论文创新点 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第12-34页 |
1 大脑皮层发育过程中神经前体细胞的命运决定 | 第12-15页 |
1.1 大脑皮层发育过程 | 第12-13页 |
1.2 皮层发育中神经前体细胞的命运决定 | 第13-15页 |
2 神经胶质瘤及肿瘤干细胞 | 第15-23页 |
2.0 干性因子与神经系统肿瘤 | 第15页 |
2.1 神经胶质瘤概况 | 第15-17页 |
2.2 神经胶质瘤的起源 | 第17-19页 |
2.3 胶质瘤干细胞 | 第19-21页 |
2.4 胶质瘤核心信号通路的改变 | 第21-23页 |
3 PRRX1在胚胎发育以及肿瘤发生过程中起到重要作用 | 第23-28页 |
3.1 PRRX1结构 | 第23页 |
3.2 PRRX1在小鼠胚胎发育中的功能 | 第23-24页 |
3.3 Prrx1诱导上皮-间充质转换 | 第24-26页 |
3.4 Prrx1维持小鼠成体神经前体细胞干性 | 第26页 |
3.5 Prrx1与血管发生 | 第26-28页 |
4 多巴胺受体在发育过程及肿瘤发生中起到关键功能 | 第28-34页 |
4.1 多巴胺受体结构 | 第28-30页 |
4.2 多巴胺受体的表达分布 | 第30页 |
4.3 多巴胺受体的功能介绍 | 第30-32页 |
4.4 D2受体调控神经前体细胞的增殖 | 第32页 |
4.5 D2受体在肿瘤中的研究 | 第32-34页 |
课题研究内容及研究意义 | 第34-35页 |
第二章 实验材料和方法 | 第35-79页 |
1 实验材料 | 第35-53页 |
1.1 常用细胞株及菌株 | 第35页 |
1.2 常用生化试剂 | 第35-36页 |
1.3 细胞培养及转染相关试剂 | 第36-37页 |
1.4 分子克隆常用工具酶 | 第37-38页 |
1.5 常用分子克隆试剂盒 | 第38页 |
1.6 实验所需的抗体 | 第38-39页 |
1.7 实验仪器 | 第39页 |
1.8 数据分析以及图像处理软件 | 第39-40页 |
1.9 公共数据库 | 第40页 |
1.10 化学合成DNA oligos | 第40-43页 |
1.11 溶液的配制 | 第43-53页 |
2 实验技术及方法 | 第53-79页 |
2.1 碱裂解法抽提质粒 | 第53页 |
2.2 高纯质粒抽提 | 第53页 |
2.3 制备大肠杆菌感受态细胞 | 第53-54页 |
2.4 转化 | 第54-55页 |
2.5 菌落PCR鉴定克隆 | 第55页 |
2.6 Oligo退火与连接 | 第55-56页 |
2.7 普通克隆构建 | 第56-57页 |
2.8 点突变和删除突变克隆构建 | 第57页 |
2.9 原位杂交 | 第57-61页 |
2.10 蛋白免疫印迹技术 | 第61-62页 |
2.11 细胞培养 | 第62-63页 |
2.12 慢病毒的包装 | 第63-64页 |
2.13 细胞转染方法 | 第64-65页 |
2.14 双荧光报告系统 | 第65页 |
2.15 RNA的提取 | 第65-66页 |
2.16 逆转录 | 第66-67页 |
2.17 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第67-68页 |
2.18 小鼠子宫内电转 | 第68-69页 |
2.19 皮下成瘤实验 | 第69页 |
2.20 颅内成瘤实验 | 第69页 |
2.21 细胞免疫荧光 | 第69-70页 |
2.22 细胞的核质分离实验 | 第70页 |
2.23 BrdU标记实验 | 第70-71页 |
2.24 成年小鼠PFA灌注 | 第71页 |
2.25 DAB染色 | 第71-72页 |
2.26 MTT及克隆形成实验 | 第72-73页 |
2.27 神经干细胞的分离培养 | 第73-75页 |
2.28 肿瘤干细胞的分离培养 | 第75-76页 |
2.29 肿瘤干细胞的分化 | 第76-77页 |
2.30 CD133阳性细胞的磁珠分选 | 第77-79页 |
第三章 实验结果及讨论 | 第79-110页 |
3.1 胚胎期皮层神经干前体细胞表达Prrx1 | 第79-80页 |
3.2 敲低Prrx1抑制神经前体细胞的自我更新并促进其分化成神经元 | 第80-82页 |
3.3 体内过表达PRRX1促进神经前体细胞自我更新并影响投射神经元的正常迁移 | 第82-84页 |
3.4 敲低Prrx1影响细胞的正常分化和迁移 | 第84-86页 |
3.5 PRRX1在胶质瘤中呈现高表达趋势并标记肿瘤干细胞 | 第86-89页 |
3.6 敲低PRRX1显著抑制胶质瘤细胞系的增殖 | 第89-93页 |
3.7 胶质母细胞瘤干细胞的分离培养与鉴定 | 第93-95页 |
3.8 敲低PRRX1显著抑制胶质瘤干细胞的自我更新 | 第95-96页 |
3.9 敲低PRRX1抑制肿瘤干细胞的致瘤性 | 第96-97页 |
3.10 PRRX1在胶质瘤干细胞中正调控多巴胺D2受体的表达 | 第97-100页 |
3.11 PRRX1能直接结合DRD2启动子区域激活其表达 | 第100-102页 |
3.12 PRRX1和DRD2在CD133~+细胞亚群中显著富集 | 第102-103页 |
3.13 敲低DRD2或用D2受体拮抗剂处理GICs显著抑制细胞増殖 | 第103-104页 |
3.14 DRD2过表达能部分恢复单独敲低PRRX1的表型 | 第104-108页 |
讨论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-121页 |
研究生期间发表或待发表论文 | 第121-122页 |
致谢 | 第122页 |