缩写词 | 第3-4页 |
中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-45页 |
1.1 油菜素内酯信号转导的研究进展 | 第13-30页 |
1.1.1 BR信号转导早期阶段的分子机理 | 第15-22页 |
1.1.1.1 受体BRI1激活的分子机理 | 第16-18页 |
1.1.1.2 共受体BAK1及其同源蛋白在BR信号转导中的功能 | 第18-20页 |
1.1.1.3 其它与BR信号转导相关的细胞膜定位蛋白 | 第20-22页 |
1.1.2 BR信号转导途径下游因子的调节机理 | 第22-27页 |
1.1.2.1 BIN2负调节BR信号转导的分子机理 | 第22-24页 |
1.1.2.2 BZR1和BES1对BR响应基因的转录调控 | 第24-27页 |
1.1.2.3 其它转录调节因子 | 第27页 |
1.1.3 受体的膜泡内吞运输及其它修饰调节BR信号转导 | 第27-30页 |
1.1.3.1 BRI1和BAK1的内吞 | 第28-29页 |
1.1.3.2 ERQC和ERAD | 第29-30页 |
1.2 生长素信号转导的研究进展 | 第30-42页 |
1.2.1 SCF~(TIR1/AFBs)受体复合体的结构和功能 | 第32-36页 |
1.2.1.1 泛素化降解途径与SCF E3复合体 | 第32-34页 |
1.2.1.2 生长素SCF~(TIR1/AFBs)受体复合体 | 第34-36页 |
1.2.1.3 生长素共受体模型 | 第36页 |
1.2.2 负调节因子Aux/IAA蛋白 | 第36-38页 |
1.2.3 转录因子ARF蛋白 | 第38-42页 |
1.3 研究目的及意义 | 第42-45页 |
1.3.1 研究内容 | 第42-43页 |
1.3.2 目的和意义 | 第43-45页 |
1.3.2.1 BAK1调控BR信号转导的功能和机理研究 | 第43页 |
1.3.2.2 AAF调节ARF蛋白的稳定性研究 | 第43-45页 |
第二章 BAK1及其同源蛋白调节BR信号转导的功能和机理研究 | 第45-82页 |
2.1 实验材料和方法 | 第45-51页 |
2.1.1 植物材料和培养条件 | 第45-46页 |
2.1.2 方法 | 第46-51页 |
2.1.2.1 突变体的鉴定和杂交试验 | 第46页 |
2.1.2.2 基因克隆和植物转基因 | 第46-47页 |
2.1.2.3 植物下胚轴和根的测量统计 | 第47页 |
2.1.2.4 反转录、RT-PCR及Real-time PCR分析实验 | 第47页 |
2.1.2.5 总蛋白质提取和Western blotting | 第47页 |
2.1.2.6 膜蛋白质提取、免疫沉淀和Western blotting | 第47-48页 |
2.1.2.7 mbSUS酵母双杂交实验、BiFC实验 | 第48页 |
2.1.2.8 本章所用引物序列 | 第48-51页 |
2.2 结果与分析 | 第51-75页 |
2.2.1 BAK1及其同源基因SERK1、SERK2和BKK1超表达能恢复bri1-5的表型 | 第51-56页 |
2.2.2 暗下serk1 bak1 bkk1三重突变体与bri1-701表型一致 | 第56-61页 |
2.2.3 SERKs基因能回补相应的serk突变体表型 | 第61-62页 |
2.2.4 serk1 bak1 bkk1三重突变体对BR不敏感 | 第62-65页 |
2.2.5 serk1 bak1 bkk1中BR下游调控基因对外源BR处理无响应 | 第65-67页 |
2.2.6 三重突变体serk1 bak1 bkk1中BES1的磷酸化水平对外源BR处理无响应 | 第67-70页 |
2.2.7 超表达BRI1不能恢复serk1 bak1 bkk1三重突变体的表型 | 第70-73页 |
2.2.8 BAK1及其同源蛋白SERK1直接与BSK3相互作用 | 第73-75页 |
2.3 讨论 | 第75-82页 |
第三章 F-box蛋白AAF1调控ARF7稳定性及向光性的研究 | 第82-114页 |
3.1 材料和方法 | 第83-86页 |
3.1.1 植物材料和种植条件 | 第83页 |
3.1.2 方法 | 第83-86页 |
3.1.2.1 激活标签法筛选突变体 | 第83页 |
3.1.2.2 通过TAIL-PCR克隆目标基因及目标基因验证 | 第83-84页 |
3.1.2.3 生长素敏感性实验 | 第84页 |
3.1.2.4 蓝光向性实验 | 第84页 |
3.1.2.5 GUS染色和显微观察 | 第84页 |
3.1.2.6 酵母双杂交实验 | 第84页 |
3.1.2.7 体外Pull-down实验 | 第84-85页 |
3.1.2.8 BiFC实验 | 第85页 |
3.1.2.9 总蛋白质提取、免疫沉淀和Western blotting | 第85页 |
3.1.2.10 引物序列 | 第85-86页 |
3.2 实验结果与分析 | 第86-107页 |
3.2.1 AAF1影响拟南芥下胚轴伸长 | 第86-89页 |
3.2.2 AAF1是生长素信号转导途径中的负调节因子 | 第89-95页 |
3.2.3 AAF1及其同源蛋白AAF2通过生长素信号途径调节植物向光性 | 第95-96页 |
3.2.4 AAF1是E3复合体的一个亚基 | 第96-97页 |
3.2.5 AAF1与ARF7体内体外直接相互作用 | 第97-100页 |
3.2.6 AAF1调节ARF7蛋白的稳定性 | 第100-105页 |
3.2.7 AAF1表达受到蓝光调节,同时ARF7蛋白水平受到AAF1调节 | 第105-107页 |
3.3 讨论 | 第107-114页 |
第四章 总结与展望 | 第114-117页 |
4.1 本文研究总结 | 第114-115页 |
4.1.1 证明BAK1及其同源蛋白对BR信号的感知及转导起必不可少的作用 | 第114页 |
4.1.2 AAF1及其同源蛋白介导ARF7的泛素化降解 | 第114-115页 |
4.2 展望 | 第115-117页 |
4.2.1 关于BR信号转导的展望 | 第115-116页 |
4.2.2 关于AAFs调控ARFs稳定性的展望 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-134页 |
附录1 | 第134-137页 |
附录2 | 第137-138页 |
在读期间已发表论文 | 第138-139页 |
致谢 | 第139页 |