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一个拟南芥耐硒基因的克隆及功能分析

致谢第7-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 前言第16-25页
    1.1 模式植物拟南芥第16页
    1.2 正向遗传学途径与化学诱导激活XVE系统第16-17页
    1.3 Tail-PCR克隆技术第17页
    1.4 萜类合成酶与异戊烯基转移酶第17-19页
        1.4.1 萜类合成酶第17-18页
        1.4.2 异戊烯基转移酶第18-19页
    1.5 植物硒研究进展第19-23页
        1.5.1 硒对植物的作用第19-21页
        1.5.2 植物对硒的吸收第21页
        1.5.3 植物对硒的运输、代谢途径第21-22页
        1.5.4 植物对硒耐受的机理第22-23页
    1.6 植物抗干旱、低温和渗透胁迫的研究进展第23-24页
        1.6.1 植物抗干旱胁迫研究进展第23页
        1.6.2 植物抗低温胁迫研究进展第23页
        1.6.3 植物抗渗透胁迫研究进展第23-24页
    1.7 本研究目的和意义第24-25页
第二章 材料与方法第25-43页
    2.1 实验材料第25页
    2.2 生化试剂及药品第25-28页
        2.2.1 常用分子生物学试剂盒第25页
        2.2.2 常用生化试剂第25页
        2.2.3 常用溶液与试剂的配制方法和用量第25-28页
    2.3 主要实验仪器、设备第28页
    2.4 实验方法第28-43页
        2.4.1 拟南芥的土壤培养第28-29页
        2.4.2 拟南芥的培养皿培养第29页
        2.4.3 根长与鲜重的测量第29页
        2.4.4 拟南芥组织中Se含量测定第29-30页
        2.4.5 拟南芥组织中GPX活性测定第30页
        2.4.6 谷胱甘肽(GSH)含量的测定第30-31页
        2.4.7 细胞分裂素含量的测定第31-32页
        2.4.8 拟南芥DNA的提取(CTAB)方法第32-33页
        2.4.9 Tail-PCR法克隆拟南芥耐硒基因第33-36页
        2.4.10 Trizol法抽提拟南芥总RNA第36页
        2.4.11 RT-PCR和QRT-PCR第36-38页
        2.4.12 PCR引物设计第38-39页
        2.4.13 拟南芥的杂交第39-40页
        2.4.14 脯氨酸含量测定第40-41页
        2.4.15 可溶性糖含量测定第41-42页
        2.4.16 丙二醛含量测定第42页
        2.4.17 实验数据的分析与处理第42-43页
第三章 结果与分析第43-64页
    3.1 耐硒突变体vse2的分离第43-46页
        3.1.1 突变体vse2的分离第43-44页
        3.1.2 土壤培养条件下的WT和突变体vse2第44-45页
        3.1.3 突变体vse2发芽率分析第45-46页
    3.2 VSE2基因克隆第46-48页
        3.2.1 Tail-PCR法克隆VSE2基因第46-47页
        3.2.2 VSE2基因序列第47页
        3.2.3 XVE载体插入位点分析第47-48页
    3.3 TPS22基因结构与表达模式分析第48-51页
        3.3.1 TPS22基因表达水平分析第48-49页
        3.3.2 TPS22基因同源性分析和氨基酸序列比对第49-51页
        3.3.4 基因表达模式分析第51页
    3.4 TPS22基因调控硒耐受的机理分析第51-57页
        3.4.1 突变体vse2的硒吸收转运及代谢分析第51-54页
        3.4.3 TPS22基因调控的硒耐受部分依赖GSH途径第54-56页
        3.4.4 TPS22基因与细胞分裂素第56-57页
    3.5 突变体vse2对其他胁迫的响应第57-64页
        3.5.1 突变体vse2对干旱胁迫的响应第57-60页
        3.5.2 突变体vse2对低温胁迫的响应第60-61页
        3.5.3 突变体vse2对甘露醇胁迫的响应第61-64页
第四章 讨论与展望第64-66页
参考文献第66-74页
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况第74页

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