摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 概论 | 第16-31页 |
1 小麦花发育的形态学研究 | 第16-18页 |
·小麦穗、花的构造 | 第17页 |
·小麦穗分化的过程 | 第17-18页 |
2 花发育的"ABC"模型与MADS-BOX基因 | 第18页 |
3 小麦花发育研究进展 | 第18-24页 |
·小麦中的A类基因 | 第19-21页 |
·小麦中的B类基因 | 第21页 |
·小麦中的C类基因 | 第21-22页 |
·小麦中的D类基因 | 第22-23页 |
·小麦中的E类基因 | 第23-24页 |
4 基因差异表达的研究方法 | 第24-29页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第24-26页 |
·引物退火控制技术 | 第26-29页 |
5. 小麦三雌蕊突变体研究进展 | 第29-30页 |
6 本研究的目标与方法 | 第30-31页 |
·研究目标 | 第30页 |
·研究方法 | 第30-31页 |
第二章 小麦三雌蕊性状近等基因系的培育与SRAP分子标记检测 | 第31-41页 |
1 前言 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-36页 |
·实验材料 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-36页 |
·近等基因系的培育及农艺性状评价 | 第32页 |
·SRAP分析 | 第32-36页 |
3 结果与分析 | 第36-39页 |
·近等基因系的培育及农艺性状评价 | 第36-37页 |
·SRAP引物筛选与分子标记的扩增结果 | 第37页 |
·遗传相似性 | 第37-38页 |
·聚类分析 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 利用抑制性差减杂交分离小麦三雌蕊突变体幼穗中差异表达基因 | 第41-67页 |
1 前言 | 第41-42页 |
2 材料与方法 | 第42-55页 |
·供试材料 | 第42页 |
·试剂与仪器 | 第42页 |
·试剂 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-55页 |
·总RNA的提取 | 第42-43页 |
·mRNA分离纯化 | 第43-44页 |
·cDNA第一链合成 | 第44页 |
·cDNA第二链合成 | 第44-45页 |
·cDNA的纯化 | 第45页 |
·cDNA RsaI酶切 | 第45-46页 |
·接头连接 | 第46-47页 |
·差减杂交 | 第47页 |
·两轮差减PCR | 第47-49页 |
·两次差减PCR产物的纯化 | 第49页 |
·差减文库的克隆 | 第49-51页 |
·斑点杂交 | 第51-53页 |
·测序及序列分析 | 第53页 |
·Realtime-PCR检测 | 第53-55页 |
3 结果与分析 | 第55-64页 |
·总RNA的分离 | 第55-56页 |
·MRNA分离结果 | 第56页 |
·差减效率验证 | 第56-57页 |
·差减cDNA文库的筛选 | 第57-58页 |
·斑点杂交结果 | 第58页 |
·序列分析 | 第58-64页 |
·CM28TP正向SSH cDNA文库序列分析 | 第58-60页 |
·CSTP正向SSH cDNA文库序列分析 | 第60-63页 |
·两个SSH cDNA文库的比较分析 | 第63-64页 |
·Realtime-PCR检测 | 第64页 |
4 讨论 | 第64-67页 |
第四章 利用引物退火控制技术分离小麦三雌蕊突变体幼穗中差异表达基因 | 第67-77页 |
1 前言 | 第67-68页 |
2 材料与方法 | 第68-72页 |
·试验材料 | 第68页 |
·试剂与仪器 | 第68页 |
·试剂 | 第68页 |
·主要仪器 | 第68页 |
·试验方法 | 第68-72页 |
·RNA提取 | 第68页 |
·cDNA第一链的合成 | 第68-69页 |
·ACP差异显示RT-PCR | 第69-70页 |
·差异条带的回收 | 第70页 |
·连接反应 | 第70页 |
·宿主菌Ecoli DH-5α感受态细胞的制备 | 第70页 |
·转化 | 第70页 |
·菌落PCR | 第70-71页 |
·测序及序列分析 | 第71页 |
·Realtime-PCR检测 | 第71-72页 |
3 结果与分析 | 第72-74页 |
·总RNA的分离 | 第72-73页 |
·ACP差异显示RT-PCR结果 | 第73页 |
·序列分析结果 | 第73-74页 |
·Realtime-PCR检测结果 | 第74页 |
4 讨论 | 第74-77页 |
第五章 小麦一个RING FINGER泛素蛋白连接酶CDNA序列的克隆及生物信息学分析 | 第77-87页 |
1 前言 | 第77-78页 |
2 材料与方法 | 第78-79页 |
·植物材料 | 第78页 |
·方法 | 第78-79页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第78页 |
·TaZFP-1的克隆及序列测定 | 第78-79页 |
·生物信息学分析 | 第79页 |
3 结果与分析 | 第79-85页 |
·总RNA提取结果 | 第79-80页 |
·TAZFP-1的克隆 | 第80页 |
·TAZFP-1的生物信息学分析 | 第80-85页 |
·TaZFP-1的cDNA序列及氨基酸序列分析 | 第80页 |
·TaZFP-1蛋白的疏水/亲水性分析 | 第80-82页 |
·TaZFP-1蛋白的二级结构预测 | 第82页 |
·TaZFP-1蛋白的结构域分析 | 第82页 |
·TaZFP-1蛋白与其它植物RING finger蛋白序列的比较和进化树分析 | 第82-85页 |
4 讨论 | 第85-87页 |
第六章 小麦一个内切-1,4-β-葡聚糖酶cDNA序列的克隆及生物信息学分析 | 第87-99页 |
1 前言 | 第87-88页 |
2 材料与方法 | 第88-91页 |
·实验材料 | 第88页 |
·方法 | 第88-91页 |
·总RNA的提取 | 第88页 |
·RT-PCR法克隆TaEG基因的中间片断 | 第88-89页 |
·利用5'RACE获得TaEG基因的5'端 | 第89-91页 |
·序列拼接及生物信息学分析 | 第91页 |
3 结果与分析 | 第91-97页 |
·总RNA提取结果 | 第91页 |
·RT-PCR法获得TAEG基因的中间片断 | 第91-92页 |
·RACE法获得TAEG基因cDNA的5'端 | 第92页 |
·TAEG基因的生物信息学分析 | 第92-97页 |
·TaEG基因的cDNA序列及氨基酸序列分析 | 第92-95页 |
·TaEG蛋白的疏水/亲水性分析 | 第95页 |
·TaEG蛋白的二级结构和三级结构预测 | 第95-96页 |
·TaGE蛋白的跨膜结构分析 | 第96-97页 |
·不同物种间EGase蛋白的同源性分析 | 第97页 |
4 讨论 | 第97-99页 |
结论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
在读期间发表的论文目录 | 第114-115页 |