摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
符号说明 | 第10-11页 |
1. 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 稻瘟病菌及其侵染水稻过程 | 第11页 |
1.2 植物先天免疫反应 | 第11-14页 |
1.2.1 病原相关分子模式触发的免疫反应 | 第11-12页 |
1.2.2 效应因子触发的免疫反应 | 第12-13页 |
1.2.3 水稻中与稻瘟病相关的先天免疫反应 | 第13-14页 |
1.3 RNA干涉作用机制 | 第14-15页 |
1.4 MicroRNA在植物抗病中的作用 | 第15-16页 |
1.5 水稻中microRNA研究进展 | 第16-17页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2. 材料与方法 | 第18-33页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 水稻材料 | 第18页 |
2.1.2 稻瘟病菌菌株 | 第18页 |
2.1.3 遗传转化体系菌株和载体 | 第18页 |
2.1.4 试剂 | 第18-19页 |
2.1.5 仪器设备 | 第19页 |
2.1.6 培养基及其抗生素 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-33页 |
2.2.1 水稻稻瘟病菌的产孢培养 | 第19页 |
2.2.2 水稻材料培养 | 第19-20页 |
2.2.3 稻瘟病菌接种 | 第20页 |
2.2.4 水稻DNA提取 | 第20页 |
2.2.5 水稻总RNA提取,反转为cDNA以及qRT-PCR | 第20-23页 |
2.2.6 水稻小RNA分离、PAGE电泳 | 第23-24页 |
2.2.7 水稻miR 160a和miR 398b克隆的构建 | 第24-29页 |
2.2.8 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第29-30页 |
2.2.9 转基因水稻植株的PCR鉴定 | 第30-32页 |
2.2.10 水稻叶片台盼蓝染色 | 第32页 |
2.2.11 水稻叶片DAB染色 | 第32-33页 |
3. 结果与分析 | 第33-49页 |
3.1 水稻稻瘟病高抗材料的筛选 | 第33-36页 |
3.1.1 稻瘟病抗性鉴定 | 第33-34页 |
3.1.2 接菌水稻防卫相关基因表达量分析 | 第34-35页 |
3.1.3 接菌水稻叶片过氧化氢和菌丝数量检测 | 第35-36页 |
3.2 小RNA测序分析与候选miRNA鉴定 | 第36-37页 |
3.3 MiR160a和miR398b靶基因表达分析 | 第37-40页 |
3.3.1 MiR160a靶基因表达分析 | 第37-39页 |
3.3.2 MiR398b靶基因表达分析 | 第39-40页 |
3.4 过表达miR160a和miR398b的转基因水稻抗病性分析 | 第40-49页 |
3.4.1 转基因受体材料的选择 | 第40-41页 |
3.4.2 过表达miR160a转基因水稻材料抗病分析 | 第41-44页 |
3.4.3 过表达miR398b转基因水稻材料抗病分析 | 第44-47页 |
3.4.4 过表达miR160a和miR398b转基因水稻中防卫相关基因的表达分析 | 第47-49页 |
4. 讨论与展望 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61-63页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第63页 |