| 英文缩写词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪言 | 第12-21页 |
| 1 骨质疏松症的预防与治疗研究现状 | 第13页 |
| 2 淫羊藿治疗骨质疏松症的研究现状 | 第13-18页 |
| 2.1 淫羊藿素简介 | 第14页 |
| 2.2 淫羊藿素促进成骨活性的分子机理研究进展 | 第14-18页 |
| 3 本课题的研究内容及意义 | 第18-21页 |
| 第2章 生物素化淫羊藿素的合成与药物活性验证 | 第21-32页 |
| 1 材料和方法 | 第22-23页 |
| 1.1 主要试剂 | 第22页 |
| 1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| 2.1 淫羊藿素标记技术 | 第23页 |
| 2.2 大鼠乳鼠颅骨成骨细胞的提取 | 第23-24页 |
| 2.3 成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的检测 | 第24页 |
| 2.4 成骨细胞的相关蛋白表达量的检测 | 第24-25页 |
| 2.5 成骨细胞钙化结节染色 | 第25页 |
| 2.6 生物素化淫羊藿素在成骨细胞内的示踪 | 第25-26页 |
| 2.7 统计学处理 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-30页 |
| 3.1 生物素化淫羊藿素合成结果 | 第26-27页 |
| 3.2 大鼠乳鼠成骨细胞的提取与培养 | 第27页 |
| 3.3 成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的检测结果 | 第27-28页 |
| 3.4 成骨细胞的相关蛋白表达量的检测结果 | 第28-29页 |
| 3.5 成骨细胞钙化结节染色结果 | 第29页 |
| 3.6 生物素化淫羊藿素在成骨细胞中的示踪结果 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 Biacore垂钓法钓取淫羊藿素相结合蛋白及免疫共沉淀法验证 | 第32-48页 |
| 1 材料与方法 | 第32-33页 |
| 1.1 主要药品与试剂 | 第32-33页 |
| 1.2 实验仪器 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-41页 |
| 2.1 成骨细胞的分离与培养 | 第33页 |
| 2.2 药物处理成骨细胞及细胞蛋白的提取 | 第33页 |
| 2.3 Biacore系统的原理及其应用 | 第33-36页 |
| 2.4 运用Biacore垂钓法钓取与生物素化淫羊藿素相结合的蛋白 | 第36-37页 |
| 2.5 Biacore钓取结果质谱检测分析 | 第37-39页 |
| 2.5.1 蛋白分离部分 | 第37页 |
| 2.5.2 质谱部分 | 第37-38页 |
| 2.5.3 信息分析部分 | 第38-39页 |
| 2.6 免疫荧光技术共定位生物素化淫羊藿素和CXCR | 第39页 |
| 2.7 免疫共沉淀法验证钓取蛋白 | 第39-40页 |
| 2.8 Westernblot检测CXCR4、BMP2、COLⅠ、VEGF蛋白表达量 | 第40页 |
| 2.9 统计学处理 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-45页 |
| 3.1 运用Biacore垂钓法钓取与生物素化淫羊藿素相结合的蛋白 | 第41-42页 |
| 3.2 Biacore钓取蛋白质谱分析检测分析结果 | 第42-43页 |
| 3.3 免疫共沉淀法验证钓取蛋白结果 | 第43-44页 |
| 3.4 免疫荧光染色共定位生物素化淫羊藿素和CXCR4结果 | 第44-45页 |
| 3.5 Westernblot检测CXCR4、BMP2、COLⅠ、VEGF蛋白表达量 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 第4章 CXCR4对淫羊藿素促进成骨细胞成熟与矿化的作用研究 | 第48-56页 |
| 1 材料与仪器 | 第49页 |
| 1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第49页 |
| 2 方法 | 第49-52页 |
| 2.1 成骨细胞的分离培养 | 第49-50页 |
| 2.2 阻断CXCR4对ROBs成熟与矿化的影响 | 第50页 |
| 2.3 阻断CXCR4对ROBs成骨相关蛋白的影响 | 第50页 |
| 2.4 碱性磷酸酶(ALP)活性的测定 | 第50-51页 |
| 2.5 Westernblot检测CXCR4、BMP2、Runx-2、Smad1/5/9、p-Smad1/5/9表达量 | 第51页 |
| 2.6 茜素红钙化结节染色 | 第51-52页 |
| 2.7 统计学处理 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-54页 |
| 3.1 阻断CXCR4对ROBs成骨相关蛋白表达量的影响 | 第52-53页 |
| 3.2 碱性磷酸酶(ALP)活性的测定结果 | 第53页 |
| 3.4 茜素红钙化结节染色结果 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录A：攻读学位期间所发表的学术论文 | 第65-66页 |
| 附录B：论文中所用到的一些常用试剂配制方法 | 第66页 |
