| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 研究现状、成果 | 第15-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 一、胰腺癌中GPCR和Insulin/IGF-1 信号串话对YAP调控 | 第17-46页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 1.1.1 胰腺癌细胞株 | 第17页 |
| 1.1.2 试验试剂和耗材 | 第17-19页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-29页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
| 1.2.2 Western Blot免疫蛋白印迹法检测胰腺癌细胞的蛋白磷酸化水平 | 第20-22页 |
| 1.2.3 细胞增殖计数及克隆形成实验观察neurotensin与insulin对胰腺癌细胞株生长影响 | 第22-23页 |
| 1.2.4 qRT-PCR方法检测胰腺癌细胞株YAP下游相关因子mRNA表达水平 | 第23-26页 |
| 1.2.5 阳离子脂质体Lipofectamine~(TM) RNAiMax干扰siRNA转染PANC-1 和Mia Pa Ca-2 胰腺癌细胞株 | 第26-27页 |
| 1.2.6 PANC-1 和MiaPaCa-2 胰腺癌细胞株免疫荧光染色观察YAP在细胞内迁移情况 | 第27-28页 |
| 1.2.7 ~3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法（[~3H]-Thymidine Incorporation）检测转染后的胰腺癌细胞DNA深入量 | 第28-29页 |
| 1.3 实验结果 | 第29-39页 |
| 1.3.1 免疫荧光染色观察YAP在PANC-1 和MiaPaCa-2 胰腺癌细胞内迁移情况 | 第29-32页 |
| 1.3.2 Western Blot监测YAP磷酸化表达水平 | 第32-34页 |
| 1.3.3 qRT-PCR技术监测下游靶基因mRNA水平 | 第34-36页 |
| 1.3.4 Lipofectamine~(TM) RNAiMax siRNA转染 | 第36-37页 |
| 1.3.5 细胞增殖计数和克隆形成实验结果 | 第37-39页 |
| 1.3.6 [~3H]-Thymidine Incorporation分析DNA合成结果 | 第39页 |
| 1.4 统计学处理 | 第39页 |
| 1.5 讨论 | 第39-45页 |
| 1.6 小结 | 第45-46页 |
| 二、PI3K/m TOR在Insulin/IGF-1 和GPCRs信号串话对YAP调控中的作用 | 第46-63页 |
| 2.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 2.1.1 胰腺癌细胞株 | 第46页 |
| 2.1.2 试验试剂和耗材 | 第46-47页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 2.2.1 PANC-1 和MiaPaC-2 胰腺癌细胞培养 | 第48页 |
| 2.2.2 Western Blot检测药物处理前后胰腺癌细胞蛋白表达 | 第48页 |
| 2.2.3 qRT-PCR技术检测胰腺癌细胞药物治疗后相关因子mRNA表达 | 第48页 |
| 2.2.4 Lipofectamine~(TM)3000介导AKT-PH-GFP转染PANC-1 和MiaPaCa-2细胞 | 第48-49页 |
| 2.3 结果 | 第49-57页 |
| 2.3.1 免疫蛋白印迹法检测药物剂量依赖的蛋白磷酸化水平 | 第50-51页 |
| 2.3.2 Insulin/IGF-1 受体和G蛋白偶联受体激动剂增强细胞膜PIP3表达 | 第51-52页 |
| 2.3.3 PI3K抑制剂减弱PIP3在细胞膜聚集 | 第52-55页 |
| 2.3.4 qRT-PCR技术监测PI3K和mTOR抑制剂对YAP下游靶基因mRNA表达水平影响 | 第55-57页 |
| 2.4 统计学处理 | 第57页 |
| 2.5 讨论 | 第57-62页 |
| 2.6 小结 | 第62-63页 |
| 三、PKD在Insulin/IGF-1 和GPCRs信号串话对YAP调控中的作用 | 第63-76页 |
| 3.1 实验材料 | 第63-65页 |
| 3.1.1 胰腺癌细胞株 | 第63页 |
| 3.1.2 实验试剂和耗材 | 第63-64页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第64-65页 |
| 3.2 实验方法 | 第65-66页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第65页 |
| 3.2.2 免疫蛋白印迹法检测胰腺癌细胞蛋白表达水平 | 第65页 |
| 3.2.3 qRT-PCR方法检测药物治疗胰腺癌细胞后YAP-TEAD下游相关因子mRNA表达水平 | 第65页 |
| 3.2.4 PKD特异性siRNA转染PANC-1 和MiaPaCa-2 胰腺癌细胞 | 第65-66页 |
| 3.3 结果 | 第66-71页 |
| 3.3.1 Western Blot监测药物剂量依赖的蛋白磷酸化水平表达 | 第66-68页 |
| 3.3.2 qRT-PCR技术检测YAP下游靶基因mRNA表达水平 | 第68-69页 |
| 3.3.3 PKD特异性siRNA转染细胞对YAP下游靶基因mRNA水平和PKD磷酸化水平影响 | 第69-71页 |
| 3.4 统计学处理 | 第71页 |
| 3.5 讨论 | 第71-75页 |
| 3.6 小结 | 第75-76页 |
| 四、他汀类药物对YAP活性的影响 | 第76-92页 |
| 4.1 实验材料 | 第76-77页 |
| 4.1.1 胰腺癌细胞株 | 第76页 |
| 4.1.2 试验试剂和耗材 | 第76-77页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第77页 |
| 4.2 实验方法 | 第77-79页 |
| 4.2.1 PANC-1 和MiaPaC-2 胰腺癌细胞培养 | 第77页 |
| 4.2.2 免疫荧光染色观察他汀类药物对YAP核质移位影响 | 第77-78页 |
| 4.2.3 细胞计数及克隆形成实验观察他汀类药物对胰腺癌细胞株生长增殖的影响 | 第78-79页 |
| 4.2.4 qRT-PCR方法检测胰腺癌细胞药物治疗后YAP下游相关因子mRNA表达水 | 第79页 |
| 4.3 实验结果 | 第79-86页 |
| 4.3.1 Cerivastatin和Simvastatin对PANC-1 细胞内YAP核质迁移影响 | 第79-80页 |
| 4.3.2 细胞增殖计数与克隆形成检测他汀类药物对胰腺癌细胞生长增殖影响 | 第80-82页 |
| 4.3.3 qRT-PCR技术检测他汀类药物治疗胰腺癌细胞后YAP-TEAD下游相关因子mRNA水平的表达 | 第82-86页 |
| 4.4 统计学处理 | 第86页 |
| 4.5 讨论 | 第86-90页 |
| 4.6 小结 | 第90-92页 |
| 全文结论 | 第92-94页 |
| 论文创新点 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-107页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第107-108页 |
| 综述 Hippo-YAP信号通路在肿瘤中的研究进展 | 第108-125页 |
| 综述参考文献 | 第117-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 个人简历 | 第126页 |
