摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
1 前言 | 第13-14页 |
2 文献综述 | 第14-19页 |
2.1 富血小板血浆研究进展 | 第14页 |
2.2 肌腱干细胞研究进展 | 第14-15页 |
2.3 环磷酸腺苷研究进展 | 第15-16页 |
2.4 实验假设 | 第16页 |
2.5 基质金属蛋白酶研究进展 | 第16-18页 |
2.5.1 金属蛋白酶概述 | 第16-17页 |
2.5.2 I型金属蛋白酶(MMP-1)概述 | 第17-18页 |
2.6 胶原研究进展 | 第18-19页 |
3 实验材料与仪器 | 第19-21页 |
3.1 实验动物 | 第19页 |
3.2 实验材料 | 第19-21页 |
3.2.1 实验试剂 | 第19-20页 |
3.2.2 抗体 | 第20页 |
3.2.3 实验仪器、设备 | 第20-21页 |
3.2.4 主要溶液的配制 | 第21页 |
3.3 实验地点 | 第21页 |
4 实验部分 | 第21-29页 |
4.1 兔肌腱干细胞鉴定实验 | 第21-24页 |
4.1.1 兔肌腱干细胞的分离与培养 | 第21-22页 |
4.1.2 兔肌腱干细胞的成骨、成脂诱导 | 第22-23页 |
4.1.3 兔肌腱干细胞的流式细胞仪鉴定 | 第23页 |
4.1.4 兔肌腱干细胞的免疫荧光检测 | 第23-24页 |
4.2 体外细胞实验 | 第24-26页 |
4.2.1 富血小板血浆(PRP)的制备 | 第24-25页 |
4.2.2 体外细胞培养实验 | 第25-26页 |
4.2.3 CCK8细胞增殖/凋亡实验 | 第26页 |
4.3 动物实验 | 第26-29页 |
4.3.1 前列腺素E2(PGE2)溶液的配制 | 第26-27页 |
4.3.2 兔跟腱病动物模型的造模及分组 | 第27页 |
4.3.3 干预方案 | 第27页 |
4.3.4 金属蛋白酶及其拮抗剂的测定 | 第27页 |
4.3.5 Ⅰ、Ⅲ型胶原PCR的检测 | 第27-29页 |
4.3.5.1 Ⅰ、Ⅲ型胶原RNA的提取及浓度测定 | 第28页 |
4.3.5.2 cDNA的合成与检测 | 第28-29页 |
4.3.6 跟腱组织天狼星染色与H-E染色切片的制作 | 第29页 |
5 实验结果 | 第29-40页 |
5.1 肌腱干细胞鉴定结果 | 第29-31页 |
5.1.1 成脂成骨诱导实验结果 | 第29-30页 |
5.1.2 流式细胞仪鉴定结果 | 第30页 |
5.1.3 免疫荧光检测结果 | 第30-31页 |
5.2 体外细胞实验结果 | 第31-33页 |
5.2.1 富血小板血浆的制备结果 | 第31-32页 |
5.2.2 体外细胞培养实验结果 | 第32页 |
5.2.3 CCK8细胞增殖/凋亡实验结果 | 第32-33页 |
5.3 动物实验结果 | 第33-40页 |
5.3.1 动物造模结果 | 第33-34页 |
5.3.2 Western-BIot测定I型金属蛋白酶及其拮抗剂的检测结果 | 第34-35页 |
5.3.3 Ⅰ、Ⅲ型胶原PCP实验结果 | 第35-37页 |
5.3.3.1 Ⅰ、Ⅲ型胶原超微量核酸蛋白浓度测定结果 | 第35-36页 |
5.3.3.2 Ⅰ、Ⅲ型胶原PCR表达结果 | 第36-37页 |
5.3.4 跟腱组织天狼星染色与H-E细胞组织学切片 | 第37-40页 |
5.3.4.1 天狼星I型胶原染色切片 | 第37-39页 |
5.3.4.2 H-E细胞组织学切片 | 第39-40页 |
5.4 统计学方法 | 第40页 |
6 分析与讨论 | 第40-45页 |
6.1 肌腱干细胞鉴定讨论 | 第40页 |
6.2 体外细胞实验讨论 | 第40-41页 |
6.2.1 富血小板制备讨论 | 第40-41页 |
6.2.2 体外细胞实验部分讨论 | 第41页 |
6.3 动物实验部分讨论 | 第41-44页 |
6.3.1 跟腱病动物模型建立的依据 | 第41-42页 |
6.3.2 I型基质金属蛋白酶及其拮抗剂指标分析 | 第42-43页 |
6.3.3 Ⅰ、Ⅲ型胶原超微量核酸蛋白浓度测定与PCR结果分析 | 第43页 |
6.3.4 天狼星染色与H-E染色细胞组织学切片分析 | 第43-44页 |
6.4 PRP与cAMP共混物或单用cAMP对促进肌腱干细胞增殖的机制探讨 | 第44-45页 |
7 结论及展望 | 第45-46页 |
7.1 结论 | 第45-46页 |
7.2 存在的问题 | 第46页 |
7.3 展望 | 第46页 |
8 参考文献 | 第46-51页 |
9 致谢 | 第51页 |