缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-21页 |
第一部分TFDP3在前列腺癌中的表达情况 | 第21-36页 |
1 实验材料 | 第21-24页 |
1.1 细胞系 | 第21页 |
1.2 菌株 | 第21页 |
1.3 组织标本 | 第21页 |
1.4 主要试剂 | 第21-22页 |
1.5 常用缓冲液,试剂及培养基 | 第22-23页 |
1.6 主要仪器 | 第23-24页 |
2 实验方法 | 第24-30页 |
2.1 LNCaP细胞的培养 | 第24-25页 |
2.2 LNCaP细胞总RNA的提取 | 第25-27页 |
2.3 细胞总RNA反转录为cDNA | 第27-28页 |
2.4 PCR扩增TFDP3基因片段 | 第28页 |
2.5 产物琼脂糖凝胶电泳分离 | 第28页 |
2.6 凝胶回收 | 第28-29页 |
2.7 原位杂交 | 第29-30页 |
2.8 免疫组化 | 第30页 |
3 实验结果 | 第30-35页 |
3.1 LNCaP细胞培养 | 第30-31页 |
3.2 前列腺癌细胞中TFDP3表达情况 | 第31页 |
3.3 前列腺癌组织中TFDP3的表达情况 | 第31-32页 |
3.4 前列腺癌组织中E2F1的表达分析 : | 第32-33页 |
3.5 免疫组化检测前列腺癌组织中TFDP3和E2F1的表达 | 第33-35页 |
4. 讨论 | 第35-36页 |
第二部分TFDP3与E2F1的相互作用及其对前列腺癌细胞的自噬及凋亡作用研究 | 第36-52页 |
1 实验材料 | 第36-39页 |
1.1 载体 | 第36页 |
1.2 细胞株 | 第36页 |
1.3 菌株 | 第36页 |
1.4 主要试剂 | 第36-37页 |
1.5 常用缓冲液及培养基 | 第37-38页 |
1.6 主要仪器 | 第38-39页 |
2 实验方法 | 第39-47页 |
2.1 重组表达质粒pcDNA3.1-TFDP3和pCMV-E2F1-HA的扩增和鉴定 | 第39-41页 |
2.2 质粒PCDNA3.1-TFDP3和pCMV-E2F1-HA在LNCap细胞中的表达效率检测 | 第41-43页 |
2.3 RT-PCR检测质粒转染后自噬相关蛋白LC3mRNA变化 | 第43-45页 |
2.4 Western blot质粒转染后检测LC3B蛋白水平的表达 | 第45-46页 |
2.5 TFDP3和E2F1相互作用对LNCaP细胞凋亡的影响 | 第46页 |
2.6 统计学处理 | 第46-47页 |
3 实验结果 | 第47-51页 |
3.1 PcDNA3.1-TFDP3的双酶切鉴定 | 第47页 |
3.2 转染PCMV-E2F1-HA后E2F1在LNCap细胞中的表达 | 第47-48页 |
3.3 转染PCDNA3.1-TFDP3后TFDP3在LNCap细胞中的表达 | 第48页 |
3.4 TFDP3及E2F1的表达对LC3B mRNA的影响 | 第48-49页 |
3.5 TFDP3及E2F1的表达对LC3B蛋白变化的影响 | 第49-50页 |
3.6 TFDP3和E2F1表达载体作用于LNCaP细胞后细胞凋亡变化 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
个人简历和研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |