| 摘要 | 第4-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 乳质性状相关基因的分子遗传研究 | 第10-17页 |
| 1.1 参与泌乳调控的乳质相关基因研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 PRL基因 | 第10-11页 |
| 1.1.2 STAT5a基因 | 第11页 |
| 1.1.3 GH基因 | 第11-12页 |
| 1.2 乳蛋白合成相关功能基因研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3 乳脂合成相关功能基因研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3.1 脂肪酸合成相关功能基因 | 第14-15页 |
| 1.3.2 甘油三酯合成相关功能基因 | 第15-17页 |
| 2 本研究检测的候选基因研究进展 | 第17-19页 |
| 2.1 DGAT1基因结构和定位 | 第17页 |
| 2.2 DGAT1作用机制及功能 | 第17-18页 |
| 2.3 DGAT1基因突变与乳质性状相关性研究 | 第18-19页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-31页 |
| 1 试验材料 | 第20页 |
| 1.1 血样采集 | 第20页 |
| 1.2 乳样采集 | 第20页 |
| 1.3 组织样采集 | 第20页 |
| 2 仪器设备及试剂 | 第20-22页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.2 主要试验试剂及配制 | 第21-22页 |
| 2.2.1 主要试验试剂 | 第21页 |
| 2.2.2 提取试剂及配制 | 第21-22页 |
| 3 试验方法 | 第22-31页 |
| 3.1 牦牛乳品质性状测定 | 第22页 |
| 3.2 牦牛基因组DNA提取 | 第22-23页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR | 第23-25页 |
| 3.3.1 总RNA提取前期处理 | 第23页 |
| 3.3.2 总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 3.3.3 RNA浓度、纯度检测 | 第24页 |
| 3.3.4 RNA质量检测 | 第24页 |
| 3.3.5 cDNA合成 | 第24-25页 |
| 3.3.6 实时荧光定量PCR | 第25页 |
| 3.4 DNA混合池测序 | 第25-26页 |
| 3.5 PCR-SSCP分析 | 第26-27页 |
| 3.5.1 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 3.5.2 SSCP电泳 | 第27页 |
| 3.5.3 等位基因序列测定 | 第27页 |
| 3.6 数据统计分析 | 第27-31页 |
| 3.6.1 荧光定量结果分析 | 第27-28页 |
| 3.6.2 遗传多态性及相关性分析 | 第28-29页 |
| 3.6.3 生物信息学预测分析 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-52页 |
| 1 牦牛DGAT1基因组织表达 | 第31-33页 |
| 1.1 总RNA提取浓度及质量检测 | 第31页 |
| 1.2 目的基因PCR产物琼脂糖电泳检测 | 第31-32页 |
| 1.3 牦牛DGAT1基因组织表达量测定 | 第32-33页 |
| 2 牦牛DGAT1基因生物信息学分析 | 第33-39页 |
| 2.1 牦牛DGAT1基因CDS区序列比对分析 | 第33-35页 |
| 2.2 牦牛DGAT1氨基酸序列 | 第35页 |
| 2.3 牦牛DGAT1氨基酸序列理化特性预测 | 第35-36页 |
| 2.4 牦牛DGAT1蛋白亲水性/疏水性预测 | 第36页 |
| 2.5 牦牛DGAT1蛋白序列跨膜区预测与分析 | 第36-37页 |
| 2.6 牦牛DGAT1蛋白亚细胞定位预测与分析 | 第37-38页 |
| 2.7 牦牛DGAT1氨基酸序列信号肽预测 | 第38页 |
| 2.8 牦牛DGAT1二级结构预测 | 第38-39页 |
| 3 牦牛DGAT1基因多态性分析 | 第39-45页 |
| 3.1 DGAT1基因PCR产物琼脂糖电泳检测 | 第39页 |
| 3.2 DGAT1基因SSCP检测 | 第39-40页 |
| 3.3 牦牛DGAT1基因等位基因序列测定及比对 | 第40-43页 |
| 3.3.1 DGAT1基因3'-UTR区等位基因序列测定及比对 | 第40-41页 |
| 3.3.2 DGAT1基因intron5-exon7区等位基因序列测定及比对 | 第41-42页 |
| 3.3.3 DGAT1基因exon8区引物等位基因序列测定及比对 | 第42页 |
| 3.3.4 DGAT1基因intron15-exon17区等位基因序列测定及比对 | 第42-43页 |
| 3.4 牦牛DGAT1基因遗传多态性 | 第43-45页 |
| 3.4.1 牦牛DGAT1基因3'-UTR区遗传多态性 | 第43-44页 |
| 3.4.2 牦牛DGAT1基因intron5-exon7区遗传多态性 | 第44页 |
| 3.4.3 牦牛DGAT1基因exon8区遗传多态性 | 第44-45页 |
| 3.4.4 牦牛DGAT1基因intron15-exon17区遗传多态性 | 第45页 |
| 4 甘南牦牛DGAT1基因单倍型连锁分析 | 第45-46页 |
| 5 甘南牦牛DGAT1基因突变及单倍型对乳质性状的影响 | 第46-52页 |
| 5.1 甘南牦牛DGAT1基因3'-UTR区突变与乳质性状关联分析 | 第46-47页 |
| 5.2 甘南牦牛DGAT1基因intron5-exon7区突变与乳质性状关联分析 | 第47-48页 |
| 5.3 甘南牦牛DGAT1基因intron15-exon17区突变与乳质性状关联分析 | 第48-49页 |
| 5.4 甘南牦牛DGAT1基因单倍型与乳质性状相关性分析 | 第49-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| 1 牦牛DGAT1基因存在组织表达差异 | 第52页 |
| 2 牦牛DGAT1蛋白结构及功能预测 | 第52页 |
| 3 牦牛DGAT1基因多态性较丰富 | 第52-53页 |
| 4 牦牛DGAT1基因3'-UTR及intron15-exon17区突变影响乳质性状 | 第53-54页 |
| 5 DGAT1基因单倍型影响牦牛乳品质性状 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 导师简介 | 第69-70页 |
