| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 基础研究 | 第10-12页 |
| 1.1.1 赤霉菌与赤霉病 | 第10-11页 |
| 1.1.2 赤霉病的症状及危害 | 第11页 |
| 1.1.3 镰刀菌毒素 | 第11-12页 |
| 1.1.4 赤霉病的防治 | 第12页 |
| 1.2 抗菌肽和几丁质酶的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 抗菌肽的理化性质及分类 | 第13页 |
| 1.2.2 抗菌肽的作用机理 | 第13-14页 |
| 1.2.3 抗菌肽的生物学活性及应用前景 | 第14-15页 |
| 1.2.4 抗菌肽的基因工程 | 第15页 |
| 1.3 原核表达综述 | 第15-19页 |
| 1.3.1 影响大肠杆菌表达系统表达量的因素 | 第16页 |
| 1.3.2 影响大肠杆菌表达体系中表达产物活性的因素 | 第16-17页 |
| 1.3.3 本研究中表达的外源蛋白 | 第17-19页 |
| 1.4 课题研究的目的 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 培养基及缓冲液配方 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 质粒DNA提取 | 第22页 |
| 2.2.2 PCR扩增目的基因 | 第22-23页 |
| 2.2.3 DNA片段回收 | 第23页 |
| 2.2.4 DNA片段的酶切和连接 | 第23-24页 |
| 2.2.5 感受态细胞制备 | 第24-25页 |
| 2.2.6 转化方法 | 第25页 |
| 2.2.7 外源基因的基本性质 | 第25-26页 |
| 2.2.8 融合蛋白诱导表达及纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
| 2.2.10 Western blot | 第28-29页 |
| 2.2.11 检测表达后的菌体总蛋白 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-50页 |
| 3.1 Chie1、Chie9、MsrA1e1、MsrA1e9、Chitinase、E1、E97个基因的原核表达,纯化及功能鉴定 | 第30-42页 |
| 3.1.1 Chie1、Chie9、MsrA1e1、MsrA1e9、Chitinase基因的克隆 | 第30-31页 |
| 3.1.2 Chie1、Chie9、MsrA1e1、MsrA1e9、Chitinase、E1、E9、CTB-p277、CTB-2p277、CTB-3p277、AN、UN基因的表达纯化 | 第31-41页 |
| 3.1.3 抗菌肽融合蛋白的抑菌实验 | 第41-42页 |
| 3.2 CTB-p277,CTB-2p277,CTB-3p22基因的表达纯化及活性分析 | 第42-45页 |
| 3.3 AN和UN基因密码子的修改及其表达与纯化 | 第45-49页 |
| 3.3.1 AN,UN基因密码子的修改 | 第45-47页 |
| 3.3.2 AN,UN基因的表达与纯化 | 第47-49页 |
| 3.4 表达并纯化外源蛋白信息汇总 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
