摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-24页 |
1.1 猪瘟与猪瘟病毒 | 第11-12页 |
1.1.1 猪瘟 | 第11页 |
1.1.2 猪瘟病毒 | 第11-12页 |
1.2 猪瘟病毒的复制和感染机制 | 第12-13页 |
1.2.1 结构蛋白在CSFV复制中的功能 | 第12页 |
1.2.2 非结构蛋白在CSFV复制中的功能 | 第12-13页 |
1.3 病毒的细胞受体研究进展 | 第13-19页 |
1.3.1 细胞受体 | 第13页 |
1.3.2 非蛋白类细胞受体的筛选方法 | 第13-14页 |
1.3.3 蛋白类细胞受体的筛选 | 第14-19页 |
1.4 猪瘟病毒及黄病毒科病毒细胞受体的研究进展 | 第19-22页 |
1.4.1 硫酸乙酰肝素 | 第19页 |
1.4.2 辅膜蛋白CD46 | 第19-20页 |
1.4.3 低密度脂蛋白受体 | 第20-21页 |
1.4.4 II型膜联蛋白 | 第21页 |
1.4.5 猪瘟病毒配体的研究 | 第21-22页 |
1.5 层粘连蛋白受体 | 第22-23页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 层粘连蛋白受体作为猪瘟病毒吸附受体的鉴定 | 第24-54页 |
2.1 材料和方法 | 第24-33页 |
2.1.1 毒株、细胞和载体 | 第24页 |
2.1.2 其它实验材料 | 第24页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.4 试剂配制 | 第25页 |
2.1.5 siRNA分子的设计 | 第25-28页 |
2.1.6 干扰分子的转染和指示病毒的感染 | 第28页 |
2.1.7 Fluc活性检测 | 第28-29页 |
2.1.8 病毒毒价的测定 | 第29页 |
2.1.9 流式细胞术 | 第29页 |
2.1.10慢病毒介导的稳定下调细胞系和上调细胞系的构建 | 第29页 |
2.1.11细胞活力检测 | 第29-30页 |
2.1.12激光共聚焦试验 | 第30页 |
2.1.13细胞膜蛋白的提取 | 第30页 |
2.1.14免疫共沉淀试验 | 第30页 |
2.1.15阻断试验 | 第30-31页 |
2.1.16可溶性蛋白竞争试验 | 第31页 |
2.1.17 Western blotting检测 | 第31页 |
2.1.18病毒吸附试验 | 第31页 |
2.1.19荧光定量RT-PCR | 第31页 |
2.1.20受体重建试验 | 第31-32页 |
2.1.21适宜CSFV复制的细胞系的筛选 | 第32页 |
2.1.22 CSFV感染率的测定 | 第32页 |
2.1.23 LamR组织丰度检测 | 第32页 |
2.1.24 LamR对BVDV复制影响的检测 | 第32页 |
2.1.25数据分析 | 第32-33页 |
2.2 结果 | 第33-50页 |
2.2.1 siRNA筛选结果 | 第33页 |
2.2.3 LamR沉默效果验证 | 第33-34页 |
2.2.4 沉默LamR对不同亚型CSFV复制的影响 | 第34-36页 |
2.2.5 CSFV在稳定下调细胞系中的复制 | 第36-38页 |
2.2.6 LamR与CSFV共定位情况 | 第38页 |
2.2.7 LamR与Erns的相互作用 | 第38-39页 |
2.2.8 可溶性LamR对CSFV复制的抑制作用 | 第39-40页 |
2.2.9 可溶性Laminin对CSFV复制的抑制作用 | 第40-41页 |
2.2.10 LamR抗体对CSFV复制的抑制作用 | 第41页 |
2.2.11 CSFV在稳定表达LamR的CSFV易感细胞中的复制 | 第41-43页 |
2.2.12 CSFV在稳定表达LamR的CSFV非易感细胞中的复制 | 第43-44页 |
2.2.13 CSFV在非易感细胞内复制水平检测 | 第44-46页 |
2.2.14 CSFV对细胞表面LamR的吸附能力 | 第46-47页 |
2.2.15 CSFV对肝素酶处理细胞的感染率 | 第47-49页 |
2.2.16 LamR在猪体不同器官丰度检测 | 第49页 |
2.2.17 LamR不影响BVDV的增殖 | 第49-50页 |
2.3 讨论 | 第50-54页 |
第三章 全文结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
个人简历 | 第66页 |