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矮牵牛重瓣形态建成及PMADS3互作蛋白解析

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第12-13页
1. 前言第13-38页
    1.1 课题的提出第13页
    1.2 植物顶端分生组织的维持和花分生组织的终止第13-24页
        1.2.1 植物的分生组织第13页
        1.2.2 顶端分生组织的结构第13-15页
        1.2.3 顶端分生组织的维持第15-20页
        1.2.4 花分生组织的维持和终止第20-24页
    1.3 花发育ABC(DE)模型和四聚体模型第24-27页
        1.3.1 花发育ABC(DE)模型第24-26页
        1.3.2 花发育四聚体模型第26-27页
    1.4 重瓣花形成的研究进展第27-34页
        1.4.1 重瓣花的起源方式第27-28页
        1.4.2 重瓣花的遗传规律第28-29页
        1.4.3 重瓣花形成的分子机理第29-31页
        1.4.4 重瓣形成相关C类基因AG的研究进展第31-34页
    1.5 矮牵牛C类基因PMADS3,FBP6相关研究进展第34-36页
    1.6 本研究的内容及目的第36-38页
2. 材料与方法第38-54页
    2.1 植物材料第38页
    2.2 菌株与载体第38-39页
    2.3 实验方法第39-54页
        2.3.1 形态与解剖观测第39页
        2.3.2 组织半薄切片第39-40页
        2.3.3 酵母双杂交文库的构建第40-41页
        2.3.4 诱饵载体PMADS3-pGBKT7的构建及相关检测第41-43页
        2.3.5 诱饵蛋白PMADS3对酵母双杂交文库的筛选第43-44页
        2.3.6 PheIF3f和PhAGO10基因克隆及蛋白功能分析第44-45页
        2.3.7 酵母双杂交PheIF3f和PhAGO10靶载体构建及互作验证第45页
        2.3.8 亚细胞定位载体和BiFC载体改造及相关构建第45-49页
        2.3.9 RNAi及超表相关载体构建第49-51页
        2.3.10 相关基因亚细胞定位与BIFC分析第51-53页
        2.3.11 植物材料的遗传转化和表型观测第53-54页
3. 结果与分析第54-94页
    3.1 单重瓣矮牵牛形态组织学研究第54-59页
        3.1.1 单重瓣花形态学差异分析第54-56页
        3.1.2 单重瓣花组织学差异分析第56-59页
    3.2 C类基因PMADS3分段RNA干涉第59-61页
    3.3 PMADS3与其他7个C、D、E类蛋白的亚细胞定位和BiFC互作分析第61-67页
        3.3.1 8个C,D,E类蛋白的亚细胞定位分析第62-64页
        3.3.2 PMADS3与其他7个C、D、E类蛋白的BiFC互作分析第64-67页
    3.4 酵母双杂交文库的构建第67-72页
        3.4.1 总RNA的提取与mRNA的分离纯化第67-68页
        3.4.2 双链cDNA的合成与纯化第68-69页
        3.4.3 酵母菌的转化及文库质量检测第69-72页
    3.5 PMADS3诱饵蛋白的构建及互作蛋白的文库筛选第72-75页
        3.5.1 PMADS3诱饵载体的构建和检验第72-73页
        3.5.2 PMADS3诱饵蛋白对酵母双杂交文库的初筛选第73-75页
    3.6 PMADS3互作候选基因的再次验证和功能分析第75-78页
    3.7 PheIF3f和PhAGO10基因克隆、蛋白功能分析及亚细胞定位确定第78-83页
        3.7.1 PheIF3f和PhAGO10基因克隆第78-79页
        3.7.2 PheIF3f和PhAGO10蛋白功能分析第79-81页
        3.7.3 PheIF3f和PhAGO10蛋白亚细胞定位分析第81-83页
    3.8 PheIF3f、PhAGO10与PMADS3蛋白的互作验证第83-87页
        3.8.1 PheIF3f、PhAGO10与PMADS3蛋白酵母双杂交互作验证第83-85页
        3.8.2 PheIF3f、PhAGO10与PMADS3蛋白BiFC互作验证第85-87页
    3.9 PMADS3互作候选基因RNAi载体,超表载体构建及矮牵牛的遗传转化第87-94页
        3.9.1 21个PMADS3互作候选基因的RNAi载体构建第87-89页
        3.9.2 PheIF3f和PhAGO10的超表载体构建第89-90页
        3.9.3 矮牵牛的遗传转化及表型观测第90-94页
4. 讨论第94-103页
    4.1 矮牵牛的重瓣形态建成第94-97页
    4.2 PMADS3的转录因子特性第97-98页
    4.3 PheIF3f和PhAGO1O功能分析第98-100页
    4.4 PMADS3可能具有的转录后调控功能第100-101页
    4.5 总结和展望第101-103页
参考文献第103-121页
附录一 PMADS3互作候选基因RNAi载体构建引物第121-123页
附录二 PheIF3f和PhAGO1O核苷酸序列第123-125页
附录三 博士在读期间发表文章情况第125-126页
致谢第126-127页

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