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转录因子PRRX1通过激活多巴胺受体基因DRD2的表达来维持胶质瘤干细胞的自我更新和成瘤性

论文创新点第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 绪论第12-34页
    1 大脑皮层发育过程中神经前体细胞的命运决定第12-15页
        1.1 大脑皮层发育过程第12-13页
        1.2 皮层发育中神经前体细胞的命运决定第13-15页
    2 神经胶质瘤及肿瘤干细胞第15-23页
        2.0 干性因子与神经系统肿瘤第15页
        2.1 神经胶质瘤概况第15-17页
        2.2 神经胶质瘤的起源第17-19页
        2.3 胶质瘤干细胞第19-21页
        2.4 胶质瘤核心信号通路的改变第21-23页
    3 PRRX1在胚胎发育以及肿瘤发生过程中起到重要作用第23-28页
        3.1 PRRX1结构第23页
        3.2 PRRX1在小鼠胚胎发育中的功能第23-24页
        3.3 Prrx1诱导上皮-间充质转换第24-26页
        3.4 Prrx1维持小鼠成体神经前体细胞干性第26页
        3.5 Prrx1与血管发生第26-28页
    4 多巴胺受体在发育过程及肿瘤发生中起到关键功能第28-34页
        4.1 多巴胺受体结构第28-30页
        4.2 多巴胺受体的表达分布第30页
        4.3 多巴胺受体的功能介绍第30-32页
        4.4 D2受体调控神经前体细胞的增殖第32页
        4.5 D2受体在肿瘤中的研究第32-34页
课题研究内容及研究意义第34-35页
第二章 实验材料和方法第35-79页
    1 实验材料第35-53页
        1.1 常用细胞株及菌株第35页
        1.2 常用生化试剂第35-36页
        1.3 细胞培养及转染相关试剂第36-37页
        1.4 分子克隆常用工具酶第37-38页
        1.5 常用分子克隆试剂盒第38页
        1.6 实验所需的抗体第38-39页
        1.7 实验仪器第39页
        1.8 数据分析以及图像处理软件第39-40页
        1.9 公共数据库第40页
        1.10 化学合成DNA oligos第40-43页
        1.11 溶液的配制第43-53页
    2 实验技术及方法第53-79页
        2.1 碱裂解法抽提质粒第53页
        2.2 高纯质粒抽提第53页
        2.3 制备大肠杆菌感受态细胞第53-54页
        2.4 转化第54-55页
        2.5 菌落PCR鉴定克隆第55页
        2.6 Oligo退火与连接第55-56页
        2.7 普通克隆构建第56-57页
        2.8 点突变和删除突变克隆构建第57页
        2.9 原位杂交第57-61页
        2.10 蛋白免疫印迹技术第61-62页
        2.11 细胞培养第62-63页
        2.12 慢病毒的包装第63-64页
        2.13 细胞转染方法第64-65页
        2.14 双荧光报告系统第65页
        2.15 RNA的提取第65-66页
        2.16 逆转录第66-67页
        2.17 染色质免疫共沉淀(ChIP)第67-68页
        2.18 小鼠子宫内电转第68-69页
        2.19 皮下成瘤实验第69页
        2.20 颅内成瘤实验第69页
        2.21 细胞免疫荧光第69-70页
        2.22 细胞的核质分离实验第70页
        2.23 BrdU标记实验第70-71页
        2.24 成年小鼠PFA灌注第71页
        2.25 DAB染色第71-72页
        2.26 MTT及克隆形成实验第72-73页
        2.27 神经干细胞的分离培养第73-75页
        2.28 肿瘤干细胞的分离培养第75-76页
        2.29 肿瘤干细胞的分化第76-77页
        2.30 CD133阳性细胞的磁珠分选第77-79页
第三章 实验结果及讨论第79-110页
    3.1 胚胎期皮层神经干前体细胞表达Prrx1第79-80页
    3.2 敲低Prrx1抑制神经前体细胞的自我更新并促进其分化成神经元第80-82页
    3.3 体内过表达PRRX1促进神经前体细胞自我更新并影响投射神经元的正常迁移第82-84页
    3.4 敲低Prrx1影响细胞的正常分化和迁移第84-86页
    3.5 PRRX1在胶质瘤中呈现高表达趋势并标记肿瘤干细胞第86-89页
    3.6 敲低PRRX1显著抑制胶质瘤细胞系的增殖第89-93页
    3.7 胶质母细胞瘤干细胞的分离培养与鉴定第93-95页
    3.8 敲低PRRX1显著抑制胶质瘤干细胞的自我更新第95-96页
    3.9 敲低PRRX1抑制肿瘤干细胞的致瘤性第96-97页
    3.10 PRRX1在胶质瘤干细胞中正调控多巴胺D2受体的表达第97-100页
    3.11 PRRX1能直接结合DRD2启动子区域激活其表达第100-102页
    3.12 PRRX1和DRD2在CD133~+细胞亚群中显著富集第102-103页
    3.13 敲低DRD2或用D2受体拮抗剂处理GICs显著抑制细胞増殖第103-104页
    3.14 DRD2过表达能部分恢复单独敲低PRRX1的表型第104-108页
    讨论第108-110页
参考文献第110-121页
研究生期间发表或待发表论文第121-122页
致谢第122页

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