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木薯光合生理、结构及相关基因表达特征的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
目录第9-13页
1 文献综述第13-26页
   ·影响光合作用效率光合生理因素及关键酶第14-17页
     ·净光合速率(Pn)第14页
     ·叶绿素第14页
     ·核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶第14-15页
     ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶第15页
     ·蔗糖合酶第15-16页
     ·腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸羧化酶第16页
     ·“源”与“库”的关系第16-17页
   ·C3植物中C4途径的研究进展第17-21页
     ·植物的C3、C4光合途径第17页
     ·C3植物内C4途径的发现第17-18页
     ·C3植物体内C4途径酶学的研究第18页
     ·影响C3植物中C4途径出现和表达的因素第18-19页
     ·C3植物的遗传改造第19-21页
   ·免疫荧光组化技术第21-22页
   ·cDNA文库的构建第22页
   ·转录组研究技术第22-23页
     ·转录组第22页
     ·新一代测序技术平台第22-23页
     ·RNA-Seq技术第23页
   ·木薯光合作用的研究进展第23-24页
   ·本研究的目的,内容和意义第24-25页
   ·技术路线第25-26页
2 材料与方法第26-37页
   ·材料与试剂第26-27页
     ·实验材料第26页
     ·实验主要缓冲液第26页
     ·载体和菌株第26页
     ·实验主要试剂第26-27页
     ·PCR引物合成及测序第27页
     ·实验主要仪器第27页
   ·实验方法第27-37页
     ·Pn和叶绿素含量测定第27-28页
     ·酶活力测定第28-29页
     ·蛋白含量测定第29页
     ·光学显微技术第29页
     ·透射电镜技术第29-30页
     ·免疫荧光定位技术第30-31页
     ·木薯全长cDNA文库构建与数据分析第31-32页
     ·光合转录组测序分析第32页
     ·pepc基因全长cDNA序列克隆及序列分析第32-35页
     ·pepc启动子序列克隆及顺式作用元件分析第35-37页
3 结果与分析第37-73页
   ·木薯的光合作用效率以及4种光合关键酶活变化第37-41页
     ·Pn与叶绿素测定结果第37-38页
     ·Rubisco酶活测定第38页
     ·PEPCase酶活测定第38-39页
     ·AGPase酶活测定第39页
     ·SuSy分解方向酶活测定第39-40页
     ·小结第40-41页
   ·木薯叶片结构观察第41-45页
     ·木薯叶片的解剖结构第41-43页
     ·木薯叶片超微结构第43-44页
     ·木薯叶绿体超微结构第44页
     ·小结第44-45页
   ·免疫荧光定位第45-49页
     ·Rubisco免疫荧光定位第45-47页
     ·PEPCase免疫荧光定位第47页
     ·小结第47-49页
   ·木薯全长cDNA文库构建第49-53页
     ·有效EST获得第49页
     ·KEGG代谢途径注释与各亚库差异表达基因第49-50页
     ·小结第50-53页
   ·木薯光合作用相关转录组分析第53-59页
     ·RNA质量检测第53-54页
     ·序列组装分析第54页
     ·木薯光合作用相关转录组注释第54-56页
     ·木薯淀粉合成相关转录组注释第56-58页
     ·小结第58-59页
   ·木薯pepc基因全长cDNA序列克隆与分析第59-69页
     ·叶片总RNA提取第59-60页
     ·pepc基因全长cDNA的克隆第60页
     ·pepc基因全长cDNA PCR扩增片段测序与分析第60-63页
     ·PEPCase蛋白氨基酸序列同源性及系统进化分析第63-65页
     ·木薯pepc基因编码的蛋白质特性及功能位点、结构功能域确定第65-67页
     ·木薯pepc基因不同组织表达第67页
     ·木薯pepc基因叶片中单日动态表达第67-68页
     ·小结第68-69页
   ·木薯pepc基因启动子序列克隆与顺式作用元件分析第69-73页
     ·木薯pepc基因启动子序列克隆第69页
     ·木薯pepc基因启动子序列分析第69-70页
     ·小结第70-73页
4 讨论第73-79页
   ·栽培型木薯较野生型叶绿素含量低而Pn高的原因第73页
   ·从酶学角度解释木薯栽培型较野生型块根高淀粉率的原因第73-74页
   ·木薯叶片解剖结构对光合作用的影响第74页
   ·木薯叶片超微结构对光合作用的影响第74-75页
   ·Rubisco、PEPCase免疫荧光定位与木薯光合作用途径第75页
   ·合成多肽制备的抗体用于免疫荧光定位研究第75页
   ·全长cDNA文库第75-76页
   ·RNA-seq与木薯光合作用相关转录组分析第76页
   ·Arg7与W14光合作用以及淀粉代谢相关基因的差异表达分析第76-77页
   ·木薯pepc全长cDNA克隆及表达分析第77页
   ·木薯pepc启动子第77-78页
   ·栽培型木薯高光效机制讨论第78-79页
5 结论第79-81页
创新之处第81-82页
参考文献第82-95页
致谢第95-96页
附录第96页

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