| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| ABBREVIATIONS | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| 1.1 拟南芥雄性生殖细胞的发育及调控机制 | 第12-17页 |
| 1.1.1 拟南芥雄性生殖细胞的细胞发育过程 | 第12-14页 |
| 1.1.2 植物雄性生殖细胞发育的分子遗传机制 | 第14-16页 |
| 1.1.3 植物雄性生殖细胞与周边细胞互作的遗传机制 | 第16-17页 |
| 1.2 绒毡层细胞发育及其在雄性生殖细胞发育中的作用 | 第17-22页 |
| 1.2.1 绒毡层细胞的发育过程 | 第17-18页 |
| 1.2.2 绒毡层细胞在雄性生殖细胞发育中的作用 | 第18-19页 |
| 1.2.3 拟南芥绒毡层细胞发育中的分子遗传机制 | 第19-22页 |
| 1.3 LRR型类受体蛋白激酶在植物发育过程中的功能及调控机制 | 第22-27页 |
| 1.3.1 LRR-RLK亚家族基因的结构特征 | 第22-25页 |
| 1.3.2 LRR-RLK介导信号转导的分子机制 | 第25-26页 |
| 1.3.3 拟南芥花药早期发育过程中的LRR-RLK信号转导途径 | 第26-27页 |
| 1.4 分泌小肽在调控植物发育和生殖过程中的功能研究 | 第27-30页 |
| 1.4.1 CRP小肽与植物发育过程 | 第27-29页 |
| 1.4.2 CRP小肽与植物生殖过程 | 第29-30页 |
| 1.5 立题依据和研究意义 | 第30-32页 |
| 第二章 实验方法 | 第32-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株 | 第32页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第32页 |
| 2.1.4 酶、试剂及各种化学药品 | 第32-33页 |
| 2.2 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 常用培养基及溶液的配制 | 第34-36页 |
| 2.3.1 常用培养基配制 | 第34-36页 |
| 2.3.2 常用溶液配制 | 第36页 |
| 2.4 实验方法 | 第36-60页 |
| 2.4.1 拟南芥的种植与管理 | 第36-37页 |
| 2.4.2 植物基因组DNA提取(Edwards buffer法) | 第37页 |
| 2.4.3 TRIzol试剂小量提取拟南芥组织总RNA | 第37-38页 |
| 2.4.4 TRIzol试剂小量提取拟南芥花粉总RNA | 第38页 |
| 2.4.5 CTAB法小量提取拟南芥长角果总RNA | 第38-39页 |
| 2.4.6 多糖多酚快速提取试剂盒提取拟南芥总RNA | 第39-40页 |
| 2.4.7 基因半定量PCR (RT-PCR) | 第40-41页 |
| 2.4.8 荧光实时定量PCR (Real-time PCR) | 第41-42页 |
| 2.4.9 目的基因的克隆 | 第42页 |
| 2.4.10 从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第42-43页 |
| 2.4.11 DNA片段与T载体或目的载体的连接反应 | 第43-44页 |
| 2.4.12 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| 2.4.13 大肠杆菌热激转化 | 第45页 |
| 2.4.14 重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| 2.4.15 碱裂解法少量提取质粒DNA | 第46页 |
| 2.4.16 普通质粒小提试剂盒提取质粒DN | 第46-47页 |
| 2.4.17 农杆菌感受态细胞的制备 | 第47页 |
| 2.4.18 农杆菌的电击转化及鉴定 | 第47-48页 |
| 2.4.19 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第48页 |
| 2.4.20 GUS染色 | 第48-49页 |
| 2.4.21 拟南芥的杂交实验 | 第49-50页 |
| 2.4.22 基因芯片的制作 | 第50-57页 |
