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精氨酸激酶和乙酰胆碱酯酶作为靶标分子在棉花害虫防治中的作用

摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 文献综述第9-21页
    1.1 精氨酸激酶研究概况第9-12页
        1.1.1 精氨酸激酶的作用机理和蛋白性质第9-10页
        1.1.2 金属离子对精氨酸激酶的影响第10页
        1.1.3 精氨酸激酶与肌酸激酶的关系第10-11页
        1.1.4 精氨酸激酶与免疫力和抗性之间的关系第11-12页
        1.1.5 精氨酸激酶在生物防治中的研究第12页
    1.2 乙酰胆碱酯酶的研究概况第12-16页
        1.2.1 胆碱酯酶的分类和作用第13页
        1.2.2 AChE 在体内的组织分布与构型第13-14页
        1.2.3 AChE 与神经传导的关系第14页
        1.2.4 AChE 基因的克隆第14-15页
        1.2.5 AChE 在昆虫的抗药性关系第15-16页
    1.3 苏云金芽孢杆菌的简介第16-19页
        1.3.1 伴孢晶体的作用机理第17-18页
        1.3.2 伴孢晶体的提取方法第18-19页
        1.3.3 棉铃虫对 Bt 毒蛋白的抗性研究第19页
    1.4 论文目的及意义第19-21页
第二章 精氨酸激酶和乙酰胆碱酯酶基因的克隆第21-36页
    2.1 实验材料、试剂和仪器设备第21-22页
        2.1.1 实验材料第21页
        2.1.2 主要菌种及实验试剂第21-22页
    2.2 试验方法第22-25页
        2.2.1 总 RNA 的提取第22页
        2.2.2 cDNA 第一条链的合成第22-23页
        2.2.3 化学法感受态细胞的制备第23-24页
        2.2.4 大肠杆菌的化学转化第24页
        2.2.5 质粒 DNA 的少量提取第24-25页
        2.2.6 试剂盒回收 PCR 目的条带第25页
    2.3 精氨酸激酶基因的克隆第25-29页
        2.3.1 RNA 的提取与 cDNA 的合成第25-26页
        2.3.2 引物的设计和合成第26页
        2.3.3 基因克隆和测序第26-29页
    2.4 棉铃虫乙酰胆碱酯酶基因 ace-2 的克隆第29-33页
        2.4.1 RNA 的提取与 cDNA 的合成第29页
        2.4.2 引物设计第29页
        2.4.3 基因克隆和测序第29-33页
    2.5 ArK 和 AchE 的进化分析第33-35页
    2.6 结论第35-36页
第三章 Cry1A 毒蛋白对 AK 表达量影响第36-41页
    3.1 实验材料、试剂、仪器设备第36页
    3.2 实验方法第36-38页
        3.2.1 晶胞和悬浮液的制备第36-37页
        3.2.2 伴孢晶体的镜检与结果第37页
        3.2.3 供试昆虫处理饲料的制备和处理第37页
        3.2.4 处理虫样总 RNA 的提取第37-38页
        3.2.5 单链 cDNA 的合成第38页
    3.3 RT-PCR 反应第38-40页
        3.3.1 引物的设计合成和 PCR 反应第38页
        3.3.2 内参基因的扩增第38页
        3.3.3 循环数的优化第38-39页
        3.3.4 半定量 RT-PCR 表达结果和分析第39-40页
    3.4 结论第40-41页
第四章 灭多威对 AChE 表达量影响第41-45页
    4.1 实验试剂和仪器第41页
    4.2 铃虫的饲喂第41页
    4.3 RNA 的提取和 cDNA 的获得第41页
    4.4 荧光定量的反应程序及数据分析第41-43页
        4.4.1 荧光定量引物的设计第41-42页
        4.4.2 荧光定量体系第42页
        4.4.3 荧光定量反应程序第42页
        4.4.4 数据分析第42-43页
    4.5 结论第43-45页
第五章 结论与讨论第45-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
攻读学位期间取得的科研成果第54页

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