶除绒山羊FGF5基因TALEN载体的构建 | 第62-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-66页 |
| 3 绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞系的建立 | 第66-72页 |
| 3.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 3.1.1 实验设备 | 第66页 |
| 3.1.2 试剂及耗材 | 第66-67页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第67页 |
| 3.2 实验方法 | 第67-69页 |
| 3.2.1 绒山羊胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第67-68页 |
| 3.2.2 生长曲线的测定 | 第68-69页 |
| 3.3 实验结果 | 第69-71页 |
| 3.3.1 绒山羊胎儿成纤维细胞的原代培养 | 第69-70页 |
| 3.3.2 绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞生长曲线的测定 | 第70-71页 |
| 3.4 讨论 | 第71-72页 |
| 4 绒山羊鞭除FGF5基因细胞系的建立 | 第72-93页 |
| 4.1 实验材料 | 第72-73页 |
| 4.1.1 实验设备 | 第72-73页 |
| 4.1.2 试剂及耗材 | 第73页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第73页 |
| 4.2 实验方法 | 第73-80页 |
| 4.2.1 应用基因打靶技术靶除FGF5基因细胞系的建立 | 第73-78页 |
| 4.2.2 应用RNA干扰技术靶除FGF5基因细胞系的建立 | 第78-79页 |
| 4.2.3 应用TALEN技术靶除FGF5基因细胞系的建立 | 第79-80页 |
| 4.3 实验结果 | 第80-89页 |
| 4.3.1 应用基因打靶技术靶除FGF5基因细胞系的建立 | 第80-84页 |
| 4.3.2 应用RNA干扰技术靶除FGF5基因细胞系的建立 | 第84-87页 |
| 4.3.3 应用TALEN技术靶除FGF5基因细胞系的建立 | 第87-89页 |
| 4.4 讨论 | 第89-93页 |
| 5 靶除FGF5基因克隆胚的构建与移植 | 第93-101页 |
| 5.1 实验材料 | 第93-94页 |
| 5.1.1 实验设备 | 第93页 |
| 5.1.2 试剂及耗材 | 第93页 |
| 5.1.3 主要试剂的配制 | 第93-94页 |
| 5.2 实验方法 | 第94-96页 |
| 5.2.1 山羊卵母细胞的采集和体外培养 | 第94页 |
| 5.2.2 供体细胞的准备 | 第94页 |
| 5.2.3 受体卵母细胞的准备 | 第94-95页 |
| 5.2.4 核移植构建重构胚 | 第95页 |
| 5.2.5 重构胚的融合 | 第95页 |
| 5.2.6 融和胚的激活和发育 | 第95页 |
| 5.2.7 胚胎移植 | 第95-96页 |
| 5.3 结果 | 第96-100页 |
| 5.3.1 山羊卵母细胞的采集和体外培养 | 第96页 |
| 5.3.2 转基因克隆胚构建中融合条件的摸索 | 第96-97页 |
| 5.3.3 转基因克隆胚的构建及移植 | 第97-98页 |
| 5.3.4 应用基因打靶技术靶除FGF5基因克隆胚的构建与移植 | 第98页 |
| 5.3.5 应用RNA干扰技术靶除FGF5基因克隆胚的构建与移植 | 第98-100页 |
| 5.3.6 应用TALEN技术靶除FGF5基因克隆胚的构建与移植 | 第100页 |
| 5.4 讨论 | 第100-101页 |
| 6 靶除FGF5基因克隆绒山羊的鉴定 | 第101-106页 |
| 6.1 实验材料 | 第101-102页 |
| 6.1.1 实验设备 | 第101-102页 |
| 6.1.2 试剂及耗材 | 第102页 |
| 6.2 实验方法 | 第102-103页 |
| 6.2.1 基因组DNA水平上的鉴定 | 第102-103页 |
| 6.2.2 RNA水平上的鉴定 | 第103页 |
| 6.3 实验结果 | 第103-105页 |
| 6.3.1 应用基因打靶技术靶除FGF5基因克隆山羊的鉴定 | 第103-104页 |
| 6.3.2 应用RNA干扰技术靶除FGF5基因克隆山羊的鉴定 | 第104-105页 |
| 6.3.3 应用TALEN技术靶除FGF5基因克隆山羊的鉴定 | 第105页 |
| 6.4 讨论 | 第105-106页 |
| 7 结论 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-123页 |
| 附录 | 第123-131页 |
| 作者简介 | 第131页 |
