摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 网格蛋白复合体 | 第12-16页 |
1.1 网格蛋白的结构与功能 | 第12-13页 |
1.2 网格蛋白介导的内吞过程 | 第13-16页 |
2 接头蛋白复合体AP | 第16-19页 |
2.1 AP的分类 | 第16-17页 |
2.2 AP2的结构 | 第17-18页 |
2.3 AP2的功能 | 第18-19页 |
3 接头蛋白复合体TPC | 第19页 |
4 AP2与TPC独立或共同作用于CME的内吞 | 第19-20页 |
5 展望 | 第20-21页 |
6 本研究的主要研究内容、目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-34页 |
1 实验材料 | 第22-23页 |
1.1 植物材料与培养 | 第22-23页 |
1.2 实验试剂与仪器 | 第23页 |
2 实验方法 | 第23-34页 |
2.1 拟南芥人工杂交 | 第23-24页 |
2.2 拟南芥DNA提取 | 第24页 |
2.3 T-DNA突变体纯合体的分离与鉴定 | 第24-25页 |
2.4 拟南芥RNA提取 | 第25-26页 |
2.5 cDNA合成 | 第26-27页 |
2.6 实时定量qRT-PCR | 第27-29页 |
2.7 根尖免疫定位 | 第29-30页 |
2.8 抑制剂配制与处理方法 | 第30页 |
2.9 amiR-TPLATE和amiR-TML突变体下调的诱导 | 第30页 |
2.10 基于BFA的PIN2-GFP内吞分析 | 第30-31页 |
2.11 拟南芥总蛋白的提取 | 第31页 |
2.12 免疫印迹技术 | 第31-32页 |
2.13 AP2β1/2与CLC1-GFP共定位及定量分析 | 第32-33页 |
2.14 荧光强度的定量分析 | 第33页 |
2.15 激光共聚焦显微镜及其参数 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-55页 |
1 SA和TyrA23差异调控网格蛋白轻链和重链质膜招募 | 第34-39页 |
2 A23、SA和2,4-D对接头蛋白AP2质膜招募的影响 | 第39-46页 |
3 A23、SA和2,4-D对PIN2内吞的影响 | 第46-48页 |
4 网格蛋白质膜招募依赖于TPC复合体 | 第48-50页 |
5 A23、SA和2,4-D对TPC质膜招募的影响 | 第50-53页 |
6 CLC膜信号恢复依赖于TPC复合体 | 第53-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
1 植物细胞CME依赖于AP2和TPC的功能 | 第55页 |
2 植物细胞AP2复合体的功能及其质膜招募 | 第55-56页 |
3 生长素、SA和A23对CME的调控机制 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
附录 | 第63-66页 |
1 主要药品母液配制方法 | 第63页 |
2 培养基 | 第63页 |
3 常见试剂和缓冲液配置方法 | 第63-66页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-69页 |