| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述：肥厚型心肌病(HCM)研究进展 | 第17-32页 |
| 1.1 引言 | 第17-18页 |
| 1.2 HCM的临床症状和形态学特征 | 第18-19页 |
| 1.3 HCM的流行病学特征 | 第19页 |
| 1.4 HCM的分子遗传学基础 | 第19-28页 |
| 1.4.1 HCM相关的核基因突变及其致病机理 | 第20-24页 |
| 1.4.2 HCM相关的mtDNA突变及其致病机理 | 第24-26页 |
| 1.4.3 HCM相关的修饰基因突变及其致病机理 | 第26-28页 |
| 1.5 HCM的诊断与治疗 | 第28-30页 |
| 1.5.1 HCM的诊断 | 第28-29页 |
| 1.5.2 HCM的治疗 | 第29-30页 |
| 1.6 结语与展望 | 第30-32页 |
| 第二章 母系遗传性HCM家系的收集与临床分析 | 第32-40页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.2.1 实验样品 | 第32页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-34页 |
| 2.3.1 临床检查 | 第33页 |
| 2.3.2 HCM患者家族遗传史的调查 | 第33-34页 |
| 2.4 实验结果 | 第34-38页 |
| 2.4.1 母系遗传性HCM家系的收集 | 第34页 |
| 2.4.2 临床表型分析 | 第34-38页 |
| 2.5 讨论 | 第38-40页 |
| 2.5.1 该家系具有典型的HCM临床表型 | 第38-39页 |
| 2.5.2 AVB与HCM的遗传相关性 | 第39-40页 |
| 第三章 母系遗传性HCM相关线粒体DNA突变的筛查与分析 | 第40-62页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.2.1 实验样品 | 第40页 |
| 3.2.2 实验仪器及耗材 | 第40-41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-53页 |
| 3.3.1 外周血采集 | 第41页 |
| 3.3.2 外周血DNA提取 | 第41-42页 |
| 3.3.3 mtDNA全序列PCR-测序 | 第42-46页 |
| 3.3.4 毛囊细胞DNA的提取 | 第46-47页 |
| 3.3.5 腔上皮细胞DNA的提取 | 第47-48页 |
| 3.3.6 尿液细胞DNA的提取 | 第48-49页 |
| 3.3.7 不同组织细胞中mtDNA突变的异质性分析 | 第49-53页 |
| 3.3.8 HCM相关核基因突变的筛查 | 第53页 |
| 3.4 实验结果 | 第53-61页 |
| 3.4.1 母系遗传性HCM相关mtDNA突变的筛查 | 第53-56页 |
| 3.4.2 2336T>C突变在正常汉族人群中发生频率的分析 | 第56-58页 |
| 3.4.3 不同组织细胞中2336T>C突变的异质性分析 | 第58-59页 |
| 3.4.4 2336T>C突变对16S rRNA级结构的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.5 HCM相关核基因突变的筛查 | 第60-61页 |
| 3.5 讨论 | 第61-62页 |
| 第四章 16S rRNA2336T>C突变对线粒体结构和功能的影响 | 第62-80页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 实验材料 | 第62-63页 |
| 4.2.1 实验样品 | 第62页 |
| 4.2.2 实验仪器及耗材 | 第62-63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-73页 |
| 4.3.1 永生化淋巴细胞系的构建 | 第63-65页 |
| 4.3.2 细胞倍增时间的测定 | 第65-66页 |
| 4.3.3 细胞氧呼吸速率(OCR)的测定 | 第66-68页 |
| 4.3.4 细胞ATP合成的测定 | 第68-71页 |
| 4.3.5 细胞活性氧(ROS)产生的测定 | 第71-72页 |
| 4.3.6 线粒体结构的电子显微镜观察 | 第72-73页 |
| 4.4 实验结果 | 第73-78页 |
| 4.4.1 患者特异性淋巴细胞系的构建 | 第73-74页 |
| 4.4.2 2336T>C突变对细胞倍增时间的影响 | 第74页 |
| 4.4.3 2336T>C突变对线粒体氧消耗速率(OCR)的影响 | 第74-75页 |
| 4.4.4 2336T>C突变对线粒体ATP合成的影响 | 第75-76页 |
| 4.4.5 2336T>C突变对活性氧(ROS)产生的影响 | 第76-77页 |
| 4.4.6 2336T>C突变对线粒体结构的影响 | 第77-78页 |
| 4.5 讨论 | 第78-80页 |
| 第五章 16S rRNA2336T>C突变对线粒体基因表达的影响 | 第80-101页 |
| 5.1 引言 | 第80页 |
| 5.2 实验材料 | 第80页 |
| 5.2.1 实验样品 | 第80页 |
| 5.2.2 实验仪器及耗材 | 第80页 |
| 5.3 实验方法 | 第80-90页 |
| 5.3.1 mtDNA拷贝数的分析 | 第81-82页 |
| 5.3.2 线粒体核糖体RNA和核糖体结合蛋白转录水平分析 | 第82-85页 |
| 5.3.3 细胞总蛋白的提取及定量 | 第85-86页 |
| 5.3.4 线粒体的分离与纯化 | 第86-87页 |
| 5.3.5 线粒体蛋白质的SDS-PAGE/Western blot分析 | 第87-90页 |
| 5.4 实验结果 | 第90-99页 |
| 5.4.1 2336T>C突变对mtDNA拷贝数的影响 | 第90-91页 |
| 5.4.2 2336T>C突变对线粒体16S rRNA转录水平的影响 | 第91-92页 |
| 5.4.3 2336T>C突变对线粒体外膜蛋白表达的影响 | 第92-93页 |
| 5.4.4 2336T>C对mtDNA编码OXPHOS复合体亚基蛋白表达的影响 | 第93-95页 |
| 5.4.5 2336T>C对核基因编码OXPHOS复合体亚基蛋白表达的影响 | 第95-97页 |
| 5.4.6 2336T>C突变对线粒体核糖体大亚基结合蛋白基因表达的影响 | 第97-99页 |
| 5.5 讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 论文创新性 | 第101-102页 |
| 第七章 存在问题与展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 附录Ⅰ：主要试剂的配制方法 | 第110-116页 |
| 附录Ⅱ：常用英文缩写 | 第116-118页 |
| 附录Ⅲ：个人简历 | 第118页 |
