摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1 核受体超家族概况 | 第14-15页 |
1.1 核受体超家族结构及其分类 | 第14页 |
1.2 肝受体X(LXRs) | 第14-15页 |
2 精氨酸酶概况 | 第15-16页 |
2.1 精氨酸酶结构及其分类 | 第15页 |
2.2 精氨酸酶Ⅱ | 第15-16页 |
3 硬骨鱼中肝受体X(LXRs)及其靶基因精氨酸酶Ⅱ的研究进展 | 第16-17页 |
3.1 鱼类中LXRs的研究 | 第16页 |
3.2 鱼类中精氨酸酶Ⅱ的研究 | 第16-17页 |
4 肝X受体(LXRs)和精氨酸酶Ⅱ的功能研究 | 第17-22页 |
4.1 肝 X 受体(LXRs)在免疫中的作用 | 第17-18页 |
4.2 肝受体X LXRs在生理和病理反应中的作用 | 第18-19页 |
4.3 精氨酸酶在免疫中的作用 | 第19-20页 |
4.4 精氨酸酶在生理和病理反应中的作用 | 第20-22页 |
第二章 牙鲆LXR基因的克隆、鉴定与表达分析 | 第22-40页 |
1 实验材料 | 第22-23页 |
1.1 实验用鱼 | 第22页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-32页 |
2.1 迟缓爱德华氏菌感染健康牙鲆实验 | 第23页 |
2.2 牙鲆各组织采样 | 第23页 |
2.3 牙鲆吞噬细胞和淋巴细胞的体外培养 | 第23-24页 |
2.4 迟缓爱德华氏菌体外感染吞噬细胞和淋巴细胞实验 | 第24页 |
2.5 健康牙鲆各组织rna的提取和cdna的合成 | 第24-25页 |
2.6 牙鲆吞噬细胞和淋巴细胞的rna的提取 | 第25-26页 |
2.7 c DNA第一链的合成 | 第26页 |
2.8 LXR基因cDNA克隆验证 | 第26-31页 |
2.8.1 中间序列炎症RCP引物和RACE引物合成 | 第26-27页 |
2.8.2 LXR中间序列验证 | 第27页 |
2.8.3 PCR产物纯化 | 第27页 |
2.8.4 目的片段的连接与转化 | 第27-28页 |
2.8.5 阳性克隆的检测和测序 | 第28-29页 |
2.8.6 3‘RACE-ready cDNA和 5‘RACE-ready cDNA的制备 | 第29页 |
2.8.7 牙鲆 LXR 基因的 c DNA 5'和 3'末端的快速扩增(RACE) | 第29-31页 |
2.9 序列和进化分析 | 第31-32页 |
2.10 实时荧光定量PCR | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-39页 |
3.1 牙鲆LXR基因的克隆 | 第32-34页 |
3.2 牙鲆LXR基因的序列比对和同源性分析 | 第34-36页 |
3.3 实时荧光定量PCR检测结果 | 第36-39页 |
4.讨论 | 第39-40页 |
第三章 牙鲆精氨酸酶Ⅱ基因的克隆、鉴定与表达分析 | 第40-54页 |
1 实验材料 | 第41-46页 |
1.1 实验用鱼 | 第41页 |
1.2 总RNA的提取以及cDNA的合成 | 第41页 |
1.3 总DNA的提取 | 第41页 |
1.4 牙鲆精氨酸酶Ⅱ基因的克隆 | 第41-42页 |
1.5 序列分析和系统进化树分析 | 第42-43页 |
1.6 精氨酸酶Ⅱ基因的组织表达 | 第43页 |
1.7 精氨酸酶Ⅱ基因在迟缓爱德华氏菌感染后的表达 | 第43-45页 |
1.8 数据分析 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-52页 |
2.1 牙鲆精氨酸酶Ⅱ基因的克隆分析 | 第46-47页 |
2.2 牙鲆精氨酸酶Ⅱ基因的序列比对和同源性分析 | 第47-50页 |
2.3 实时荧光定量PCR检测结果分析 | 第50-52页 |
3.讨论 | 第52-54页 |
总结与展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
硕士阶段发表的论文 | 第65页 |
课题资助项目 | 第65页 |
致谢 | 第65页 |