| 英文缩略词表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-14页 |
| 英文摘要 | 第14-20页 |
| 1 引言 | 第21-27页 |
| 1.1 内质网应激与未折叠蛋白反应 | 第21-23页 |
| 1.2 内质网应激与炎症反应 | 第23页 |
| 1.3 NF-κB | 第23-25页 |
| 1.4 MANF蛋白 | 第25-27页 |
| 2 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.1 菌株、细胞株 | 第27页 |
| 2.2 质粒 | 第27页 |
| 2.3 抗体 | 第27-28页 |
| 2.4 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.5 引物和siRNA | 第29页 |
| 2.6 主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-52页 |
| 3.1 主要试剂溶液的配方 | 第30-32页 |
| 3.2 构建重组质粒 | 第32-35页 |
| 3.3 质粒中抽 | 第35-36页 |
| 3.4 MANF siRNA的合成 | 第36页 |
| 3.5 细胞培养和转染 | 第36-37页 |
| 3.6 免疫印迹 | 第37-38页 |
| 3.7 酵母双杂交实验 | 第38-40页 |
| 3.8 细胞免疫荧光 | 第40-41页 |
| 3.9 免疫共沉淀实验 | 第41页 |
| 3.10 GST pull down实验 | 第41-43页 |
| 3.11 双荧光素酶报告实验 | 第43-44页 |
| 3.12 real-time PCR实验 | 第44-46页 |
| 3.13 ChIP实验 | 第46-48页 |
| 3.14 EMSA实验 | 第48-50页 |
| 3.15 细胞核浆分离实验 | 第50-52页 |
| 4 实验结果 | 第52-83页 |
| 4.1 内质网应激诱导炎症细胞MANF表达并入核 | 第52-55页 |
| 4.2 内质网应激诱导神经细胞MANF表达并入核 | 第55-60页 |
| 4.3 内质网应激诱导的MANF入核后与NF-κB直接相互作用 | 第60-67页 |
| 4.4 MANF与P65的DBD结构域相互作用 | 第67-71页 |
| 4.5 MANF蛋白抑制TNF-α诱导的NF-κB活化 | 第71-75页 |
| 4.6 在细胞核内MANF与P65相互作用并下调其DNA结合能力 | 第75-83页 |
| 5 讨论 | 第83-94页 |
| 5.1 内质网应激诱导MANF蛋白入核 | 第83-85页 |
| 5.2 MANF入核与p65相互作用 | 第85-87页 |
| 5.3 MANF抑制TNF-α诱导的NF-κB活化 | 第87-88页 |
| 5.4 MANF下调NF-κB的DNA结合能力 | 第88-91页 |
| 5.5 MANF抑制炎症反应 | 第91-92页 |
| 5.6 MANF在类风湿性关节炎中的抗炎作用 | 第92-94页 |
| 6 结论 | 第94页 |
| 7 本研究的主要创新点 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 附录 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 综述 | 第105-127页 |
| 参考文献 | 第121-127页 |
