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鸭病毒性肝炎弱毒活疫苗临床免疫试验研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略词表第9-14页
1 文献综述第14-24页
   ·概述第14页
   ·病原学第14-15页
   ·鸭病毒性肝炎的流行病学第15页
   ·鸭病毒性肝炎的临床症状和病理变化第15-16页
   ·检测鸭病毒性肝炎的主要方法第16-20页
     ·病原的分离鉴定第16页
     ·血清学方法第16-19页
     ·分子生物学方法第19-20页
   ·鸭病毒性肝炎疫苗的研究概况第20-22页
   ·鸭病毒性肝炎母源抗体的研究概况第22-23页
   ·选题目的第23-24页
2 试验材料及方法第24-39页
   ·主要试验材料、试剂、仪器第24-27页
     ·试验毒株第24页
     ·参考毒(菌)株第24页
     ·试验动物第24页
     ·鸭肝炎弱毒活疫苗第24页
     ·主要试验试剂及配方第24-26页
     ·主要试验仪器第26-27页
   ·检测鸭肝炎抗体试验方法的建立第27-32页
     ·DHV-Ⅰ XC-1株准备及其半数致死量的测定第27-28页
       ·DHV-Ⅰ XC-1复壮第27页
       ·复壮毒对雏鸭的半数致死量的测定第27-28页
     ·检测中和抗体的试验方法第28-29页
       ·DH-Ⅰ弱毒(鸡胚适应毒)对鸡胚半数致死量的测定第28页
       ·鸡胚中和法测抗体的试验操作第28-29页
     ·间接酶联免疫吸附(ELISA)方法的建立第29-32页
       ·抗原的制备与纯化第29页
       ·DHV-Ⅰ阴性和阳性血清的制备第29页
       ·阴性鸭IgG的提取第29-30页
       ·间接ELISA反应条件的确定第30-31页
         ·酶标二抗最佳稀释度的确定第30页
         ·抗原和抗体最佳稀释度的确定第30页
         ·DHV阴性血清及阴性卵黄的临界值的确定第30页
         ·清作用时间及封闭液的选择第30-31页
       ·间接ELISA操作程序和判定第31页
       ·特异性试验第31页
       ·敏感性试验第31页
       ·重复性试验第31-32页
       ·符合性试验第32页
   ·种鸭免疫试验第32-33页
     ·种鸭免疫鸭肝炎弱毒活疫苗第32页
     ·种鸭的体液免疫测定第32页
       ·种鸭免疫后的血清抗体效价的测定第32页
       ·种鸭免疫后所产种蛋的卵黄抗体效价的测定第32页
     ·种鸭的细胞免疫测定第32-33页
     ·种鸭的后代雏鸭攻毒试验第33页
   ·雏鸭免疫试验第33-34页
     ·雏鸭免疫鸭肝炎弱毒活疫苗第33页
     ·雏鸭的体液免疫测定第33-34页
     ·雏鸭的细胞免疫测定第34页
     ·雏鸭免疫后的攻毒试验第34页
   ·免疫组化检测DHV-Ⅰ弱毒在雏鸭体内的分布规律第34-39页
     ·雏鸭接种鸭肝炎弱毒活疫苗及组织样品的采集第34页
     ·免疫组化方法的建立第34-38页
       ·兔抗DHV-Ⅰ血清的制备第34-35页
       ·兔抗DHV-Ⅰ抗体的提取第35页
       ·兔抗DHV-Ⅰ-IgG的鉴定第35页
       ·组织脱水、包埋及切片的制作第35-36页
       ·免疫组化试验条件的优化筛选第36页
       ·免疫组化操作步骤第36-37页
       ·免疫组化结果判定第37页
       ·特异性试验第37-38页
     ·用免疫组化检测弱毒在雏鸭体内的分布第38-39页
3 试验结果第39-58页
   ·强毒、弱毒的准备第39-41页
     ·DHV-Ⅰ XC-1株复壮第39-40页
     ·复壮毒对雏鸭的半数致死量第40页
     ·DHV-Ⅰ弱毒(鸡胚适应毒)对鸡胚的半数致死量第40-41页
   ·间接酶联免疫吸附(ELISA)方法的建立第41-45页
     ·抗原的制备与纯化第41页
     ·DHV-Ⅰ阴性和阳性血清的制备第41页
     ·阴性鸭IgG的纯化第41页
     ·间接ELISA反应条件的确定第41-42页
       ·酶标二抗的最佳稀释度确定第41页
       ·抗原和抗体最佳稀释度的确定第41页
       ·DHV阴性血清及阴性卵黄的临界值的确定第41页
       ·血清作用时间及封闭液的选择第41-42页
     ·特异性试验第42页
     ·敏感性试验第42页
     ·重复性试验第42页
     ·符合性试验第42-45页
   ·种鸭免疫第45-49页
     ·种鸭的体液免疫第45-46页
       ·种鸭免疫后的血清的ELISA效价第45页
       ·种鸭免疫后的血清的中和效价第45-46页
       ·种鸭免疫后所产种蛋的卵黄抗体的ELISA效价第46页
       ·种鸭免疫后所产种蛋的卵黄抗体的中和效价第46页
     ·种鸭的细胞免疫第46页
     ·种鸭的后代雏鸭攻毒第46-49页
   ·雏鸭免疫试验第49-51页
     ·雏鸭的体液免疫第49页
       ·雏鸭血清的ELISA效价第49页
       ·雏鸭血清的中和效价第49页
     ·雏鸭的细胞免疫第49-50页
     ·雏鸭免疫后的攻毒第50-51页
   ·DHV-Ⅰ弱毒在雏鸭体内的分布规律第51-58页
     ·免疫组化方法的建立第51-52页
       ·兔抗DHV-Ⅰ血清的制备第51页
       ·兔抗DHV-Ⅰ抗体的纯化第51-52页
       ·间接免疫酶染色条件的优化筛选第52页
       ·特异性试验第52页
     ·用免疫组化检测弱毒在体内的分布第52-58页
4 讨论第58-64页
   ·DHV-Ⅰ XC-1株复壮第58页
   ·DHV-Ⅰ的增殖及纯化第58-59页
   ·鸭肝炎抗体的检测方法第59-61页
     ·中和试验第59-60页
     ·间接ELISA第60-61页
   ·鸭淋巴细胞转化试验第61页
   ·攻毒试验第61-62页
   ·免疫组化第62-64页
     ·免疫组化方法的建立与优化第62页
     ·免疫组化的特异性第62-63页
     ·免疫组化的优点第63页
     ·雏鸭免疫组化结果与雏鸭免疫效果的相互关系探讨第63-64页
5. 结论第64-65页
参考文献第65-71页
致谢第71-72页
附录:发表论文情况第72页

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