| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-14页 |
| 1.1 几丁质酶 | 第8-12页 |
| 1.1.1 几丁质酶的分类 | 第8页 |
| 1.1.2 几丁质酶的分布 | 第8-9页 |
| 1.1.3 微生物几丁质酶的结构 | 第9-10页 |
| 1.1.4 几丁质酶的应用 | 第10-11页 |
| 1.1.5 昆虫病原线虫共生菌几丁质酶 | 第11-12页 |
| 1.2 本论文的研究目的和意义 | 第12-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-17页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和试虫 | 第14页 |
| 2.1.2 实验试剂和试剂盒 | 第14-16页 |
| 2.1.3 试剂和培养基的配制 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 引物设计及PCR扩增条件 | 第17-18页 |
| 2.2.2 原核重组表达载体的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.3 重组蛋白诱导表达 | 第20-21页 |
| 2.2.4 诱导条件的优化 | 第21页 |
| 2.2.5 包涵体的变性、纯化与复性 | 第21-22页 |
| 2.2.6 蛋白电泳试剂的配制 | 第22页 |
| 2.2.7 几丁质酶活性的测定 | 第22-24页 |
| 2.2.8 重组几丁质酶增效作用的测定 | 第24页 |
| 2.2.9 几丁质酶抑菌活性的测定 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-36页 |
| 3.1 扩增的chi60 和chi70 基因 | 第26页 |
| 3.2 构建的原核表达载体 | 第26-27页 |
| 3.3 重组蛋白的诱导表达和条件优化 | 第27-29页 |
| 3.4 包涵体的纯化和复性 | 第29页 |
| 3.5 不同条件对几丁质酶活性的影响 | 第29-32页 |
| 3.5.1 NAG标准曲线的绘制 | 第29-30页 |
| 3.5.2 重组几丁质酶的性质 | 第30页 |
| 3.5.3 温度对重组几丁质酶活性的影响 | 第30-31页 |
| 3.5.4 pH值对几丁质酶活性的影响 | 第31-32页 |
| 3.6 重组几丁质酶对Bt HD-73 菌株的增效作用 | 第32-33页 |
| 3.7 重组几丁质酶的抑菌活性 | 第33-36页 |
| 3.7.1 重组几丁质酶对孢子萌发的抑制 | 第33页 |
| 3.7.2 几丁质酶对菌丝生长的抑制 | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-40页 |
| 4.1 几丁质酶表达和活性 | 第36-37页 |
| 4.2 几丁质酶增效作用 | 第37-38页 |
| 4.3 几丁质酶抑菌活性 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 在读期间发表论文 | 第47-48页 |
| 作者简历 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |