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拟南芥Aux/IAA家族基因IAA8参与花器官发育的研究

本论文的创新点第6-10页
中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-13页
本论文縮略词表第14-16页
第一章 前言第16-42页
    1.1 生长素信号途径第16-29页
        1.1.1 生长素的发现及生理作用第16-17页
        1.1.2 生长素的极性运输第17-18页
        1.1.3 生长素在植物发育中作用机理研究进展第18-22页
        1.1.4 生长素信号途径第22-29页
    1.2 植物花器官发育第29-36页
        1.2.1 拟南芥花的结构第29页
        1.2.2 拟南芥花的发育过程第29-30页
        1.2.3 拟南芥花器官发育的ABC模型第30-32页
        1.2.4 调控植物开花的途径第32-36页
    1.3 茉莉酸合成途径及其信号通路第36-40页
        1.3.1 茉莉酸合成途径第37-38页
        1.3.2 茉莉酸信号通路第38-40页
    1.4 本研究的目的和意义第40-42页
第二章 材料与方法第42-69页
    2.1 实验材料第42-52页
        2.1.1 植物材料第42页
        2.1.2 工具酶及试剂盒第42页
        2.1.3 质粒及菌种第42-45页
        2.1.4 相关基因号及引物序列第45-48页
        2.1.5 相关试剂配制第48-52页
    2.2 实验方法第52-69页
        2.2.1 植物材料种植第52-53页
        2.2.2 植物基因组提取第53页
        2.2.3 总RNA提取法以及mRNA的反转录第53-54页
        2.2.4 大肠杆菌超级感受态细胞DH5 α的制备第54-55页
        2.2.5 获得型突变体转化质粒的构建第55-59页
        2.2.6 农杆菌感受态的制备第59-60页
        2.2.7 植物转化载体及拟南芥转化第60-61页
        2.2.8 转化后拟南芥的种子收获第61页
        2.2.9 拟南芥转化植株的筛选和转化植株纯合体的获得第61-62页
        2.2.10 显微观察第62页
        2.2.11 MG132处理实验第62页
        2.2.12 植物全蛋白提取第62页
        2.2.13 SDS-PAGE胶制备及Western Blot检测第62-64页
        2.2.14 IAA8::GUS转基因植株的获得第64页
        2.2.15 转基因拟南芥的GUS组织化学检测第64页
        2.2.16 酵母双杂交第64-66页
        2.2.17 双分子荧光(BiFC)第66-67页
        2.2.18 定量PCR第67-68页
        2.2.19 JA含量的测量第68页
        2.2.20 JA回复实验第68-69页
第三章 结果与分析第69-89页
    3.1 IAA8获得型突变体的获得及表型分析第69-75页
        3.1.1 重组质粒的获得,鉴定及纯合体筛选第69-70页
        3.1.2 转基因植株的基因组鉴定第70页
        3.1.3 转基因植株的RT-PCR表达检测第70-71页
        3.1.4 转基因植株的表型分析第71-75页
    3.2 IAA8获得型突变体对其蛋白积累的影响第75-79页
        3.2.1 IAA8蛋白的定位分析第76页
        3.2.2 IAA8::GFP-mIAA8突变体中蛋白水平的改变第76-77页
        3.2.3 蛋白酶体介导的蛋白降解途径影响突变体IAA8::GFP-mIAA8中的蛋白积累第77-79页
    3.3 拟南芥中IAA8表达模式的分析第79-81页
    3.4 拟南芥IAA8下游ARFs靶基因的鉴定第81-84页
        3.4.1 自激活检测第81页
        3.4.2 酵母双杂交鉴定IAA8下游ARFs靶基因第81-82页
        3.4.3 BiFC进一步验证IAA8下游ARFs靶基因第82-84页
    3.5 IAA8获得型突变体对植物花器官发育的影响第84-87页
        3.5.1 IAA8获得型突变体改变JA合成基因表达第85-86页
        3.5.2 IAA8获得型突变体改变JA含量第86页
        3.5.3 外源施加JA可回复花器官表现型第86-87页
    3.6 小结第87-89页
第四章 讨论第89-100页
    4.1 IAA8是一个典型的AUX/IAA家族基因参与植物多种生长发育过程第89-92页
    4.2 IAA8获得型突变体IAA8::GFP-MIAA8的表型缺陷是由于IAA8蛋白积累引起的第92-96页
    4.3 IAA8下游可能的ARFs靶基因第96-98页
    4.4 IAA8通过影响体内JA积累来调控花器官发育第98-100页
参考文献第100-106页
攻博期间发表及投稿论文第106-107页
致谢第107页

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