| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩略对照表 | 第8-13页 |
| 第一章 microRNAs的研究进展概述 | 第13-22页 |
| 1.1 miRNA的发现及生物发生过程 | 第13-15页 |
| 1.2 miRNA的作用机制 | 第15-18页 |
| 1.3 miRNAs的生物学功能 | 第18-20页 |
| 1.4 miRNAs的功能研究手段 | 第20-22页 |
| 第二章 miRNAs在DNA损伤应答和肿瘤治疗中的研究进展 | 第22-34页 |
| 2.1 DNA损伤应答及其在肿瘤治疗中的作用 | 第22-23页 |
| 2.2 miRNAs在DNA损伤应答调控中的研究进展 | 第23-29页 |
| 2.2.1 miRNAs在损伤信号识别、放大、传导中的调控作用 | 第24-25页 |
| 2.2.2 miRNAs对DNA损伤修复的调控 | 第25-26页 |
| 2.2.3 miRNAs对周期阻滞及凋亡的调控 | 第26-27页 |
| 2.2.4 miRNAs对细胞衰老的调控 | 第27-29页 |
| 2.3 miRNAs在肿瘤治疗中的应用 | 第29-32页 |
| 2.3.1 miRNAs:肿瘤放化疗药物耐药性的指示物 | 第29-30页 |
| 2.3.2 miRNAs:新型的肿瘤放化疗辅助性增敏剂 | 第30-32页 |
| 2.4 miR-638的研究背景 | 第32-34页 |
| 第三章 急性髓系白血病细胞分化后miR-638的表达变化对DNA修复的影响 | 第34-49页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第34-36页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.2 主要试剂配制 | 第35-36页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第36页 |
| 3.3 实验方法及步骤 | 第36-43页 |
| 3.3.1 细胞的培养 | 第36-37页 |
| 3.3.2 体外诱导髓系白血病细胞分化 | 第37页 |
| 3.3.3 流式细胞术分析细胞表面分子标志物的表达情况 | 第37-38页 |
| 3.3.4 细胞总RNA提取 | 第38页 |
| 3.3.5 miRNA实时荧光定量PCR | 第38-40页 |
| 3.3.6 细胞转染 | 第40-41页 |
| 3.3.7 彗星拖尾Comet assay实验 | 第41-42页 |
| 3.3.8 CCK-8法检测细胞存活率 | 第42-43页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第43-47页 |
| 3.4.1 急性髓系白血病细胞分化过程中miR-638的表达分析 | 第43-44页 |
| 3.4.2 急性髓系白血病细胞终末分化后DNA损伤修复能力的变化 | 第44-45页 |
| 3.4.3 过表达miR-638对K562细胞DNA损伤修复能力的影响 | 第45-47页 |
| 3.4.4 过表达miR-638对K562细胞化疗药物敏感性的影响 | 第47页 |
| 3.5 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 miR-638通过抑制SMC1A阻碍DNA损伤修复过程 | 第49-71页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第49-51页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.2.2 主要试剂配制 | 第50-51页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第51页 |
| 4.3 实验方法及步骤 | 第51-61页 |
| 4.3.1 双荧光素酶报告实验 | 第52-54页 |
| 4.3.2 Western blot实验 | 第54-57页 |
| 4.3.3 实时荧光定量PCR | 第57-59页 |
| 4.3.4 miR-638稳转下调U20S细胞系构建 | 第59-60页 |
| 4.3.5 哺乳动物细胞miRNA和质粒共转染 | 第60-61页 |
| 4.3.6 其他实验方法 | 第61页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第61-68页 |
| 4.4.1 SMC1A是miR-638的调控靶标之一 | 第61-65页 |
| 4.4.2 SMC1A消除miR-638对细胞DNA损伤修复能力的抑制作用 | 第65-68页 |
| 4.5 讨论 | 第68-71页 |
| 第五章 miR-638对DNA损伤应答调控机制初探 | 第71-78页 |
| 5.1 引言 | 第71页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第71-72页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第71-72页 |
| 5.2.2 主要试剂配制 | 第72页 |
| 5.2.3 仪器设备 | 第72页 |
| 5.3 实验方法及步骤 | 第72-73页 |
| 5.3.1 免疫荧光共定位实验 | 第72-73页 |
| 5.3.2 Western Blot实验 | 第73页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第73-76页 |
| 5.4.1 过表达miR-638对Cisplatin损伤刺激的K562细胞中γ-H2AX及SMC1A表达影响 | 第73-74页 |
| 5.4.2 过表达miR-638促进Cisplatin损伤处理后γ-H2AX在细胞核中的募集 | 第74-75页 |
| 5.4.3 过表达miR-638不改变Cisplatin损伤处理后ATM在细胞中的表达 | 第75-76页 |
| 5.5 讨论 | 第76-78页 |
| 第六章 miR-638对DDR相关过程的调控作用初探 | 第78-87页 |
| 6.1 引言 | 第78页 |
| 6.2 实验材料与仪器 | 第78-79页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第78-79页 |
| 6.2.2 主要试剂配制 | 第79页 |
| 6.2.3 仪器设备 | 第79页 |
| 6.3 实验方法及步骤 | 第79-81页 |
| 6.3.1 Western Blot实验 | 第79页 |
| 6.3.2 荧光定量PCR | 第79-80页 |
| 6.3.3 细胞周期检测 | 第80页 |
| 6.3.4 β-半乳糖苷酶染色细胞衰老检测 | 第80-81页 |
| 6.4 实验结果 | 第81-84页 |
| 6.4.1 miR-638的表达变化对U2OS细胞周期的影响 | 第81-82页 |
| 6.4.2 肿瘤化疗药物刺激细胞衰老的发生 | 第82-83页 |
| 6.4.3 探索HFF细胞中,miR-638表达变化对细胞衰老的影响 | 第83-84页 |
| 6.4.4 探索U2OS细胞中,miR-638表达变化对细胞衰老的影响 | 第84页 |
| 6.5 讨论 | 第84-87页 |
| 研究总结及展望 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-101页 |
| 硕士期间发表论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
