| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1.1 植物花发育研究进展 | 第13-26页 |
| 1.1.1 成花诱导与花器官形成 | 第13页 |
| 1.1.2 MADS-box基因 | 第13-14页 |
| 1.1.3 花器官发育模型 | 第14-15页 |
| 1.1.4 矮牵牛花发育研究进展 | 第15-23页 |
| 1.1.5 重瓣花形成的多种途径 | 第23-24页 |
| 1.1.6 开花时间相关基因 | 第24-26页 |
| 1.2 抑制消减杂交技术及其应用 | 第26-27页 |
| 1.2.1 抑制消减杂交技术原理 | 第26-27页 |
| 1.2.2 抑制消减杂交技术在发育学上的应用 | 第27页 |
| 1.3 本研究的目的、意义及主要内容 | 第27-29页 |
| 第二章 单重瓣矮牵牛抑制差减文库的构建及差异表达基因的分离 | 第29-43页 |
| 2.1 引言 | 第29页 |
| 2.2 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.2.2 菌株和载体 | 第29-30页 |
| 2.2.3 主要试剂和药品 | 第30页 |
| 2.2.4 主要缓冲液和培养基配方 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.3.1 RNA的提取、双链合成 | 第30-31页 |
| 2.3.2 双链cDNA的Rsa Ⅰ酶切及检测 | 第31页 |
| 2.3.3 接头连接及连接效率检测 | 第31-32页 |
| 2.3.4 抑制消减杂交与文库构建 | 第32页 |
| 2.3.5 文库的分析及转膜 | 第32页 |
| 2.3.6 探针的标记和斑点杂交 | 第32-33页 |
| 2.3.7 序列分析 | 第33页 |
| 2.3.8 半定量和相对定量PCR验证分析差异表达基因 | 第33-34页 |
| 2.4 结果与分析 | 第34-41页 |
| 2.4.1 单重瓣矮牵牛花芽总RNA的提取及双链合成 | 第34-35页 |
| 2.4.2 单重瓣矮牵牛双链cDNA Rsa Ⅰ酶切后检测 | 第35页 |
| 2.4.3 双链酶切回收后接头连接效率检测 | 第35-36页 |
| 2.4.4 两次消减杂交后消减效率检测 | 第36页 |
| 2.4.5 文库中插入片段大小的随机检测 | 第36-37页 |
| 2.4.6 差异表达片段测序、登录和序列分析 | 第37-39页 |
| 2.4.7 差异表达基因的半定量PCR验证 | 第39-40页 |
| 2.4.8 差异表达基因的相对定量RT-PCR检测 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 重瓣矮牵牛文库中差异表达基因的克隆、序列分析和遗传转化 | 第43-61页 |
| 3.1 引言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 材料 | 第43页 |
| 3.2.2 方法 | 第43-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-57页 |
| 3.3.1 PhFDH基因的克隆与载体构建 | 第45-48页 |
| 3.3.2 PhFDH基因在烟草上的遗传转化 | 第48-49页 |
| 3.3.3 PhHVA22基因的克隆、载体构建及遗传转化 | 第49-53页 |
| 3.3.4 PhHSA基因的克隆、载体构建及遗传转化 | 第53-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-61页 |
| 第四章 重瓣烟草抑制差减文库的构建和序列分析 | 第61-74页 |
| 4.1 引言 | 第61页 |
| 4.2 材料 | 第61-62页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第61页 |
| 4.2.2 菌株和载体 | 第61-62页 |
| 4.2.3 主要试剂和药品 | 第62页 |
| 4.2.4 主要缓冲液和培养基配方 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62页 |
| 4.4 结果与分析 | 第62-70页 |
| 4.4.1 单重瓣烟草花芽总RAN的提取和双链cDNA的合成 | 第62-63页 |
| 4.4.2 双链cDNA的Rsa1酶切检测 | 第63页 |
| 4.4.3 接头连接后连接效率的检测 | 第63-64页 |
| 4.4.4 抑制消减杂交后差减效率的检测 | 第64页 |
| 4.4.5 正向文库随机插入片断的PCR检测 | 第64页 |
| 4.4.6 正反向文库构建质量及差异表达序列分析 | 第64-66页 |
| 4.4.7 正反向文库差异表达基因的半定量RT-PCR检测 | 第66-67页 |
| 4.4.8 烟草中HVA22基因的分离及遗传转化 | 第67-70页 |
| 4.5 讨论 | 第70-74页 |
| 第五章 矮牵牛SOC1类基因的克隆和功能验证 | 第74-102页 |
| 5.1 引言 | 第74页 |
| 5.2 FBP21基因的克隆、功能验证 | 第74-88页 |
| 5.2.1 材料 | 第74页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第74-76页 |
| 5.2.3 结果与分析 | 第76-86页 |
| 5.2.4 讨论 | 第86-88页 |
| 5.3 矮牵牛FBP22基因的克隆及功能验证 | 第88-102页 |
| 5.3.1 材料 | 第88页 |
| 5.3.2 实验方法 | 第88-90页 |
| 5.3.3 结果与分析 | 第90-98页 |
| 5.3.4 讨论 | 第98-102页 |
| 第六章 矮牵牛FLOWERING LOCUS T(FT)类似基因的克隆与功能验证 | 第102-112页 |
| 6.1 引言 | 第102页 |
| 6.2 实验材料 | 第102页 |
| 6.3 实验方法 | 第102-103页 |
| 6.3.1 总RNA提取及双链合成 | 第102页 |
| 6.3.2 矮牵牛FT-like基因的电子克隆 | 第102-103页 |
| 6.3.3 矮牵牛超量表达载体的构建及遗传转化 | 第103页 |
| 6.3.4 转基因烟草植株的获得及鉴定 | 第103页 |
| 6.4 结果与分析 | 第103-109页 |
| 6.4.1 矮牵牛FT-like基因的电子克隆 | 第103-107页 |
| 6.4.2 转基因烟草的获得及验证 | 第107-109页 |
| 6.5 讨论 | 第109-112页 |
| 参考文献 | 第112-124页 |
| 附录Ⅰ | 第124页 |
| 附录Ⅱ | 第124-125页 |
| 附录Ⅲ | 第125页 |
| 附录Ⅳ | 第125-126页 |
| 附录Ⅴ | 第126页 |
| 附录Ⅵ | 第126-127页 |
| 附录Ⅶ | 第127页 |
| 附录Ⅷ | 第127-128页 |
| 附录Ⅸ | 第128-136页 |
| 附录Ⅹ | 第136-144页 |
| 发表论文 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145页 |