| 2.4.23 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第57页 |
| 2.4.24 石蜡切片的制备与观察 | 第57页 |
| 2.4.25 扫描电子显微镜观察 | 第57-58页 |
| 2.4.26 amiRNA-AT5G61605载体的构建 | 第58-60页 |
| 第三章 实验结果 | 第60-85页 |
| 引言 | 第60页 |
| 3.1 OE-TPD1、tpd1和ems1突变体材料的基因芯片数据分析 | 第60-69页 |
| 3.1.1 OE-TPD1超表达对花芽基因表达的影响 | 第60-62页 |
| 3.1.2 OE-TPD1、tpd1和ems1突变体植株中基因表达谱的比较分析 | 第62-63页 |
| 3.1.3 tpd1和ems1突变体花芽的基因表达比较 | 第63-69页 |
| 3.2 候选基因AT5G61605的鉴定 | 第69-85页 |
| 3.2.1 AT5G61605基因在突变体tpd1和OE-TPD1中的表达量分析 | 第69-70页 |
| 3.2.2 AT5G61605在绒毡层中表达 | 第70-73页 |
| 3.2.3 AT5G61605基因的功能分析 | 第73-74页 |
| 3.2.4 AT5G61605基因编码一个具有82个氨基酸的分泌小肽 | 第74-76页 |
| 3.2.5 AT5G61605与MEG家族成员具有相似性 | 第76-77页 |
| 3.2.6 tpd1突变体和OE-TPD1超表达影响MEG家族成员的表达 | 第77-79页 |
| 3.2.7 MEG基因家族成员的表达模式 | 第79页 |
| 3.2.8 MEG基因家族成员的突变体分析 | 第79-85页 |
| 第四章 总结与结论、讨论和展望 | 第85-103页 |
| 4.1 总结与结论 | 第85-86页 |
| 4.1.1 总结 | 第85-86页 |
| 4.1.2 结论 | 第86页 |
| 4.2 讨论 | 第86-89页 |
| 4.2.1 TPD1-EMS1信号转导途径下游基因的分离与鉴定 | 第86-88页 |
| 4.2.2 MEG家族基因的功能鉴定 | 第88-89页 |
| 4.3 展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-103页 |
| 附录Ⅰ 超表达AtDuf4基因可增大拟南芥的器官 | 第103-120页 |
| 附录Ⅰ.1 AtDuf4基因的表达模式分析 | 第103页 |
| 附录Ⅰ.2 AtDuf4-GFP蛋白定位在细胞核内 | 第103-105页 |
| 附录Ⅰ.3 AtDuf4超表达植株的表型观察 | 第105-106页 |
| 附录Ⅰ.4 AtDuf4超表达植株的种子增大且总产量提高 | 第106-109页 |
| 附录Ⅰ.5 AtDuf4超表达植株种子和花器官的增大与AtDuf4基因的表达量相关 | 第109-111页 |
| 附录Ⅰ.6 AtDuf4超表达植株器官的增大主要是由细胞的增大引起 | 第111-113页 |
| 附录Ⅰ.7 AtDuf4超表达植株种子脂肪酸组成及含量分析 | 第113-114页 |
| 附录Ⅰ.8 超表达AtDuf4对转基因植株花和角果中基因表达的影响 | 第114-116页 |
| 附录Ⅰ.9 pUbi:AtDuf4转基因水稻(初探) | 第116-117页 |
| 附录Ⅰ.10 pUbi::AtDuf4转基因油菜(初探) | 第117-119页 |
| 附录Ⅰ.11 总结 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-121页 |
| 附录Ⅱ 附表 | 第121-131页 |
| 附录Ⅱ:表1 受TPD1超表达影响的基因 | 第121-122页 |
| 附录Ⅱ:表2 MEG家族基因突变体的鉴定 | 第122-123页 |
| 附录Ⅱ:表3 MEG家族基因成员 | 第123-124页 |
| 附录Ⅱ:表4 基因克隆和鉴定所用引物序列列表 | 第124-125页 |
| 附录Ⅱ:表5 人工micro RNA载体构建所用的引物序列列表 | 第125-126页 |
| 附录Ⅱ:表6 突变体鉴定所用的引物序列列表 | 第126-128页 |
| 附录Ⅱ:表7 RT-PCR所用引物序列列表 | 第128-129页 |
| 附录Ⅱ:表8 Real-time PCR所用的引物序列列表 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131-134页 |
| 作者简介 | 第134页 |
