摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 植物挥发性有机物简介 | 第13页 |
1.2 影响食草性昆虫天敌行为的植物挥发性有机物简介 | 第13-14页 |
1.3 DMNT和TMTT的功能 | 第14-16页 |
1.4 DMNT和TMTT产生途径 | 第16-20页 |
1.4.1 2-C-甲基-D赤藓糖醇4磷酸盐(MEP)代谢途径 | 第17-18页 |
1.4.2 甲羟戊酸(MVA)代谢途径 | 第18-20页 |
1.5 枯草芽胞杆菌简介及Bs916菌株的生防功能 | 第20-21页 |
1.6 枯草芽胞杆菌MEP代谢途径的研究概述 | 第21-22页 |
1.7 研究目的与意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-48页 |
2.1 材料 | 第24-35页 |
2.1.1 菌株、质粒和单克隆载体 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第24-26页 |
2.1.3 培养基 | 第26页 |
2.1.4 引物序列 | 第26页 |
2.1.5 优化核苷酸序列 | 第26-35页 |
2.2 试验方法 | 第35-48页 |
2.2.1 MEP代谢途径相关基因生物信息学分析 | 第35-36页 |
2.2.2 Bs916菌株生长曲线测定 | 第36页 |
2.2.3 Bs916菌株MEP代谢路径相关基因及ispA基因转录分析 | 第36-41页 |
2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
2.2.5 目的片段加A尾 | 第41页 |
2.2.6 目的片段纯化 | 第41页 |
2.2.7 目的片段连接pMD19T载体 | 第41页 |
2.2.8 大肠杆菌感受态制备及热击转化 | 第41-42页 |
2.2.9 大肠杆菌质粒DNA提取 | 第42页 |
2.2.10 胶回收纯化DNA | 第42页 |
2.2.11 序列测定及分析 | 第42页 |
2.2.12 Bs916菌株FPP检测 | 第42-43页 |
2.2.13 含有优化后PITPS4的重组菌株构建及基因敲除 | 第43-48页 |
3 结果与分析 | 第48-62页 |
3.1 Bs916菌株MEP代谢路径相关基因生物信息学分析 | 第48页 |
3.2 Bs916菌株生长曲线测定 | 第48-49页 |
3.3 Bs916菌株MEP代谢路径相关基因及ispA的转录分析 | 第49-50页 |
3.4 Bs916菌株MEP代谢路径相关基因及ispA的转录单元确定 | 第50-55页 |
3.5 5′RACE确定dxs操纵子转录起始位点 | 第55页 |
3.6 dxs操纵子启动子区序列分析 | 第55-56页 |
3.7 Bs916菌株中FPP含量分析 | 第56页 |
3.8 构建优化后PITPS4表达质粒 | 第56-58页 |
3.9 具有优化后PITPS4基因的枯草芽胞杆菌构建 | 第58页 |
3.10 Bs916-S4菌株相关基因转录确定 | 第58-59页 |
3.11 八氢番茄红素合成酶基,因插入突变菌株的筛选 | 第59-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
4.1 Bs916菌株中MEP代谢路径相关基因及ispA的转录分析 | 第62页 |
4.2 Bs916菌株中MEP代谢路径相关基因的转录单元分析 | 第62-63页 |
4.3 重组菌株构建及八氢番茄红素合成酶基因敲除分析 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
个人简历 | 第76页 |