| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 牛结核病的研究概况与现状 | 第13-14页 |
| 1.1.1 牛结核病的危害 | 第13页 |
| 1.1.2 牛结核病的流行情况 | 第13-14页 |
| 1.2 牛结核病的不同感染状态 | 第14页 |
| 1.2.1 健康牛 | 第14页 |
| 1.2.2 潜伏感染牛 | 第14页 |
| 1.2.3 活动性结核病牛 | 第14页 |
| 1.3 牛结核病主要诊断技术研究进展 | 第14-17页 |
| 1.3.1 临床诊断方法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 细菌学检测 | 第15页 |
| 1.3.3 免疫学检测方法 | 第15-17页 |
| 1.3.4 分子生物学检测方法 | 第17页 |
| 1.4 牛结核病诊断的分子标识研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4.1 用于牛结核病血清学诊断的分子标识 | 第18页 |
| 1.4.2 用于细胞免疫诊断的分子标识 | 第18页 |
| 1.5 本实验研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 第二章 开放性结核病牛、潜伏感染牛及健康牛的筛选 | 第20-26页 |
| 2.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 结核菌素皮内变态反应 | 第20-21页 |
| 2.2.2 IFN-γ释放试验（IGRA） | 第21页 |
| 2.2.3 鼻拭子巢式PCR检测 | 第21-22页 |
| 2.2.4 不同感染状态结核病牛的判定标准 | 第22-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-24页 |
| 2.3.1 结核菌素皮内变态反应 | 第23页 |
| 2.3.2 IFN-γ释放试验（IGRA） | 第23页 |
| 2.3.3 巢式PCR检测 | 第23页 |
| 2.3.4 检测结果的判定及分析 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 牛基因表达谱芯片杂交筛选牛结核病不同感染时期的分子标识 | 第26-65页 |
| 3.1 材料 | 第26-27页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第26页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第26-27页 |
| 3.2 方法 | 第27-34页 |
| 3.2.1 牛外周血白细胞的分离 | 第27页 |
| 3.2.2 牛外周血白细胞的培养及刺激 | 第27页 |
| 3.2.3 牛外周血白细胞的RNA提取 | 第27-28页 |
| 3.2.4 牛外周血白细胞RNA质量的验证 | 第28-29页 |
| 3.2.5 表达谱芯片分析 | 第29-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-63页 |
| 3.3.1 牛外周血白细胞的分离 | 第34页 |
| 3.3.2 牛外周血白细胞的培养及刺激 | 第34-35页 |
| 3.3.3 牛外周血白细胞的RNA提取 | 第35页 |
| 3.3.4 牛外周血白细胞RNA质量的验证 | 第35-36页 |
| 3.3.5 表达谱芯片检测样品的选择 | 第36-37页 |
| 3.3.6 活动性结核病牛、潜伏感染牛和健康牛的PBMCs对PPD-B刺激的表达谱比较 | 第37-63页 |
| 3.3.7 潜在的分子标识基因 | 第63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 分子标识的初步验证及检测方法的初步建立 | 第65-71页 |
| 4.1 材料 | 第65页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第65页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第65页 |
| 4.2 方法 | 第65-68页 |
| 4.2.1 不同感染状态结核病牛的筛选 | 第65页 |
| 4.2.2 荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第65-66页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR方法的建立 | 第66-68页 |
| 4.2.4 实时荧光定量PCR检测不同感染状态结核病牛相关分子标识的表达 | 第68页 |
| 4.2.5 分子标识mRNA相对表达量的计算 | 第68页 |
| 4.3 结果与分析 | 第68-69页 |
| 4.3.1 不同感染状态的结核病牛的筛选 | 第68页 |
| 4.3.2 实时荧光定量PCR方法的建立 | 第68-69页 |
| 4.3.3 不同感染状态牛的细胞因子的检测 | 第69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 全文结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79页 |
