摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
1.动物SYTS功能研究进展 | 第11-15页 |
1.1 动物SYT相关亚型分类 | 第11-13页 |
1.2 Synaptotagmin基因家族结构域 | 第13-14页 |
1.3 SYT亚型亚细胞定位及组织分布 | 第14-15页 |
2. 拟南芥SYT研究进展 | 第15-18页 |
2.1 拟南芥中不同亚型分类 | 第15-16页 |
2.2 拟南芥SYTA功能研究 | 第16-18页 |
3. 酵母双杂交研究进展 | 第18-27页 |
3.1 经典酵母双杂交系统 | 第19-21页 |
3.2 其他酵母双杂交系统 | 第21-24页 |
3.3 酵母双杂交主要应用 | 第24-27页 |
第二章 引言 | 第27-29页 |
第三章 番茄SYTA的克隆、分析和表达 | 第29-50页 |
1.材料与方法 | 第29-36页 |
1.1 试验时间与地点 | 第29页 |
1.2 试验材料 | 第29页 |
1.3 试验方法 | 第29-36页 |
2.番茄SYTA克隆结果与分析 | 第36-44页 |
2.1 番茄RNA提取 | 第36-37页 |
2.2 番茄SYTA RT-PCR | 第37-38页 |
2.4 生物信息学分析 | 第38-44页 |
3.番茄SYTA构建至绿色荧光载体植物表达结果与分析 | 第44-48页 |
3.1 番茄SYTA亚克隆 | 第44-46页 |
3.2 重组植物表达载体pPZP–SYTA–GFP农杆菌转化及SYTA–GFP融合蛋白表达 | 第46-48页 |
4.讨论 | 第48-50页 |
第三章 番茄SYTA互作蛋白的筛选 | 第50-61页 |
1.试验材料 | 第50页 |
2.构建诱饵表达载体PSTT91-SYTA | 第50-55页 |
2.1 番茄SYTA与pSTT91双酶切 | 第50页 |
2.2 重组载体连接 | 第50-51页 |
2.3 电泳检测 | 第51页 |
2.4 质粒提取 | 第51页 |
2.5 番茄SYTA酵母双杂交系统中自激活及毒性验证 | 第51-52页 |
2.6 利用GAL-4 酵母双杂交系统筛选烟草cDNA文库 | 第52页 |
2.7 X-gal蓝斑实验分析筛选阳性克隆 | 第52-53页 |
2.8 酵母L40感受态细胞的制备 | 第53页 |
2.9 酵母双杂交技术的操作步骤 | 第53-55页 |
3 结果与分析 | 第55-58页 |
3.1 酵母双杂交诱饵表达载体pSTT91-SYTA的构建 | 第55-56页 |
3.2 番茄SYTA自激活验证 | 第56页 |
3.3 诱饵酵母表达载体筛选烟草cDNA文库 | 第56-57页 |
3.4 筛库阳性克隆的测序分析 | 第57-58页 |
3.5 番茄SYTA与Fd I全长蛋白酵母双杂交互作验证 | 第58页 |
4.讨论 | 第58-61页 |
第五章 结论与展望 | 第61-63页 |
1.结论 | 第61页 |
2.展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录 | 第71-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
在校期间发表论文及参加课题 | 第77页 |