本论文的创新点 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
1 研究背景与文献综述 | 第16-38页 |
1.1 花药的发育 | 第16-29页 |
1.1.1 花药发育的阶段特征 | 第16-20页 |
1.1.2 雄性生殖系统发育的分子调控机制 | 第20-21页 |
1.1.3 花药药壁的发育机制 | 第21-25页 |
1.1.4 花粉壁 | 第25-29页 |
1.2 胚珠的发育 | 第29-34页 |
1.2.1 胚珠的发育 | 第29-31页 |
1.2.2 体细胞向生殖细胞转化的机制 | 第31-32页 |
1.2.3 功能大孢子的选择 | 第32-33页 |
1.2.4 雌性生殖系统的有丝分裂过程 | 第33-34页 |
1.3 胼胝质 | 第34-36页 |
1.3.1 雄性生殖系统中的胼胝质 | 第35页 |
1.3.2 雌性生殖系统中的胼胝质 | 第35-36页 |
1.4 WOX家族研究进展 | 第36-37页 |
1.5 本研究的目的、意义以及内容 | 第37-38页 |
2 烟草WOX9A和WOX9B的克隆及生物信息学分析 | 第38-53页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-47页 |
2.2.1 NtWOX9A基因序列验证 | 第39-44页 |
2.2.2 NtWOX9B基因组全长序列的克隆 | 第44-47页 |
2.2.3 NtWOX9A和NtWOX9B的生物信息学分析 | 第47页 |
2.3 实验结果 | 第47-52页 |
2.3.1 NtWOX9A基因序列验证 | 第47-48页 |
2.3.2 NtWOX9B基因组全长序列的克隆 | 第48页 |
2.3.3 NtWOX9A和NtWOX9B的生物信息学分析 | 第48-52页 |
2.4 讨论 | 第52-53页 |
3 烟草WOX9A和WOX9B的表达模式分析 | 第53-69页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第53-55页 |
3.2 实验方法 | 第55-62页 |
3.2.1 Real time PCR检测NtWOX9A和NtWOX9B的表达 | 第55-56页 |
3.2.2 NtWOX9A的亚细胞定位 | 第56-60页 |
3.2.3 NtWOX9A-GFP融合蛋白的荧光观察 | 第60-62页 |
3.3 实验结果 | 第62-67页 |
3.3.1 Real time PCR检测NtWOX9A和NtWOX9B的表达 | 第62-63页 |
3.3.2 NtWOX9A的亚细胞定位 | 第63-64页 |
3.3.3 NtWOX9A-GFP融合蛋白的定位 | 第64-67页 |
3.4 讨论 | 第67-69页 |
4 烟草WOX9A的RNAi和OX株系中雄配子体表型观察 | 第69-89页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第69-70页 |
4.2 实验方法 | 第70-75页 |
4.2.1 NtWOX9A的RNAi和OX载体构建及转基因 | 第70-72页 |
4.2.2 NtWOX9A的RNAi和OX株系中雄配子体表型观察 | 第72-75页 |
4.3 实验结果 | 第75-87页 |
4.3.1 NtWOX9A RNAi和OX载体的构建 | 第75-76页 |
4.3.2 NtWOX9A在RNAi和OX转基因株系中表达量的检测 | 第76-77页 |
4.3.3 NtWOX9A的RNAi和OX株系中雄配子体表型观察 | 第77-87页 |
4.4 讨论 | 第87-89页 |
5 烟草WOX9A的RNAi和OX株系中胚珠发育的表型观察 | 第89-97页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第89页 |
5.2 实验方法 | 第89-90页 |
5.2.1 NtWOX9A的RNAi和OX株系胚珠透明观察 | 第89-90页 |
5.2.2 NtWOX9A的RNAi和OX株系胼胝质壁染色观察 | 第90页 |
5.2.3 NtWOX9A的RNAi和OX株系胚珠的石蜡切片观察 | 第90页 |
5.3 实验结果 | 第90-96页 |
5.3.1 NtWOX9A的RNAi和OX株系胚珠透明观察 | 第90-94页 |
5.3.2 NtWOX9A的RNAi和OX株系胼胝质壁观察 | 第94-95页 |
5.3.3 NtWOX9A的RNAi和OX株系胚珠的切片观察 | 第95-96页 |
5.4 讨论 | 第96-97页 |
6 EFD调控小孢子胼胝质壁的沉积 | 第97-115页 |
6.1 EFD基因前期研究 | 第97页 |
6.2 实验材料与试剂 | 第97-98页 |
6.3 实验方法 | 第98-104页 |
6.3.1 EFD表达模式 | 第98-100页 |
6.3.2 花药的环境扫描电镜观察 | 第100页 |
6.3.3 花粉的胼胝质壁染色 | 第100页 |
6.3.4 ATH1基因芯片结果的Real time PCR验证 | 第100-101页 |
6.3.5 EFD的体外酶活验证 | 第101-104页 |
6.4 实验结果 | 第104-114页 |
6.4.1 EFD表达模式 | 第104-105页 |
6.4.2 efd花粉环境扫描电镜观察 | 第105-106页 |
6.4.3 efd花粉发育过程中的胼胝质积累动态观察 | 第106-108页 |
6.4.4 ATH1基因芯片结果的Real time PCR验证 | 第108-110页 |
6.4.5 EFD的体外酶活实验 | 第110-114页 |
6.5 讨论 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-123页 |
在读期间发表文献 | 第123页 |
准备发表文献 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-125页 |