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小黑麦天冬酰胺合成酶基因克隆及功能验证

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
缩略表第8-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 盐分侵害植物机理第12-13页
        1.1.1 渗透胁迫第12页
        1.1.2 离子毒害第12页
        1.1.3 次生危害第12-13页
    1.2 植物适应盐胁迫机理第13-15页
        1.2.1 生理结构适应性第13页
        1.2.2 调节渗透物质合成机制第13-14页
        1.2.3 离子再平衡第14-15页
        1.2.4 清除氧化物质机制第15页
        1.2.5 改变光合途径第15页
    1.3 耐盐相关基因第15-18页
        1.3.1 参与合成渗透保护物质的基因第15-16页
        1.3.2 维持离子平衡基因第16页
        1.3.3 活性氧清除系统的基因第16-17页
        1.3.4 胁迫信号传导的基因第17页
        1.3.5 编码转录因子的基因第17-18页
        1.3.6 与盐胁迫相关的 miRNA第18页
    1.4 克隆植物基因方法第18-19页
        1.4.1 电子克隆第18页
        1.4.2 图位克隆第18页
        1.4.3 转座子标签法第18-19页
        1.4.4 基因芯片第19页
    1.5 植物遗传转化方法第19-20页
        1.5.1 农杆菌侵染第19页
        1.5.2 基因枪法第19页
        1.5.3 花粉管通道法第19-20页
    1.6 天冬酰胺合成酶第20-21页
        1.6.1 环境对天冬酰胺合成酶基因表达影响第20-21页
    1.7 研究意义第21-22页
第二章 材料与方法第22-32页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 菌株与试剂第22页
        2.1.3 霍格兰营养液、培养基、及抗生素配方第22-23页
        2.1.4 实验仪器第23页
    2.2 试验方法第23-32页
        2.2.1 小黑麦材料处理第23-24页
        2.2.2 TriAS 基因的克隆及测序第24-25页
        2.2.3 TriAS 基因生物信息学分析第25-26页
        2.2.4 实时荧光定量 RT-PCR第26页
        2.2.5 TriAS 基因表达载体构建第26-28页
        2.2.6 拟南芥遗传转化及筛选第28-29页
        2.2.7 烟草遗传转化及筛选第29-30页
        2.2.8 生理酶活测定第30-31页
        2.2.9 野生型和转基因型植株对比处理第31-32页
第三章 结果与分析第32-51页
    3.1 小黑麦 RNA 的提取及反转录效果检测第32页
    3.2 TriAS 基因克隆和生物信息学分析第32-38页
        3.2.1 TriAS 基因的克隆及序列分析第32-35页
        3.2.2 TriAS 基因生物学信息分析第35页
        3.2.3 小黑麦与其他物种中天冬酰胺合成酶同源性第35-38页
    3.3 盐胁迫下 TriAS 基因表达特性第38-39页
    3.4 TriAS 基因过量表达载体构建第39页
        3.4.1 TriAS 基因过量表达载体构建第39页
    3.5 转 TriAS 基因拟南芥鉴定及生理验证第39-45页
        3.5.1 转 TriAS 基因拟南芥鉴定第39-41页
        3.5.2 盐胁迫对转 TriAS 基因拟南芥影响第41-44页
        3.5.3 干旱胁迫对转 TriAS 基因拟南芥影响第44-45页
    3.6 转 TriAS 基因烟草鉴定及生理验证第45-51页
        3.6.1 农杆菌介导烟草转化第45-46页
        3.6.2 转 TriAS 基因烟草鉴定第46-47页
        3.6.3 盐胁迫对转 TriAS 基因烟草影响第47-49页
        3.6.4 干旱胁迫对转 TriAS 基因烟草影响第49-51页
第四章 讨论第51-55页
    4.1 TriAS 基因的克隆和表达分析第51-52页
    4.2 TriAS 基因表达载体构建第52页
    4.3 转 TriAS 基因拟南芥与烟草获得与鉴定第52-53页
    4.4 转 TriAS 基因拟南芥与烟草对逆境胁迫反应第53-55页
第五章 总结与展望第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-65页
致谢第65-66页
作者简介第66-67页
导师评阅表第67页

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