致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第16-25页 |
1.1 模式植物拟南芥 | 第16页 |
1.2 正向遗传学途径与化学诱导激活XVE系统 | 第16-17页 |
1.3 Tail-PCR克隆技术 | 第17页 |
1.4 萜类合成酶与异戊烯基转移酶 | 第17-19页 |
1.4.1 萜类合成酶 | 第17-18页 |
1.4.2 异戊烯基转移酶 | 第18-19页 |
1.5 植物硒研究进展 | 第19-23页 |
1.5.1 硒对植物的作用 | 第19-21页 |
1.5.2 植物对硒的吸收 | 第21页 |
1.5.3 植物对硒的运输、代谢途径 | 第21-22页 |
1.5.4 植物对硒耐受的机理 | 第22-23页 |
1.6 植物抗干旱、低温和渗透胁迫的研究进展 | 第23-24页 |
1.6.1 植物抗干旱胁迫研究进展 | 第23页 |
1.6.2 植物抗低温胁迫研究进展 | 第23页 |
1.6.3 植物抗渗透胁迫研究进展 | 第23-24页 |
1.7 本研究目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-43页 |
2.1 实验材料 | 第25页 |
2.2 生化试剂及药品 | 第25-28页 |
2.2.1 常用分子生物学试剂盒 | 第25页 |
2.2.2 常用生化试剂 | 第25页 |
2.2.3 常用溶液与试剂的配制方法和用量 | 第25-28页 |
2.3 主要实验仪器、设备 | 第28页 |
2.4 实验方法 | 第28-43页 |
2.4.1 拟南芥的土壤培养 | 第28-29页 |
2.4.2 拟南芥的培养皿培养 | 第29页 |
2.4.3 根长与鲜重的测量 | 第29页 |
2.4.4 拟南芥组织中Se含量测定 | 第29-30页 |
2.4.5 拟南芥组织中GPX活性测定 | 第30页 |
2.4.6 谷胱甘肽(GSH)含量的测定 | 第30-31页 |
2.4.7 细胞分裂素含量的测定 | 第31-32页 |
2.4.8 拟南芥DNA的提取(CTAB)方法 | 第32-33页 |
2.4.9 Tail-PCR法克隆拟南芥耐硒基因 | 第33-36页 |
2.4.10 Trizol法抽提拟南芥总RNA | 第36页 |
2.4.11 RT-PCR和QRT-PCR | 第36-38页 |
2.4.12 PCR引物设计 | 第38-39页 |
2.4.13 拟南芥的杂交 | 第39-40页 |
2.4.14 脯氨酸含量测定 | 第40-41页 |
2.4.15 可溶性糖含量测定 | 第41-42页 |
2.4.16 丙二醛含量测定 | 第42页 |
2.4.17 实验数据的分析与处理 | 第42-43页 |
第三章 结果与分析 | 第43-64页 |
3.1 耐硒突变体vse2的分离 | 第43-46页 |
3.1.1 突变体vse2的分离 | 第43-44页 |
3.1.2 土壤培养条件下的WT和突变体vse2 | 第44-45页 |
3.1.3 突变体vse2发芽率分析 | 第45-46页 |
3.2 VSE2基因克隆 | 第46-48页 |
3.2.1 Tail-PCR法克隆VSE2基因 | 第46-47页 |
3.2.2 VSE2基因序列 | 第47页 |
3.2.3 XVE载体插入位点分析 | 第47-48页 |
3.3 TPS22基因结构与表达模式分析 | 第48-51页 |
3.3.1 TPS22基因表达水平分析 | 第48-49页 |
3.3.2 TPS22基因同源性分析和氨基酸序列比对 | 第49-51页 |
3.3.4 基因表达模式分析 | 第51页 |
3.4 TPS22基因调控硒耐受的机理分析 | 第51-57页 |
3.4.1 突变体vse2的硒吸收转运及代谢分析 | 第51-54页 |
3.4.3 TPS22基因调控的硒耐受部分依赖GSH途径 | 第54-56页 |
3.4.4 TPS22基因与细胞分裂素 | 第56-57页 |
3.5 突变体vse2对其他胁迫的响应 | 第57-64页 |
3.5.1 突变体vse2对干旱胁迫的响应 | 第57-60页 |
3.5.2 突变体vse2对低温胁迫的响应 | 第60-61页 |
3.5.3 突变体vse2对甘露醇胁迫的响应 | 第61-64页 |
第四章 讨论与展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第74页 |