| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 生物固氮及其机理 | 第8-11页 |
| 1.1.1 固氮微生物的种类 | 第8-9页 |
| 1.1.2 生物固氮的类型 | 第9-11页 |
| 1.2.结瘤因子及其生理作用 | 第11-12页 |
| 1.3 大豆血红蛋白的性质与功能 | 第12-13页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第13-14页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第14-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 菌株 | 第16页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第16页 |
| 2.1.4 实验试剂与仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.4.1 实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4.2 实验仪器 | 第17页 |
| 2.1.5 引物 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-34页 |
| 2.2.1 目的基因的获得 | 第18-21页 |
| 2.2.2 原核表达载体的构建 | 第21-29页 |
| 2.2.3 转基因工程菌株的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.4 转基因工程菌株的发光酶活性检测 | 第30页 |
| 2.2.5 转基因工程菌株的Western Blot鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.6 质粒的遗传稳定性检测 | 第32页 |
| 2.2.7 大豆生物量及固氮酶活性测定 | 第32-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-58页 |
| 3.1 nodD基因和lba基因的扩增及生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.1.1 nodD基因和lba基因的PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.1.2 目的基因的生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 3.2 原核表达载体的构建 | 第36-43页 |
| 3.2.1 重组载体pET-P_(lac)-nodD的构建 | 第36-38页 |
| 3.2.2 重组载体pTR-P_(lac)-nodD-lba的构建 | 第38-41页 |
| 3.2.3 原核表达载体pTR-P_(lac)-nodD-lba的构建 | 第41-43页 |
| 3.3 转基因大豆根瘤菌工程菌株的检测 | 第43-48页 |
| 3.3.1 转基因大豆根瘤菌工程菌株的筛选 | 第43-44页 |
| 3.3.2 转基因大豆根瘤菌工程菌株的发光酶活性检测 | 第44-46页 |
| 3.3.3 转基因大豆根瘤菌工程菌株的Western Blot检测 | 第46-47页 |
| 3.3.4 转基因大豆根瘤菌工程菌株质粒遗传稳定性测定 | 第47-48页 |
| 3.4 大豆生物量及固氮酶活性测定结果 | 第48-58页 |
| 3.4.1 转化费氏中华根瘤菌工程菌株的测定结果 | 第48-52页 |
| 3.4.2 转化土著大豆根瘤菌的工程菌株的测定结果 | 第52-58页 |
| 第4章 讨论 | 第58-60页 |
| 4.1 表达载体的选择与构建 | 第58页 |
| 4.2 不同转基因工程菌株对大豆固氮酶活性的影响 | 第58-59页 |
| 4.3 转基因工程菌株的蛋白鉴定 | 第59页 |
| 4.4 下一步实验设想 | 第59-60页 |
| 第5章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第72-73页 |
