本论文的创新点 | 第6-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
本论文縮略词表 | 第14-16页 |
第一章 前言 | 第16-42页 |
1.1 生长素信号途径 | 第16-29页 |
1.1.1 生长素的发现及生理作用 | 第16-17页 |
1.1.2 生长素的极性运输 | 第17-18页 |
1.1.3 生长素在植物发育中作用机理研究进展 | 第18-22页 |
1.1.4 生长素信号途径 | 第22-29页 |
1.2 植物花器官发育 | 第29-36页 |
1.2.1 拟南芥花的结构 | 第29页 |
1.2.2 拟南芥花的发育过程 | 第29-30页 |
1.2.3 拟南芥花器官发育的ABC模型 | 第30-32页 |
1.2.4 调控植物开花的途径 | 第32-36页 |
1.3 茉莉酸合成途径及其信号通路 | 第36-40页 |
1.3.1 茉莉酸合成途径 | 第37-38页 |
1.3.2 茉莉酸信号通路 | 第38-40页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第40-42页 |
第二章 材料与方法 | 第42-69页 |
2.1 实验材料 | 第42-52页 |
2.1.1 植物材料 | 第42页 |
2.1.2 工具酶及试剂盒 | 第42页 |
2.1.3 质粒及菌种 | 第42-45页 |
2.1.4 相关基因号及引物序列 | 第45-48页 |
2.1.5 相关试剂配制 | 第48-52页 |
2.2 实验方法 | 第52-69页 |
2.2.1 植物材料种植 | 第52-53页 |
2.2.2 植物基因组提取 | 第53页 |
2.2.3 总RNA提取法以及mRNA的反转录 | 第53-54页 |
2.2.4 大肠杆菌超级感受态细胞DH5 α的制备 | 第54-55页 |
2.2.5 获得型突变体转化质粒的构建 | 第55-59页 |
2.2.6 农杆菌感受态的制备 | 第59-60页 |
2.2.7 植物转化载体及拟南芥转化 | 第60-61页 |
2.2.8 转化后拟南芥的种子收获 | 第61页 |
2.2.9 拟南芥转化植株的筛选和转化植株纯合体的获得 | 第61-62页 |
2.2.10 显微观察 | 第62页 |
2.2.11 MG132处理实验 | 第62页 |
2.2.12 植物全蛋白提取 | 第62页 |
2.2.13 SDS-PAGE胶制备及Western Blot检测 | 第62-64页 |
2.2.14 IAA8::GUS转基因植株的获得 | 第64页 |
2.2.15 转基因拟南芥的GUS组织化学检测 | 第64页 |
2.2.16 酵母双杂交 | 第64-66页 |
2.2.17 双分子荧光(BiFC) | 第66-67页 |
2.2.18 定量PCR | 第67-68页 |
2.2.19 JA含量的测量 | 第68页 |
2.2.20 JA回复实验 | 第68-69页 |
第三章 结果与分析 | 第69-89页 |
3.1 IAA8获得型突变体的获得及表型分析 | 第69-75页 |
3.1.1 重组质粒的获得,鉴定及纯合体筛选 | 第69-70页 |
3.1.2 转基因植株的基因组鉴定 | 第70页 |
3.1.3 转基因植株的RT-PCR表达检测 | 第70-71页 |
3.1.4 转基因植株的表型分析 | 第71-75页 |
3.2 IAA8获得型突变体对其蛋白积累的影响 | 第75-79页 |
3.2.1 IAA8蛋白的定位分析 | 第76页 |
3.2.2 IAA8::GFP-mIAA8突变体中蛋白水平的改变 | 第76-77页 |
3.2.3 蛋白酶体介导的蛋白降解途径影响突变体IAA8::GFP-mIAA8中的蛋白积累 | 第77-79页 |
3.3 拟南芥中IAA8表达模式的分析 | 第79-81页 |
3.4 拟南芥IAA8下游ARFs靶基因的鉴定 | 第81-84页 |
3.4.1 自激活检测 | 第81页 |
3.4.2 酵母双杂交鉴定IAA8下游ARFs靶基因 | 第81-82页 |
3.4.3 BiFC进一步验证IAA8下游ARFs靶基因 | 第82-84页 |
3.5 IAA8获得型突变体对植物花器官发育的影响 | 第84-87页 |
3.5.1 IAA8获得型突变体改变JA合成基因表达 | 第85-86页 |
3.5.2 IAA8获得型突变体改变JA含量 | 第86页 |
3.5.3 外源施加JA可回复花器官表现型 | 第86-87页 |
3.6 小结 | 第87-89页 |
第四章 讨论 | 第89-100页 |
4.1 IAA8是一个典型的AUX/IAA家族基因参与植物多种生长发育过程 | 第89-92页 |
4.2 IAA8获得型突变体IAA8::GFP-MIAA8的表型缺陷是由于IAA8蛋白积累引起的 | 第92-96页 |
4.3 IAA8下游可能的ARFs靶基因 | 第96-98页 |
4.4 IAA8通过影响体内JA积累来调控花器官发育 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-106页 |
攻博期间发表及投稿论文 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |