| 学位论文数据集 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第24-26页 |
| 第一章 绪论 | 第26-42页 |
| 1.1 基因治疗 | 第26页 |
| 1.2 基因运载系统 | 第26-27页 |
| 1.3 非病毒基因载体 | 第27-37页 |
| 1.3.1 聚合物基因载体 | 第29-32页 |
| 1.3.1.1 聚乙烯亚胺 | 第29-31页 |
| 1.3.1.2 聚L-赖氨酸 | 第31页 |
| 1.3.1.3 聚甲基丙烯酸N,N二甲氨基乙酯 | 第31-32页 |
| 1.3.2 生物可降解基因载体 | 第32-34页 |
| 1.3.2.1 聚氨基酸酯 | 第32-33页 |
| 1.3.2.2 可还原的载体 | 第33-34页 |
| 1.3.3 天然多糖基因载体 | 第34-37页 |
| 1.3.3.1 壳聚糖 | 第34-35页 |
| 1.3.3.2 环糊精 | 第35-37页 |
| 1.4 原子转移自由基聚合在制备聚合物基因载体上的应用 | 第37-41页 |
| 1.4.1 概述 | 第37-38页 |
| 1.4.2 适用于原子转移自由基聚合的单体 | 第38页 |
| 1.4.3 原子转移自由基聚合制备聚合物基因载体的类型 | 第38-41页 |
| 1.4.3.1 线性聚合物载体 | 第38-39页 |
| 1.4.3.2 梳状共聚物载体 | 第39-40页 |
| 1.4.3.3 星状共聚物载体 | 第40-41页 |
| 1.5 课题的目的及意义 | 第41-42页 |
| 第二章 乙醇胺/乙二胺化以及生物分子功能化的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯基因载体的构建 | 第42-64页 |
| 2.1 前言 | 第42-43页 |
| 2.2 实验部分 | 第43-47页 |
| 2.2.1 实验原料与试剂 | 第43-44页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第44页 |
| 2.2.3 乙醇胺化/乙二胺化和生物小分子携带的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯载体的制备 | 第44-45页 |
| 2.2.4 聚合物的表征 | 第45页 |
| 2.2.4.1 相对分子质量表征 | 第45页 |
| 2.2.4.2 化学结构表征 | 第45页 |
| 2.2.5 聚合物复合pDNA能力评价 | 第45-46页 |
| 2.2.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
| 2.2.5.2 粒径电位表征 | 第46页 |
| 2.2.6 细胞毒性评价 | 第46页 |
| 2.2.7 体外细胞转染评价 | 第46-47页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第47-62页 |
| 2.3.1 乙醇胺化/乙二胺和生物小分子携带的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯的表征 | 第47-52页 |
| 2.3.1.1 GPC测聚合物分子量 | 第47-49页 |
| 2.3.1.2 NMR测聚合物化学结构 | 第49-52页 |
| 2.3.2 聚合物/质粒DNA复合物的表征 | 第52-56页 |
| 2.3.2.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第52-53页 |
| 2.3.2.2 粒径和电位 | 第53-56页 |
| 2.3.3 载体的细胞毒性评价 | 第56-59页 |
| 2.3.4 载体的细胞转染效率评价 | 第59-62页 |
| 2.4 小结 | 第62-64页 |
| 第三章用 ATRP和点击化学的方法构建轻丙基环糊精/聚甲基丙嫌酸縮水甘油酯/聚甲基丙播黢N-, N二甲氧基乙藤三元体系离效基因载体 | 第64-87页 |
| 3.1 前言 | 第64页 |
| 3.2 实验部分 | 第64-72页 |
| 3.2.1 实验原料与试剂 | 第64-66页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第66-67页 |
| 3.2.3 HPCD基基因载体的制备 | 第67-69页 |
| 3.2.3.1 HPCD-PGEA系列载体的制备 | 第68页 |
| 3.2.3.2 炔基功能化的HPCD-PGEA的制备 | 第68页 |
| 3.2.3.3 叠氮功能化的PDMAEMA的制备 | 第68-69页 |
| 3.2.3.4 点击化学法制备HPCD-PGEA-PDM | 第69页 |
| 3.2.4 聚合物载体的表征 | 第69-70页 |
| 3.2.4.1 聚合物相对分子质量表征 | 第69页 |
| 3.2.4.2 聚合物结构表征 | 第69-70页 |
| 3.2.5 聚合物/pDNA复合物的生物性能表征 | 第70页 |
| 3.2.5.1 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第70页 |
| 3.2.5.2 粒径电位实验 | 第70页 |
| 3.2.6 细胞毒性测试 | 第70-71页 |
| 3.2.7 细胞转染分析 | 第71页 |
| 3.2.7.1 荧光素酶转染分析 | 第71页 |
| 3.2.7.2 增强型绿色荧光蛋白转染分析 | 第71页 |
| 3.2.8 细胞内吞分析 | 第71-72页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第72-86页 |
| 3.3.1 核磁表征 | 第72-74页 |
| 3.3.2 相对分子质量表征 | 第74-75页 |
| 3.3.3 聚合物/pDNA复合物表征 | 第75-78页 |
| 3.3.3.1 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第76-77页 |
| 3.3.3.2 粒径电位实验 | 第77-78页 |
| 3.3.4 细胞毒性分析 | 第78-80页 |
| 3.3.5 体外转染分析 | 第80-83页 |
| 3.3.5.1 荧光素酶表达 | 第80-82页 |
| 3.3.5.2 增强型绿色荧光蛋白表达 | 第82-83页 |
| 3.3.6 细胞内吞测试 | 第83-86页 |
| 3.4 小结 | 第86-87页 |
| 第四章 ATRP法制备聚(N-3-羟丙基)天冬酰胺为骨架的基因载体 | 第87-108页 |
| 4.1 前言 | 第87页 |
| 4.2 实验部分 | 第87-93页 |
| 4.2.1 实验原料与试剂 | 第87-88页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第88-90页 |
| 4.2.3 生物可降解梳状阳离子基因载体的合成 | 第90-91页 |
| 4.2.4 聚合物的表征 | 第91-92页 |
| 4.2.4.1 相对分子质量的表征 | 第91页 |
| 4.2.4.2 化学结构的表征 | 第91页 |
| 4.2.4.3 化学成分的表征 | 第91页 |
| 4.2.4.4 聚合物可剪切性能和可降解性能的表征 | 第91-92页 |
| 4.2.5 聚合物/pDNA复合物的生物性能表征 | 第92页 |
| 4.2.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第92页 |
| 4.2.5.2 粒径电位表征 | 第92页 |
| 4.2.6 细胞毒性分析 | 第92-93页 |
| 4.2.7 细胞转染分析 | 第93页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第93-107页 |
| 4.3.1 生物可剪切SS-PHPD基因载体的制备 | 第93-95页 |
| 4.3.2 聚合物的表征 | 第95-99页 |
| 4.3.2.1 核磁表征 | 第95-96页 |
| 4.3.2.2 XPS表征 | 第96-98页 |
| 4.3.2.3 载体的可剪切性和可降解性测试 | 第98-99页 |
| 4.3.3 聚合物/pDNA复合物的生物性能表征 | 第99-103页 |
| 4.3.3.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第99-101页 |
| 4.3.3.2 TEM观察复合物形貌 | 第101-102页 |
| 4.3.3.3 粒径和电位 | 第102-103页 |
| 4.3.4 细胞毒性分析 | 第103-105页 |
| 4.3.5 体外转染分析 | 第105-107页 |
| 4.4 小结 | 第107-108页 |
| 第五章 ATRP法制备羟基磷灰石-聚阳离子纳米复合物基因载体及其在成骨细胞中的应用 | 第108-131页 |
| 5.1 前言 | 第108页 |
| 5.2 实验部分 | 第108-114页 |
| 5.2.1 实验原料与试剂 | 第108-109页 |
| 5.2.2 实验仪器与设备 | 第109-110页 |
| 5.2.3 ATRP法制备HA-PDM纳米载体 | 第110-111页 |
| 5.2.4 HA-PDM纳米粒子的表征 | 第111页 |
| 5.2.4.1 X-射线光电子能谱(XPS) | 第111页 |
| 5.2.4.2 透射电子显微镜(TEM) | 第111页 |
| 5.2.4.3 热重分析(TGA) | 第111页 |
| 5.2.4.4 凝胶渗透色谱(GPC) | 第111页 |
| 5.2.4.5 缓冲能力测试 | 第111页 |
| 5.2.5 HA-PDM/pDNA复合物的生物性能表征 | 第111-112页 |
| 5.2.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第112页 |
| 5.2.5.2 粒径电位 | 第112页 |
| 5.2.6 细胞毒性测试 | 第112-113页 |
| 5.2.7 细胞转染分析 | 第113页 |
| 5.2.7.1 荧光素酶表达 | 第113页 |
| 5.2.7.2 增强型绿色荧光蛋白表达 | 第113页 |
| 5.2.8 成骨细胞分化分析 | 第113-114页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第114-130页 |
| 5.3.1 表面引发的ATRP法制备HA-PDM纳米粒子 | 第114-118页 |
| 5.3.1.1 HA-PDM纳米粒子的制备 | 第114-115页 |
| 5.3.1.2 HA-PDM纳米粒子的XPS分析 | 第115-116页 |
| 5.3.1.3 HA-PDM纳米粒子的TGA分析 | 第116-117页 |
| 5.3.1.4 HA-PDM纳米粒子上聚合物链的分子量分析 | 第117页 |
| 5.3.1.5 HA-PDM纳米粒子的TEM图像 | 第117-118页 |
| 5.3.2 HA-PDM/pDNA复合物的生物性能表征 | 第118-122页 |
| 5.3.2.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第118-120页 |
| 5.3.2.2 粒径电位分析 | 第120-121页 |
| 5.3.2.3 TEM分析 | 第121-122页 |
| 5.3.3 HA-PDM纳米粒子的缓冲能力分析 | 第122-124页 |
| 5.3.4 细胞毒性分析 | 第124-125页 |
| 5.3.5 体外转染分析 | 第125-128页 |
| 5.3.5.1 荧光素酶转染分析 | 第125-127页 |
| 5.3.5.2 绿色蛋白转染分析 | 第127-128页 |
| 5.3.6 细胞成骨分化分析 | 第128-130页 |
| 5.4 小结 | 第130-131页 |
| 第六章 结论 | 第131-133页 |
| 参考文献 | 第133-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 发表的学术论文 | 第149-151页 |
| 作者简介 | 第151-152页 |
| 导师简介 | 第152-153页 |
| 附件 | 第153-154页 |
