| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写对照表 | 第7-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒的发病机理及病原学特性 | 第13-14页 |
| 1.2 猪流行性腹泻的临床症状及病理变化 | 第14-16页 |
| 1.3 猪流行性腹泻的诊断 | 第16-18页 |
| 1.3.1 直接免疫荧光法 | 第16页 |
| 1.3.2 免疫电镜技术 | 第16-17页 |
| 1.3.3 间接血凝试验 | 第17页 |
| 1.3.4 胶体金快速诊断法 | 第17页 |
| 1.3.5 酶联免疫吸附试验 | 第17页 |
| 1.3.6 微量中和试验 | 第17-18页 |
| 1.3.7 反转录PCR（RT-PCR） | 第18页 |
| 1.3.8 荧光定量RT-PCR检测法 | 第18页 |
| 1.4 猪流行性腹泻的发病原因分析及其防制措施 | 第18-21页 |
| 1.4.1 猪流行性腹泻病出现的原因分析 | 第18-19页 |
| 1.4.2 猪流行性腹泻的防制措施 | 第19-21页 |
| 1.4.2.1 做好防疫隔离消毒 | 第19页 |
| 1.4.2.2 做好猪群保健 | 第19页 |
| 1.4.2.3 搞好卫生和消毒工作 | 第19页 |
| 1.4.2.4 冬季加强防寒保暖 | 第19页 |
| 1.4.2.5 疫苗或抗血清免疫 | 第19-20页 |
| 1.4.2.6 发病紧急处理 | 第20-21页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-33页 |
| 2.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第22页 |
| 2.1.2 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂盒 | 第23页 |
| 2.1.4 试剂与配制 | 第23-24页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 病料采集与处理 | 第24-25页 |
| 2.2.2 胶体金试剂盒检测 | 第25页 |
| 2.2.3 RT-PCR PEDV ORF3基因扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.3.1 Trizol法提取总RNA | 第25页 |
| 2.2.3.2 酚-氯仿法提取总DNA | 第25-26页 |
| 2.2.3.3 RT-PCR方法 | 第26页 |
| 2.2.4 基因送样测序 | 第26页 |
| 2.2.5 病毒分离 | 第26-27页 |
| 2.2.5.1 Vero细胞复苏与传代培养 | 第26-27页 |
| 2.2.5.2 病毒的分离培养 | 第27页 |
| 2.2.6 猪体回归试验 | 第27-28页 |
| 2.2.7 病毒纯化 | 第28页 |
| 2.2.7.1 细胞板接毒 | 第28页 |
| 2.2.7.2 细胞接YX株F9病毒并收毒 | 第28页 |
| 2.2.8 病毒生物学特性研究 | 第28-30页 |
| 2.2.8.1 病毒核酸类型鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.8.2 乙醚敏感试验 | 第29页 |
| 2.2.8.3 氯仿敏感试验 | 第29页 |
| 2.2.8.4 耐酸性试验 | 第29页 |
| 2.2.8.5 耐热性试验 | 第29-30页 |
| 2.2.9 病毒中和试验 | 第30页 |
| 2.2.10 病毒TCID50测定 | 第30-31页 |
| 2.2.11 PEDV-YX 株氢氧化铝胶灭活疫苗制备及不同免疫剂量、不同免疫途径对抗体水 | 第31-33页 |
| 2.2.11.1 PEDV-YX 株氢氧化铝胶佐剂灭活疫苗的制备 | 第31页 |
| 2.2.11.2 PEDV-YX株灭活疫苗不同免疫剂量、不同免疫途径对抗体水平的影响研究 | 第31-33页 |
| 3 结果 | 第33-46页 |
| 3.1 胶体金试剂盒检测 | 第33页 |
| 3.2 RT-PCR | 第33-34页 |
| 3.3 测序及序列比对 | 第34-35页 |
| 3.4 猪体回归试验 | 第35-38页 |
| 3.4.1 猪体回归试验胶体金检测 | 第36-37页 |
| 3.4.2 猪体回归试验病理解剖 | 第37-38页 |
| 3.5 病毒分离后纯化 | 第38-40页 |
| 3.6 病毒生物学特性研究 | 第40-41页 |
| 3.6.1 病毒核酸类型鉴定 | 第40页 |
| 3.6.2 乙醚敏感试验、氯仿敏感试验、耐酸性试验、耐热性试验 | 第40-41页 |
| 3.7 PEDV-YX株F10病毒中和试验 | 第41-42页 |
| 3.8 PEDV-YX株F10的TCID50测定 | 第42-43页 |
| 3.9 PEDV-YX株灭活疫苗不同免疫剂量、不同免疫途径对抗体水平的影响研究 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 猪流行性腹泻病毒YX株的分离鉴定分析 | 第46-47页 |
| 4.2 PEDV-YX株的生物学特性研究、微量中和试验和毒力测定分析 | 第47页 |
| 4.3 PEDV-YX株氢氧化铝胶灭活疫苗制备及其免疫效力分析 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
