摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-15页 |
第一章 引言 | 第15-23页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征简介 | 第15-20页 |
1.1.1 PRRSV分子生物学进展 | 第16-17页 |
1.1.2 PRRSV免疫学与致病机制的研究进展 | 第17-18页 |
1.1.3 PRRSV细胞受体研究进展 | 第18-20页 |
1.2 去整合素-金属蛋白酶ADAM17 | 第20-22页 |
1.2.1 去整合素-金属蛋白酶ADAM17简介 | 第20-21页 |
1.2.2 ADAM17介导的炎症反应 | 第21-22页 |
1.3 研究目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163的HEK293细胞系的建立 | 第23-29页 |
2.1 材料 | 第23页 |
2.1.1 主要实验材料 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.1.3 仪器与设备 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 猪CD163基因的克隆 | 第23-24页 |
2.2.2 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第24页 |
2.2.3 建立稳定表达CD163的HEK293细胞系 | 第24-25页 |
2.2.4 稳定表达CD163细胞系的鉴定 | 第25页 |
2.2.5 PRRSV在HEK293/CD163细胞中的生长特性 | 第25页 |
2.3 结果 | 第25-28页 |
2.3.1 重组质粒pcDNA-CD163的构建 | 第25-26页 |
2.3.2 稳定表达CD163细胞系的建立及鉴定 | 第26-27页 |
2.3.3 目的基因表达鉴定 | 第27页 |
2.3.4 PRRSV在HEK293/CD163细胞中的生长特性 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
第三章 ADAM17对猪源CD163剪切功能的鉴定 | 第29-35页 |
3.1 材料 | 第29页 |
3.1.1 主要材料与试剂 | 第29页 |
3.1.2 实验设备 | 第29页 |
3.1.3 实验动物 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-30页 |
3.2.1 猪肺泡巨噬细胞(PAM)的获取 | 第29页 |
3.2.2 ADAM17对猪源CD163剪切功能的鉴定 | 第29-30页 |
3.3 结果 | 第30-33页 |
3.3.1 siRNA敲低ADAM17对CD163的影响 | 第30-31页 |
3.3.2 过表达ADAM17对CD163的影响 | 第31-32页 |
3.3.3 PMA激活ADAM17对CD163的影响 | 第32-33页 |
3.3.4 LPS激活ADAM17的活性对CD163的影响 | 第33页 |
3.4 讨论 | 第33-35页 |
第四章 ADAM17对PRRSV感染的影响 | 第35-40页 |
4.1 材料 | 第35页 |
4.1.1 主要材料、试剂与毒株 | 第35页 |
4.1.2 实验设备 | 第35页 |
4.2 实验方法 | 第35-37页 |
4.2.1 si RNA 敲低ADAM17对CD163的影响 | 第35-36页 |
4.2.2 过表达ADAM17对CD163的影响 | 第36页 |
4.2.3 PMA激活对PRRSV感染的影响 | 第36-37页 |
4.2.4 BB94抑制ADAM17对PRRSV感染的影响 | 第37页 |
4.3 结果 | 第37-39页 |
4.3.1 siRNA敲低ADAM17对PRRSV感染的影 | 第37-38页 |
4.3.2 过表达ADAM17对PRRSV感染的影响 | 第38页 |
4.3.3 PMA激活ADAM17对PRRSV感染的影响 | 第38-39页 |
4.3.4 BB94抑制ADAM17对PRRSV感染的影响 | 第39页 |
4.4 讨论 | 第39-40页 |
第五章 全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简历 | 第48页 |