摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 非酒精性脂肪肝病 | 第11-12页 |
1.1.1 NAFLD的发病机制 | 第11-12页 |
1.1.2 脂肪酸与NAFLD的关系 | 第12页 |
1.2 脂肪酸 | 第12-14页 |
1.2.1 脂肪酸的分类 | 第12-13页 |
1.2.2 饱和脂肪酸 | 第13页 |
1.2.3 不饱和脂肪酸 | 第13-14页 |
1.2.4 NAFLD与脂肪酸 | 第14页 |
1.3 核转录因子NF-E2相关因子 | 第14-16页 |
1.3.1 Nrf2的结构和功能 | 第14-15页 |
1.3.2 Nrf2与NAFLD | 第15页 |
1.3.3 Nrf2与CYP450酶 | 第15-16页 |
1.4 CYP7A1研究进展 | 第16-17页 |
1.4.1 CYP7A1概述 | 第16页 |
1.4.2 胆固醇对CYP7A1的调节 | 第16-17页 |
1.4.3 脂肪酸对CYP7A1的调节 | 第17页 |
1.5 研究目的和意义 | 第17-19页 |
2 材料和方法 | 第19-29页 |
2.1 试验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 试验细胞 | 第19页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第19页 |
2.1.3 药品和试剂 | 第19-20页 |
2.1.4 溶液配制 | 第20-22页 |
2.2 试验方法 | 第22-29页 |
2.2.1 HepG2细胞的培养 | 第22页 |
2.2.2 ALA和AA对HepG2细胞诱导浓度的选择 | 第22-23页 |
2.2.3 瞬时过表达Nrf2细胞模型的建立 | 第23-24页 |
2.2.4 瞬时沉默Nrf2细胞模型的建立 | 第24-25页 |
2.2.5 ALA和AA对HepG2细胞Nrf2和CYP7A1蛋白质表达量的影响 | 第25-26页 |
2.2.6 ALA和AA对HepG2细胞Nrf2和CYP7A1 mRNA表达量的影响 | 第26-27页 |
2.2.7 ALA和AA对Nrf2基因沉默HepG2细胞CYP7A1表达的影响 | 第27-28页 |
2.2.8 ALA和AA对Nrf2基因过表达HepG2细胞CYP7A1表达的影响 | 第28页 |
2.2.9 统计学分析 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-44页 |
3.1 不同浓度的ALA和AA对HepG2细胞活性的影响 | 第29页 |
3.2 ALA和AA对HepG2细胞Nrf2和CYP7A1表达的影响 | 第29-33页 |
3.2.1 ALA和AA对HepG2细胞Nrf2 mRNA表达量的影响 | 第29-30页 |
3.2.2 ALA和AA对HepG2细胞Nrf2蛋白质表达量的影响 | 第30-31页 |
3.2.3 ALA和AA对HepG2细胞CYP7A1 mRNA表达量的影响 | 第31-32页 |
3.2.4 ALA和AA对HepG2细胞CYP7A1蛋白质表达量的影响 | 第32-33页 |
3.3 质粒转染条件的优化 | 第33-35页 |
3.3.1 荧光显微镜检测HepG2细胞质粒转染效率 | 第33页 |
3.3.2 质粒转染时间对HepG2细胞Nrf2蛋白质表达量的影响 | 第33-34页 |
3.3.3 质粒转染时间对HepG2细胞Nrf2 mRNA表达量的影响 | 第34-35页 |
3.4 siRNA转染条件的优化 | 第35-38页 |
3.4.1 荧光显微镜检测siRNA转染效率 | 第35页 |
3.4.2 不同siRNA序列对HepG2细胞Nrf2沉默效率的影响 | 第35-36页 |
3.4.3 siRNA转染时间对HepG2细胞Nrf2蛋白质表达量的影响 | 第36-37页 |
3.4.4 siRNA转染时间对Nrf2 mRNA表达量的影响 | 第37-38页 |
3.5 沉默或过表达Nrf2对HepG2细胞CYP7A1表达的影响 | 第38-40页 |
3.6 ALA和AA诱导对Nrf2沉默或过表达HepG2细胞CYP7A1蛋白质表达的影响 | 第40-42页 |
3.6.1 ALA对Nrf2沉默或过表达HepG2细胞CYP7A1蛋白质表达量的影响 | 第40-41页 |
3.6.2 AA对沉默或过表达Nrf2的HepG2细胞CYP7A1蛋白质表达量的影响 | 第41-42页 |
3.7 ALA和AA对沉默或过表达Nrf2 HepG2细胞的CYP7A1 mRNA表达量的影响 | 第42-44页 |
3.7.1 ALA对沉默或过表达Nrf2的CYP7A1 mRNA表达量的影响 | 第42-43页 |
3.7.2 AA对沉默和过表达Nrf2的HepG2细胞CYP7A1 mRNA表达量的影响 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-48页 |
4.1 细胞系和脂肪酸种类的选择 | 第44页 |
4.2 不同浓度脂肪酸对细胞活性的影响 | 第44-45页 |
4.3 ALA和AA对Nrf2表达的影响 | 第45页 |
4.4 ALA和AA对CYP7A1表达的影响 | 第45-46页 |
4.5 Nrf2基因沉默和过表达模型的建立 | 第46-47页 |
4.6 Nrf2沉默和过表达后ALA和AA对CYP7A1表达的影响 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |