中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第11-14页 |
前言 | 第14-17页 |
研究现状、成果 | 第14-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、膀胱癌患者尿液中exosome的超速低温提取 | 第17-31页 |
1.1 对象和方法 | 第17-24页 |
1.1.1 主要实验试剂 | 第17-18页 |
1.1.2 主要实验仪器 | 第18-19页 |
1.1.3 主要实验试剂的配制 | 第19-20页 |
1.1.4 尿液的留取和保存 | 第20-22页 |
1.1.5 差速超速离心法提取尿液中exosome | 第22-23页 |
1.1.6 统计学分析方法 | 第23-24页 |
1.2 结果 | 第24-26页 |
1.2.1 本研究平台膀胱癌患者尿液标本容易获得 | 第24页 |
1.2.2 通过制定患者知情同意书提高留取合格标本的成功率 | 第24-25页 |
1.2.3 非肉眼血尿组和肉眼血尿组尿液离心效果比较 | 第25-26页 |
1.3 讨论 | 第26-30页 |
1.4 小结 | 第30-31页 |
二、Exosome的鉴定分析 | 第31-47页 |
2.1 对象和方法 | 第31-38页 |
2.1.1 主要实验试剂 | 第31-32页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第32-33页 |
2.1.3 主要实验试剂的配制 | 第33-35页 |
2.1.4 Exosome的透射电镜观察 | 第35-36页 |
2.1.5 NTA技术检测exosome | 第36页 |
2.1.6 Exosome特征性蛋白质的提取和免疫印迹检测 | 第36-38页 |
2.1.7 统计分析 | 第38页 |
2.2 结果 | 第38-41页 |
2.2.1 膀胱癌患者尿液中exosome的电镜鉴定 | 第38-39页 |
2.2.2 膀胱癌患者尿液中exosome的NTA | 第39-40页 |
2.2.3 膀胱癌患者尿液中exosome标记蛋白的免疫印迹检测 | 第40-41页 |
2.3 讨论 | 第41-45页 |
2.4 小结 | 第45-47页 |
三、Exosome中miRNA的相关分析 | 第47-63页 |
3.1 对象和方法 | 第47-53页 |
3.1.1 主要实验试剂 | 第47-48页 |
3.1.2 主要实验仪器 | 第48-49页 |
3.1.3 主要实验试剂的配制 | 第49-50页 |
3.1.4 Exosome中miRNA的提取 | 第50页 |
3.1.5 miRNA浓度的测定 | 第50页 |
3.1.6 miRNA的纯化和浓缩(冷冻真空干燥法) | 第50-51页 |
3.1.7 miRNA反转录为cDNA | 第51页 |
3.1.8 普通PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳 | 第51-52页 |
3.1.9 实时定量PCR(qPCR)扩增和琼脂糖凝胶电泳 | 第52-53页 |
3.1.10 统计分析 | 第53页 |
3.2 结果 | 第53-57页 |
3.2.1 不同尿液中提取miRNA | 第53-54页 |
3.2.2 冷冻真空法纯化和浓缩miRNA | 第54-55页 |
3.2.3 qPCR实验结果 | 第55-57页 |
3.3 讨论 | 第57-61页 |
3.4 小结 | 第61-63页 |
结论 | 第63-64页 |
论文创新点 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第72-73页 |
综述 尿液exosome及相关microRNA在膀胱癌诊断中的意义 | 第73-87页 |
综述参考文献 | 第80-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
个人简历 | 第88页 |