| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·杆状病毒的概述 | 第11-14页 |
| ·杆状病毒的基本特性 | 第11页 |
| ·杆状病毒分类及进展 | 第11-13页 |
| ·杆状病毒的应用 | 第13-14页 |
| ·生物杀虫剂研制的概况及重组昆虫杆状病毒杀虫剂研究进展 | 第14-16页 |
| ·蜘蛛毒素研究现状以及作为生物杀虫剂的特点、优点 | 第16-17页 |
| ·基因工程杆状病毒用于生物防治的展望 | 第17-18页 |
| 第二章 立题依据、研究内容和技术路线 | 第18-21页 |
| ·立题依据 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第19页 |
| ·蜘蛛毒素基因Ar1b 原核表达、表达产物的纯化及其活性分析 | 第19页 |
| ·穿梭载体HtEC 载体 | 第19页 |
| ·蜘蛛毒素基因Ar1b 重组HearNPV Bacmid 的构建 | 第19页 |
| ·研究方法 | 第19页 |
| ·蜘蛛毒素基因Ar1b 的原核表达、表达产物的纯化及活性分析 | 第19页 |
| ·穿梭载体HtEC 载体 | 第19页 |
| ·蜘蛛毒素基因Ar1b 重组HearNPV Bacmid 的构建 | 第19页 |
| ·技术路线 | 第19-21页 |
| ·蜘蛛毒素基因Ar1b 的原核表达及重组病毒的构建 | 第19-20页 |
| ·蜘蛛毒素基因Ar1b 重组HearNPV 具体路线图 | 第20-21页 |
| 第三章 材料和方法 | 第21-24页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·菌种和载体 | 第21页 |
| ·昆虫、病毒、细胞系和细胞培养基 | 第21页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第21页 |
| ·其它试剂 | 第21页 |
| ·研究方法 | 第21-23页 |
| ·质粒DNA 的小量制备 | 第21页 |
| ·CaCl_2 制备新鲜的感受态细胞 | 第21页 |
| ·质粒DNA 转化 | 第21页 |
| ·目的片段分离回收 | 第21-22页 |
| ·酶切反应 | 第22页 |
| ·粘性末端连接反应 | 第22页 |
| ·外源基因在E. coli 中的表达 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22页 |
| ·蛋白印迹(Western blot） | 第22页 |
| ·同源重组电转化感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·电转化感受态细胞的方法 | 第22页 |
| ·HearNPV Bacmid 基因组的提取 | 第22-23页 |
| ·实验试剂配制 | 第23-24页 |
| ·细菌培养基 | 第23页 |
| ·碱法质粒抽提液 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 相关试剂 | 第23页 |
| ·Western blot 相关试剂 | 第23页 |
| ·常用缓冲液 | 第23页 |
| ·抗菌素 | 第23页 |
| ·RNA 酶（10mg/ml） | 第23-24页 |
| 第四章 蜘蛛毒素基因Ar1b 基因的原核表达、纯化及活性测定 | 第24-33页 |
| ·材料和方法 | 第24-26页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-26页 |
| ·结果分析 | 第26-32页 |
| ·PGE-Ar1b、表达载体PET-32(a+)-Ar1b 双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白TRX-Ar1b 的表达 | 第27-29页 |
| ·Western 印迹对目的融合蛋白的检测 | 第29页 |
| ·融合蛋白rTrx-Ar1b 的纯化 | 第29-31页 |
| ·融合蛋白rTrx-Ar1b 的生物测定 | 第31-32页 |
| ·小结与讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第五章 蜘蛛毒素基因Ar1b 重组HearNPV Bacmid 的构建 | 第33-41页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·方法(一般方法见第三章) | 第33-36页 |
| ·结果分析 | 第36-40页 |
| ·Egt-F、Haph.p、CmR、Egt-R 的PCR 扩增 | 第36-37页 |
| ·Egt-F、Haph.p、CmR、Egt-R 与pGEM-T Easy 载体连接 | 第37-38页 |
| ·Egt-F、Haph.p、CmR、Egt-R 与pFastBac HTb 载体的连接 | 第38-39页 |
| ·毒素基因Ar1b 与HtEC 的连接 | 第39页 |
| ·重组HearNPV-Ar1b Bacmid 的构建及PCR 鉴定 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第41-43页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
