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PRRSV-NP单克隆抗体的制备及其直接荧光方法建立

摘要第6-7页
abstract第7页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-22页
    1.1 PRRSV研究进展第14-21页
        1.1.1 PRRS病毒和基因组第15页
        1.1.2 PRRSV感染性第15-16页
        1.1.3 PRRSV致病性与进化第16页
        1.1.4 PRRSV抗体应答第16-17页
        1.1.5 PRRSV感染与母猪繁殖第17页
        1.1.6 妊娠母猪感染PRRSV后免疫应答第17-18页
        1.1.7 母胎感染后的免疫应答第18-19页
        1.1.8 胎儿的免疫应答第19-20页
        1.1.9 PRRSV诊断方法第20-21页
            1.1.9.1 病毒检测第20页
            1.1.9.2 抗体检测第20-21页
    1.2 PRRSV单克隆抗体研究进展第21页
    1.3 本研究目的及意义第21-22页
第二章 PRRSV-NP蛋白单克隆抗体制备及鉴定第22-31页
    2.1 材料与方法第22-27页
        2.1.1 表达质粒,感受态,实验动物第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 仪器设备第22页
        2.1.4 PRRSV-N蛋白表达纯化与Western blot鉴定第22-23页
        2.1.5 免疫动物第23页
        2.1.6 间接ELISA方法建立第23-24页
        2.1.7 细胞融合,单克隆抗体制备第24-26页
        2.1.8 腹水抗体效价检测第26页
        2.1.9 特异性实验第26页
        2.1.10 Mab结合活性鉴定第26页
        2.1.11 IFA实验第26-27页
    2.2 结果与分析第27-29页
        2.2.1 N蛋白表达与纯化及Western blot鉴定第27页
        2.2.2 免疫小鼠血清效价检测第27-28页
        2.2.3 Mab特异性鉴定第28页
        2.2.4 间接ELISA法鉴定第28页
        2.2.5 IFA检测第28-29页
    2.3 讨论第29-31页
第三章 单克隆抗体纯化与标记及直接免疫荧光方法建立第31-43页
    3.1 材料与方法第31-34页
        3.1.1 病毒株及细胞第31页
        3.1.2 主要试剂第31页
        3.1.3 仪器设备第31页
        3.1.4 试验方法第31-34页
    3.2 结果与分析第34-41页
        3.2.1 纯化单抗的SDS鉴定第34-35页
        3.2.2 纯化IgG蛋白浓度检测结果第35页
        3.2.3 间接免疫荧光法检测纯化IgG的抗体效价第35-36页
        3.2.4 FITC标记PRRSV-N IgG敏感性检测第36-37页
        3.2.5 FITC标记PRRSV-N IgG特异性检测第37-38页
        3.2.6 FITC标记PRRSV-N IgG保存期试验第38页
        3.2.7 荧光Mab的DFA工作条件结果确定第38-39页
        3.2.8 CPE检测结果第39-40页
        3.2.9 DFA检测与CPE检测结果比较第40页
        3.2.10 建立DFA的特异性、敏感性第40-41页
    3.3 讨论第41-43页
第四章 全文总结第43-44页
参考文献第44-50页
致谢第50-51页
作者简历第51页

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