摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
1. 前言 | 第13-38页 |
1.1 课题的提出 | 第13页 |
1.2 植物顶端分生组织的维持和花分生组织的终止 | 第13-24页 |
1.2.1 植物的分生组织 | 第13页 |
1.2.2 顶端分生组织的结构 | 第13-15页 |
1.2.3 顶端分生组织的维持 | 第15-20页 |
1.2.4 花分生组织的维持和终止 | 第20-24页 |
1.3 花发育ABC(DE)模型和四聚体模型 | 第24-27页 |
1.3.1 花发育ABC(DE)模型 | 第24-26页 |
1.3.2 花发育四聚体模型 | 第26-27页 |
1.4 重瓣花形成的研究进展 | 第27-34页 |
1.4.1 重瓣花的起源方式 | 第27-28页 |
1.4.2 重瓣花的遗传规律 | 第28-29页 |
1.4.3 重瓣花形成的分子机理 | 第29-31页 |
1.4.4 重瓣形成相关C类基因AG的研究进展 | 第31-34页 |
1.5 矮牵牛C类基因PMADS3,FBP6相关研究进展 | 第34-36页 |
1.6 本研究的内容及目的 | 第36-38页 |
2. 材料与方法 | 第38-54页 |
2.1 植物材料 | 第38页 |
2.2 菌株与载体 | 第38-39页 |
2.3 实验方法 | 第39-54页 |
2.3.1 形态与解剖观测 | 第39页 |
2.3.2 组织半薄切片 | 第39-40页 |
2.3.3 酵母双杂交文库的构建 | 第40-41页 |
2.3.4 诱饵载体PMADS3-pGBKT7的构建及相关检测 | 第41-43页 |
2.3.5 诱饵蛋白PMADS3对酵母双杂交文库的筛选 | 第43-44页 |
2.3.6 PheIF3f和PhAGO10基因克隆及蛋白功能分析 | 第44-45页 |
2.3.7 酵母双杂交PheIF3f和PhAGO10靶载体构建及互作验证 | 第45页 |
2.3.8 亚细胞定位载体和BiFC载体改造及相关构建 | 第45-49页 |
2.3.9 RNAi及超表相关载体构建 | 第49-51页 |
2.3.10 相关基因亚细胞定位与BIFC分析 | 第51-53页 |
2.3.11 植物材料的遗传转化和表型观测 | 第53-54页 |
3. 结果与分析 | 第54-94页 |
3.1 单重瓣矮牵牛形态组织学研究 | 第54-59页 |
3.1.1 单重瓣花形态学差异分析 | 第54-56页 |
3.1.2 单重瓣花组织学差异分析 | 第56-59页 |
3.2 C类基因PMADS3分段RNA干涉 | 第59-61页 |
3.3 PMADS3与其他7个C、D、E类蛋白的亚细胞定位和BiFC互作分析 | 第61-67页 |
3.3.1 8个C,D,E类蛋白的亚细胞定位分析 | 第62-64页 |
3.3.2 PMADS3与其他7个C、D、E类蛋白的BiFC互作分析 | 第64-67页 |
3.4 酵母双杂交文库的构建 | 第67-72页 |
3.4.1 总RNA的提取与mRNA的分离纯化 | 第67-68页 |
3.4.2 双链cDNA的合成与纯化 | 第68-69页 |
3.4.3 酵母菌的转化及文库质量检测 | 第69-72页 |
3.5 PMADS3诱饵蛋白的构建及互作蛋白的文库筛选 | 第72-75页 |
3.5.1 PMADS3诱饵载体的构建和检验 | 第72-73页 |
3.5.2 PMADS3诱饵蛋白对酵母双杂交文库的初筛选 | 第73-75页 |
3.6 PMADS3互作候选基因的再次验证和功能分析 | 第75-78页 |
3.7 PheIF3f和PhAGO10基因克隆、蛋白功能分析及亚细胞定位确定 | 第78-83页 |
3.7.1 PheIF3f和PhAGO10基因克隆 | 第78-79页 |
3.7.2 PheIF3f和PhAGO10蛋白功能分析 | 第79-81页 |
3.7.3 PheIF3f和PhAGO10蛋白亚细胞定位分析 | 第81-83页 |
3.8 PheIF3f、PhAGO10与PMADS3蛋白的互作验证 | 第83-87页 |
3.8.1 PheIF3f、PhAGO10与PMADS3蛋白酵母双杂交互作验证 | 第83-85页 |
3.8.2 PheIF3f、PhAGO10与PMADS3蛋白BiFC互作验证 | 第85-87页 |
3.9 PMADS3互作候选基因RNAi载体,超表载体构建及矮牵牛的遗传转化 | 第87-94页 |
3.9.1 21个PMADS3互作候选基因的RNAi载体构建 | 第87-89页 |
3.9.2 PheIF3f和PhAGO10的超表载体构建 | 第89-90页 |
3.9.3 矮牵牛的遗传转化及表型观测 | 第90-94页 |
4. 讨论 | 第94-103页 |
4.1 矮牵牛的重瓣形态建成 | 第94-97页 |
4.2 PMADS3的转录因子特性 | 第97-98页 |
4.3 PheIF3f和PhAGO1O功能分析 | 第98-100页 |
4.4 PMADS3可能具有的转录后调控功能 | 第100-101页 |
4.5 总结和展望 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-121页 |
附录一 PMADS3互作候选基因RNAi载体构建引物 | 第121-123页 |
附录二 PheIF3f和PhAGO1O核苷酸序列 | 第123-125页 |
附录三 博士在读期间发表文章情况 | 第125-126页 |
致谢 | 第126-127页 |