| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 插图和附表清单 | 第9-11页 |
| 缩略词和术语表 | 第11-14页 |
| 目录 | 第14-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 研究背景 | 第16-27页 |
| 1.1.1 卤虫概况 | 第16-18页 |
| 1.1.2 RNA聚合酶Ⅱ最大亚基Rpb1的C末端结构域CTD磷酸化 | 第18-21页 |
| 1.1.3 周期蛋白与转录 | 第21-22页 |
| 1.1.4 RNA聚合酶Ⅱ的转录延伸 | 第22-24页 |
| 1.1.5 P-TEFb的组成 | 第24页 |
| 1.1.6 P-TEFb的调控机制 | 第24-25页 |
| 1.1.7 Cyclin K研究进展 | 第25-26页 |
| 1.1.8 展望 | 第26-27页 |
| 1.2 研究目的、方法和意义 | 第27-28页 |
| 第2章 细胞周期蛋白K(cyclin K)在卤虫胚胎发育过程中的表达及调控 | 第28-61页 |
| 摘要 | 第28页 |
| 2.1 引言 | 第28-30页 |
| 2.2 材料 | 第30-31页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第31页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第31页 |
| 2.3 方法 | 第31-48页 |
| 2.3.1 总RNA提取及cDNA合成 | 第31-33页 |
| 2.3.2 cDNA文库的构建 | 第33-38页 |
| 2.3.3 半定量RT-PCR | 第38-39页 |
| 2.3.4 Western Blotting | 第39-41页 |
| 2.3.5 细胞核和细胞质蛋白的分离 | 第41-42页 |
| 2.3.6 细胞核的抽提 | 第42-43页 |
| 2.3.7 细胞核免疫荧光分析 | 第43-44页 |
| 2.3.8 免疫共沉淀 | 第44-45页 |
| 2.3.9 poly(A)+RNA纯化及体外翻译 | 第45页 |
| 2.3.10 Northern blotting | 第45-48页 |
| 2.4 结果 | 第48-57页 |
| 2.4.1 cyclin K序列获得及特征分析 | 第48-50页 |
| 2.4.2 cyclin K和Rpb1分子的mRNA在卤虫两种生殖发育过程中的表达 | 第50-52页 |
| 2.4.3 cyclin K蛋白和磷酸化形式的RNA聚合酶Ⅱ蛋白的表达 | 第52-54页 |
| 2.4.4 cyclin K和磷酸化的RNA聚合酶Ⅱ在细胞核内的定位 | 第54-55页 |
| 2.4.5 cyclin K不能结合磷酸化形式的RNA聚合酶Ⅱ | 第55-56页 |
| 2.4.6 cyclin K的mRNA的模板活性在卤虫休眠胚胎中受到抑制 | 第56-57页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第57-61页 |
| 2.5.1 cyclin K在休眠胚胎中的表达与调控 | 第57-58页 |
| 2.5.2 休眠胚胎发育过程中RNA聚合酶Ⅱ的活性及调节方式 | 第58-59页 |
| 2.5.3 卵母细胞中RNA聚合酶Ⅱ的活性调节 | 第59页 |
| 2.5.4 cyclin K与RNA聚合酶Ⅱ的相互作用机制 | 第59-61页 |
| 第3章 cyclin K在卤虫早期胚胎发育中的功能分析 | 第61-77页 |
| 摘要 | 第61页 |
| 3.1 引言 | 第61-62页 |
| 3.2 材料 | 第62-63页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第62页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第62-63页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第63页 |
| 3.3 方法 | 第63-70页 |
| 3.3.1 双链RNA的制备 | 第63-67页 |
| 3.3.2 卤虫显微注射 | 第67页 |
| 3.3.3 干涉效率检测 | 第67页 |
| 3.3.4 台盼蓝染色 | 第67-68页 |
| 3.3.5 DAPI染色 | 第68页 |
| 3.3.6 冷冻切片的制备 | 第68-69页 |
| 3.3.7 TUNEL检测 | 第69-70页 |
| 3.4 结果 | 第70-75页 |
| 3.4.1 双链RNA介导的cyclin K分子的干涉 | 第70-72页 |
| 3.4.2 cyclin K功能的缺失会诱导早期发育胚胎细胞凋亡 | 第72-74页 |
| 3.4.3 cyclin K通过ERK信号途径促进细胞存活 | 第74-75页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第75-77页 |
| 3.5.1 卤虫胚胎转录激活 | 第75页 |
| 3.5.2 cyclin K在早期胚胎发育中的功能 | 第75-76页 |
| 3.5.3 cyclin K缺失通过抑制ERK信号通路活性诱导凋亡 | 第76-77页 |
| 结论与展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 本研究的创新点 | 第89-90页 |
| 常用试剂列表 | 第90-98页 |
| 作者简历 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
