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TFDP3对前列腺癌LNCaP细胞自噬及凋亡调控的初步研究

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
前言第13-15页
文献回顾第15-21页
第一部分TFDP3在前列腺癌中的表达情况第21-36页
    1 实验材料第21-24页
        1.1 细胞系第21页
        1.2 菌株第21页
        1.3 组织标本第21页
        1.4 主要试剂第21-22页
        1.5 常用缓冲液,试剂及培养基第22-23页
        1.6 主要仪器第23-24页
    2 实验方法第24-30页
        2.1 LNCaP细胞的培养第24-25页
        2.2 LNCaP细胞总RNA的提取第25-27页
        2.3 细胞总RNA反转录为cDNA第27-28页
        2.4 PCR扩增TFDP3基因片段第28页
        2.5 产物琼脂糖凝胶电泳分离第28页
        2.6 凝胶回收第28-29页
        2.7 原位杂交第29-30页
        2.8 免疫组化第30页
    3 实验结果第30-35页
        3.1 LNCaP细胞培养第30-31页
        3.2 前列腺癌细胞中TFDP3表达情况第31页
        3.3 前列腺癌组织中TFDP3的表达情况第31-32页
        3.4 前列腺癌组织中E2F1的表达分析 :第32-33页
        3.5 免疫组化检测前列腺癌组织中TFDP3和E2F1的表达第33-35页
    4. 讨论第35-36页
第二部分TFDP3与E2F1的相互作用及其对前列腺癌细胞的自噬及凋亡作用研究第36-52页
    1 实验材料第36-39页
        1.1 载体第36页
        1.2 细胞株第36页
        1.3 菌株第36页
        1.4 主要试剂第36-37页
        1.5 常用缓冲液及培养基第37-38页
        1.6 主要仪器第38-39页
    2 实验方法第39-47页
        2.1 重组表达质粒pcDNA3.1-TFDP3和pCMV-E2F1-HA的扩增和鉴定第39-41页
        2.2 质粒PCDNA3.1-TFDP3和pCMV-E2F1-HA在LNCap细胞中的表达效率检测第41-43页
        2.3 RT-PCR检测质粒转染后自噬相关蛋白LC3mRNA变化第43-45页
        2.4 Western blot质粒转染后检测LC3B蛋白水平的表达第45-46页
        2.5 TFDP3和E2F1相互作用对LNCaP细胞凋亡的影响第46页
        2.6 统计学处理第46-47页
    3 实验结果第47-51页
        3.1 PcDNA3.1-TFDP3的双酶切鉴定第47页
        3.2 转染PCMV-E2F1-HA后E2F1在LNCap细胞中的表达第47-48页
        3.3 转染PCDNA3.1-TFDP3后TFDP3在LNCap细胞中的表达第48页
        3.4 TFDP3及E2F1的表达对LC3B mRNA的影响第48-49页
        3.5 TFDP3及E2F1的表达对LC3B蛋白变化的影响第49-50页
        3.6 TFDP3和E2F1表达载体作用于LNCaP细胞后细胞凋亡变化第50-51页
    4 讨论第51-52页
小结第52-53页
参考文献第53-58页
个人简历和研究成果第58-59页
致谢第59页

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