摘要 | 第4-6页 |
Summary | 第6-8页 |
第一部分:研究背景和研究的意义 | 第12-31页 |
1 研究背景 | 第12-30页 |
1.1 高原甘加型藏羊 | 第12-13页 |
1.2 促卵泡素及其受体研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 促卵泡素 | 第13-16页 |
1.2.2 促卵泡素受体 | 第16-17页 |
1.2.3 促卵泡素受体的表达 | 第17-18页 |
1.3 促黄体素及其受体 | 第18-21页 |
1.3.1 促黄体素 | 第18-19页 |
1.3.2 促黄体素受体 | 第19页 |
1.3.3 促黄体素受体的表达 | 第19-21页 |
1.4 雌性动物发情周期和卵巢的变化 | 第21-23页 |
1.5 实时荧光定量PCR | 第23-27页 |
1.5.1 Real Time PCR | 第23-25页 |
1.5.2 绝对定量和相对定量RT-PCR | 第25-26页 |
1.5.3 数据处理 | 第26-27页 |
1.6 免疫组织化学 | 第27-30页 |
1.6.1 免疫组织化学染色原理 | 第27-28页 |
1.6.2 应用IPP软件处理免疫组织化学图片 | 第28-30页 |
2 研究目的和意义 | 第30-31页 |
第二部分:高原甘加型藏羊发情周期FSHR和LHR基因表达差异的研究 | 第31-44页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
1.1 实验动物的选择、分组和样品采集 | 第31页 |
1.2 试剂及仪器 | 第31-32页 |
1.2.1 相关试剂 | 第31-32页 |
1.2.2 主要溶液的配置 | 第32页 |
1.2.3 试验仪器准备 | 第32页 |
1.2.4 主要仪器设备 | 第32页 |
1.3 试验方法 | 第32-34页 |
1.3.1 卵巢总RNA的提取 | 第32-33页 |
1.3.2 总RNA的检测 | 第33页 |
1.3.3 cDNA第一条链的合成 | 第33页 |
1.3.4 实时荧光定量PCR检测 | 第33-34页 |
1.4 试验数据的统计分析 | 第34页 |
2 结果 | 第34-40页 |
2.1 RNA的完整性和纯度 | 第34-35页 |
2.2 卵巢中FSHR、LHR基因及GAPDH基因RT-PCR扩增 | 第35-36页 |
2.3 荧光实时定量检测结果 | 第36-39页 |
2.4 发情周期卵巢组织FSHR和LHR mRNA的表达量 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
3.1 发情周期不同阶段卵巢组织FSHR mRNA表达变化规律 | 第40-41页 |
3.2 发情周期卵巢组织LHR mRNA表达变化规律 | 第41-42页 |
3.3 发情周期卵巢FSHR mRNA和LHR mRNA表达量的相互关系 | 第42页 |
3.4 促性腺激素受体与繁殖力的关系 | 第42-43页 |
4 小结 | 第43-44页 |
第三部分:高原甘加型藏羊发情周期卵巢FSHR和LHR免疫阳性细胞表达的研究 | 第44-59页 |
1 材料与方法 | 第44-48页 |
1.1 实验动物和样品采集 | 第44页 |
1.2 主要试剂与仪器 | 第44-45页 |
1.2.1 相关试剂 | 第44页 |
1.2.2 仪器设备 | 第44页 |
1.2.3 主要溶液的配置 | 第44-45页 |
1.3 免疫组织化学染色 | 第45-47页 |
1.3.1 切片处理 | 第45页 |
1.3.2 石蜡标本制备 | 第45-46页 |
1.3.3 抗体稀释 | 第46页 |
1.3.4 免疫组织化学染色(SP法) | 第46-47页 |
1.3.5 阴性对照试验 | 第47页 |
1.3.6 HE染色 | 第47页 |
1.4 卵巢细胞形态观察 | 第47页 |
1.5 Image pro-plus图像分析 | 第47-48页 |
1.6 试验数据的统计分析 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-54页 |
2.1 甘加型藏羊卵巢HE染色 | 第48-50页 |
2.2 甘加型藏羊卵巢FSHR和LHR阳性细胞的分布和形态变化 | 第50-53页 |
2.2.1 甘加型藏羊卵巢FSHR免疫反应产物阳性细胞分布 | 第50页 |
2.2.2 甘加型藏羊卵巢LHR免疫反应产物阳性细胞分布 | 第50页 |
2.2.3 甘加型藏羊卵巢FSHR和LHR阳性细胞的形态变化 | 第50-53页 |
2.3 甘加型藏羊发情周期卵巢组织中FSHR和LHR的表达变化 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-57页 |
3.1 甘加型藏羊发情周期不同阶段卵巢组织中FSHR和LHR阳性细胞分布变化特点 | 第54-56页 |
3.2 甘加型藏羊卵巢FSHR和LHR阳性细胞光密度值和基因mRNA表达量的关系 | 第56页 |
3.3 甘加型藏羊发情周期卵巢FSHR和LHR的表达量及其与生殖调控的关系 | 第56-57页 |
4 小结 | 第57-59页 |
全文结论 | 第59-60页 |
本研究的创新点 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70-71页 |
导师简介 | 第71-73页 |