| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第10页 |
| 1.2 抗菌肽的种类以及来源 | 第10-12页 |
| 1.2.1 来源于微生物的抗菌肽 | 第10页 |
| 1.2.2 细菌素和真菌防卫素 | 第10-11页 |
| 1.2.3 呱珀霉素 | 第11页 |
| 1.2.4 环形肽 | 第11页 |
| 1.2.5 假肽 | 第11-12页 |
| 1.2.6 人工抗菌肽 | 第12页 |
| 1.3 抗菌肽基因工程以及未来展望 | 第12页 |
| 1.4 本实验种所用抗菌肽 | 第12-13页 |
| 1.5 多基因共表达研究进展 | 第13-19页 |
| 1.5.1 传统获得多基因转基因植物的方法 | 第13-15页 |
| 1.5.2 利用可剪切的连接元件获得多基因转基因植株方法 | 第15-19页 |
| 1.6 影响植物体内外源蛋白表达量的相关因素 | 第19-22页 |
| 1.6.1 根据密码子的简并性选择植物偏爱的基因序列 | 第19页 |
| 1.6.2 启动子的选择 | 第19-20页 |
| 1.6.3 5'非翻译区序列对翻译效率的影响 | 第20页 |
| 1.6.4 3'非翻译区序列对翻译效率的影响 | 第20页 |
| 1.6.5 导致蛋白降解的序列 | 第20页 |
| 1.6.6 外源蛋白的亚细胞定位 | 第20-21页 |
| 1.6.7 组织特异性、瞬时和诱导表达 | 第21-22页 |
| 1.6.8 蛋白融合 | 第22页 |
| 1.7 课题研究的目的 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 培养基及试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.5 引物 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-35页 |
| 2.2.1 质粒 DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.2 DNA片段回收 | 第27页 |
| 2.2.3 感受态细胞制备及转化 | 第27-28页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.5 拟南芥转化及筛选 | 第29页 |
| 2.2.6 拟南芥基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.7 转基因拟南芥的 RT-PCR检测 | 第30-32页 |
| 2.2.8 叶片总蛋白的提取及纯化 | 第32页 |
| 2.2.9 ELISA | 第32页 |
| 2.2.10 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-33页 |
| 2.2.11 Western blot | 第33页 |
| 2.2.12 拟南芥花期接种鉴定 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| 3.1 多基因的合成 | 第35-37页 |
| 3.1.1 NprI，Ace，Sp3RSD2Histag基因的合成 | 第35-36页 |
| 3.1.2 Lp-Sp-Pep3，Lp-MsrA1-Lp-Sp2，Lp基因片段的合成 | 第36-37页 |
| 3.2 双子叶植物表达载体的构建以及转化根癌农杆菌 | 第37-39页 |
| 3.2.1 双子叶植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.2 转化根癌农杆菌 | 第38-39页 |
| 3.3 拟南芥转化、筛选及分子鉴定 | 第39-42页 |
| 3.3.1 拟南芥转化、筛选及 PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3.2 T_2代转基因拟南芥的ELISA筛选 | 第40-41页 |
| 3.3.3 T_2代转基因拟南芥的RT-PCR检测 | 第41-42页 |
| 3.3.4 T_2代转基因拟南芥的Western blot杂交检测 | 第42页 |
| 3.4 T_2代拟南芥植株抗性鉴定 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-61页 |
