| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语 | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 CDT基本概述 | 第11-12页 |
| 2 CDT与炎症 | 第12-13页 |
| 3 CDT与细胞凋亡 | 第13-15页 |
| 3.1 细胞凋亡的形态学特征 | 第13页 |
| 3.2 细胞凋亡的分子机制 | 第13-15页 |
| 3.2.1 Bcl-2家族 | 第13-14页 |
| 3.2.2 Caspase家族 | 第14页 |
| 3.2.3 MAPK家族 | 第14-15页 |
| 3.2.4 STAT家族 | 第15页 |
| 4 细胞自噬 | 第15-17页 |
| 4.1 自噬的分类 | 第15页 |
| 4.2 自噬的发生过程 | 第15页 |
| 4.3 自噬的分子机制 | 第15-17页 |
| 第二部分 试验研究 | 第17-44页 |
| 第一章 CdtB诱导AML12细胞炎性因子的表达 | 第17-26页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 细胞株、重组蛋白 | 第17页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第17页 |
| 1.3 主要试剂和药品 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-21页 |
| 2.1 AML12细胞的培养 | 第18页 |
| 2.2 倒置显微镜观察AML12的细胞形态 | 第18页 |
| 2.3 qRT-PCR法检测AML12细胞中相关细胞因子的表达 | 第18-21页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第18-19页 |
| 2.3.2 RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.3.3 cDNA合成 | 第20页 |
| 2.3.4 PCR反应 | 第20-21页 |
| 2.4 Western-blot法检测JAK-STAT信号通路相关蛋白 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-24页 |
| 3.1 CdtB处理AML12细胞后的形态变化 | 第21-22页 |
| 3.2 RNA质量鉴定 | 第22页 |
| 3.3 CdtB处理AML12细胞释放炎性细胞因子 | 第22-24页 |
| 3.4 STAT3信号通路在CdtB致AML12细胞炎性损伤中发挥作用 | 第24页 |
| 4 讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 CdtB诱导AML12细胞凋亡的研究机制 | 第26-39页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| 1.1 细胞株、重组蛋白 | 第26页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第26页 |
| 1.3 主要试剂和药品 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-33页 |
| 2.1 溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.2 CCK-8法测定CdtB对AML12增殖的影响 | 第28页 |
| 2.3 FACS(Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡 | 第28页 |
| 2.4 Western-blot法检测细胞凋亡相关蛋白 | 第28-32页 |
| 2.4.1 蛋白样品制备 | 第29页 |
| 2.4.2 测蛋白浓度 | 第29页 |
| 2.4.3 蛋白样品变性 | 第29页 |
| 2.4.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 2.4.5 转膜 | 第30-31页 |
| 2.4.6 抗原抗体反应 | 第31-32页 |
| 2.4.7 化学发光、曝光 | 第32页 |
| 2.5 检测Caspase信号通路相关蛋白 | 第32页 |
| 2.6 检测Z-VAD-FMK预处理后的细胞凋亡和Caspase-3蛋白 | 第32页 |
| 2.7 检测MAPK信号通路相关蛋白 | 第32页 |
| 2.8 检测MAPK通路各抑制剂预处理后的细胞凋亡相关蛋白 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-36页 |
| 3.1 CdtB对AML12细胞增殖活性的影响 | 第33页 |
| 3.2 CdtB对AML12细胞凋亡的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 Caspase信号通路在CdtB致AML12细胞凋亡中发挥作用 | 第34-35页 |
| 3.4 p38 MAPK信号通路在CdtB致AML12细胞凋亡中发挥作用 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 自噬在CdtB诱导AML12细胞凋亡中的作用机制 | 第39-44页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1 细胞株、重组蛋白 | 第39页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂和药品 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-41页 |
| 2.1 溶液配制 | 第40页 |
| 2.2 Western-blot法检测自噬相关蛋白 | 第40-41页 |
| 2.3 FACS(Annexin V/PI双染法)检测CQ预处理后的细胞凋亡 | 第41页 |
| 2.4 检测CQ预处理后的细胞凋亡相关蛋白 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-42页 |
| 3.1 CdtB抑制AML12细胞发生自噬 | 第41页 |
| 3.2 抑制自噬促进CdtB致AML12细胞凋亡的效应 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
