| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 中英文缩写对照 | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-42页 |
| 1.1 非小细胞肺癌 | 第14-15页 |
| 1.1.1 肺癌的致病因素 | 第14页 |
| 1.1.2 当前肺癌的治疗方法 | 第14-15页 |
| 1.2 WD重复蛋白 | 第15-24页 |
| 1.2.1 WD重复蛋白的结构 | 第15-17页 |
| 1.2.2 WD重复蛋白的功能 | 第17-20页 |
| 1.2.3 WD重复蛋白与疾病 | 第20-21页 |
| 1.2.4 WD重复蛋白与肿瘤 | 第21-22页 |
| 1.2.5 WD重复蛋白79 | 第22-24页 |
| 1.3 泛素化去泛素化途径 | 第24-35页 |
| 1.3.1 泛素化 | 第24-27页 |
| 1.3.2 去泛素化 | 第27页 |
| 1.3.3 去泛素化酶的分类 | 第27-29页 |
| 1.3.4 去泛素化酶的作用机制 | 第29-31页 |
| 1.3.5 去泛素化酶的功能 | 第31-32页 |
| 1.3.6 去泛素化酶活性的调控 | 第32-33页 |
| 1.3.7 去泛素化酶与肿瘤的关系 | 第33-35页 |
| 1.4 USP7蛋白概述 | 第35-36页 |
| 1.4.1 USP7蛋白的结构 | 第35页 |
| 1.4.2 USP7蛋白的功能 | 第35-36页 |
| 1.4.3 USP7蛋白与肿瘤 | 第36页 |
| 1.5 Mdm2蛋白概述 | 第36-37页 |
| 1.5.1 Mdm2蛋白的结构 | 第36-37页 |
| 1.5.2 Mdm2蛋白的功能 | 第37页 |
| 1.6 p53蛋白概述 | 第37-39页 |
| 1.6.1 p53蛋白的结构 | 第37页 |
| 1.6.2 p53蛋白的功能 | 第37-38页 |
| 1.6.3 p53的调控 | 第38-39页 |
| 1.7 本课题的研究内容和意义 | 第39-42页 |
| 第2章 WDR79在肺癌中生物学功能研究 | 第42-73页 |
| 2.1 前言 | 第42页 |
| 2.2 实验材料 | 第42-43页 |
| 2.2.1 实验试剂与耗材 | 第42-43页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-54页 |
| 2.3.1 相关试剂配方 | 第43-44页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第44-45页 |
| 2.3.3 免疫组化 | 第45-46页 |
| 2.3.4 免疫荧光 | 第46-47页 |
| 2.3.5 蛋白质检测 | 第47-48页 |
| 2.3.6 细胞转染实验 | 第48-50页 |
| 2.3.7 细胞增殖实验 | 第50页 |
| 2.3.8 细胞周期检测 | 第50-51页 |
| 2.3.9 细胞凋亡检测 | 第51页 |
| 2.3.10 Caspase酶活性检测 | 第51-52页 |
| 2.3.11 逆转录定量PCR实验 | 第52-54页 |
| 2.3.12 裸鼠成瘤实验 | 第54页 |
| 2.4 实验结果 | 第54-71页 |
| 2.4.1 WDR79在NSCLC组织和细胞中高表达 | 第54-59页 |
| 2.4.2 WDR79促进非小细胞肺癌的增殖 | 第59-61页 |
| 2.4.3 WDR79干扰引起细胞周期阻滞于G0/G1期 | 第61-64页 |
| 2.4.4 WDR79干扰引发线粒体途径的细胞凋亡 | 第64-69页 |
| 2.4.5 干扰WDR79抑制NSCLC移植瘤的生长 | 第69-71页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第71-73页 |
| 第3章 WDR79通过USP7调控Mdm2和p53蛋白的稳定从而促进NSCLC细胞增殖 | 第73-91页 |
| 3.1 前言 | 第73-74页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第74页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第74页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第74页 |
| 3.3 实验方法 | 第74-75页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第74页 |
| 3.3.2 免疫共沉淀实验 | 第74-75页 |
| 3.3.3 泛素化实验 | 第75页 |
| 3.3.4 蛋白质半衰期的检测 | 第75页 |
| 3.4 实验结果 | 第75-89页 |
| 3.4.1 WDR79与USP7相互作用 | 第75-77页 |
| 3.4.2 WDR79调控Mdm2和p53蛋白水平的稳定 | 第77-81页 |
| 3.4.3 WDR79影响Mdm2和p53的半衰期和泛素化 | 第81-83页 |
| 3.4.4 WDR79影响Mdm2和p53蛋白的泛素化水平 | 第83-85页 |
| 3.4.5 WDR79和USP7共同介导Mdm2和p53的调控 | 第85-88页 |
| 3.4.6 WDR79通过USP7实现其生物学功能 | 第88-89页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第89-91页 |
| 第4章 WDR79可能参与NSCLC相关的多种信号通路 | 第91-110页 |
| 4.1 前言 | 第91-93页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第93-94页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第93-94页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第94页 |
| 4.3 试验方法 | 第94-96页 |
| 4.3.1 试剂配制 | 第94-95页 |
| 4.3.2 考马斯亮蓝染色 | 第95页 |
| 4.3.3 蛋白胶内酶解 | 第95-96页 |
| 4.4 实验结果 | 第96-107页 |
| 4.4.1 构建稳定干扰WDR79的细胞系 | 第96页 |
| 4.4.2 质谱数据分析 | 第96-106页 |
| 4.4.5 MS数据验证 | 第106-107页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第107-110页 |
| 结论与展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-136页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
