| 摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-34页 |
| 1.1 油菜黄籽的性状优势 | 第16页 |
| 1.2 油菜黄籽性状的种子学特征 | 第16-17页 |
| 1.3 类黄酮与植物生长发育 | 第17页 |
| 1.4 种子成熟与类黄酮积累 | 第17页 |
| 1.5 类黄酮的生物合成、修饰、运输与调控 | 第17-29页 |
| 1.5.1 类黄酮生物途径和重要基因的特征 | 第18-23页 |
| 1.5.2 类黄酮的修饰 | 第23-25页 |
| 1.5.3 类黄酮的运输定位 | 第25-26页 |
| 1.5.4 参与类黄酮生物合成调控的基因 | 第26-29页 |
| 1.6 TT1基因研究进展 | 第29-31页 |
| 1.6.1 TT1基因的分离鉴定 | 第29页 |
| 1.6.2 TT1结构和锌指蛋白 | 第29-30页 |
| 1.6.3 TT1功能 | 第30页 |
| 1.6.4 其它WIP类基因的功能 | 第30-31页 |
| 1.6.5 甘蓝型油菜TT1研究 | 第31页 |
| 1.7 研究意义和目的 | 第31-34页 |
| 第2章 材料与方法 | 第34-52页 |
| 2.1 材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 菌种与质粒 | 第34页 |
| 2.1.3 主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第34页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2 甘蓝型油菜TT1基因家族RNAi载体的遗传转化 | 第35-37页 |
| 2.2.1 发无菌苗 | 第35页 |
| 2.2.2 预培养 | 第35页 |
| 2.2.3 浸染和共培养 | 第35-36页 |
| 2.2.4 杀农杆菌和诱导愈伤 | 第36页 |
| 2.2.5 愈伤分化 | 第36页 |
| 2.2.6 诱导芽叶 | 第36页 |
| 2.2.7 长茎成苗 | 第36-37页 |
| 2.2.8 生根 | 第37页 |
| 2.2.9 水培驯化和土培移栽 | 第37页 |
| 2.2.10 土培移栽和春化 | 第37页 |
| 2.3 DNA提取 | 第37-38页 |
| 2.4 RNA提取、反转录和qRT-PCR | 第38-41页 |
| 2.4.1 植物总RNA提取 | 第38-40页 |
| 2.4.2 反转录 | 第40-41页 |
| 2.4.3 qRT-PCR | 第41页 |
| 2.5 转基因再生植株Basta复检、PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 2.5.1 Basta复检 | 第41-42页 |
| 2.5.2 PCR鉴定 | 第42页 |
| 2.6 组化分析和显微观察 | 第42-43页 |
| 2.6.1 香草醛染色 | 第42页 |
| 2.6.2 石蜡切片、TBO染色和显微观察 | 第42-43页 |
| 2.7 数字表达谱(DGE)测序 | 第43-46页 |
| 2.7.1 样品采集与制备 | 第43-44页 |
| 2.7.2 数据处理 | 第44-46页 |
| 2.8 种子脂肪酸(FA)组分分析 | 第46页 |
| 2.8.1 GC分析 | 第46页 |
| 2.8.2 NIRS扫描 | 第46页 |
| 2.9 种子类黄酮和羟基肉桂酸衍生物的LC-MS分析 | 第46-49页 |
| 2.9.1 种子总类黄酮的提取 | 第46-47页 |
| 2.9.2 可溶性PA的解聚和定量 | 第47-48页 |
| 2.9.3 不溶性PC的定量分析 | 第48-49页 |
| 2.10 种皮木质素含量测定 | 第49-52页 |
| 2.10.1 细胞壁的分离 | 第49-50页 |
| 2.10.2 分光光度法测定木质素含量 | 第50-52页 |
| 第3章 结果与分析 | 第52-96页 |
| 3.1 BnTT1基因家族器官组织表达特异性分析 | 第52-54页 |
| 3.2 pFGC5941M-BTT1I转化中双10号 | 第54-55页 |
| 3.2.1 再生植株的鉴定 | 第54-55页 |
| 3.2.2 转基因植株的表达分析 | 第55页 |
| 3.3 转基因植株性状调查和形态切片观察 | 第55-63页 |
| 3.3.1 株形与株高的调查 | 第56页 |
| 3.3.2 开花时间的调查 | 第56-57页 |
| 3.3.3 分枝数的调查 | 第57-58页 |
| 3.3.4 种子的调查 | 第58-63页 |
| 3.4 表达谱测序和分析 | 第63-74页 |
| 3.4.1 GO分析 | 第63-66页 |
| 3.4.2 KEGG途径分析 | 第66-74页 |
| 3.5 各途径表达模式分析与验证 | 第74-81页 |
| 3.5.1 公共苯丙烷途径 | 第74-76页 |
| 3.5.2 类黄酮途径 | 第76-78页 |
| 3.5.3 木质素途径 | 第78-79页 |
| 3.5.4 脂肪酸途径 | 第79-81页 |
| 3.6 种子类黄酮组分分析和木质素含量测定 | 第81-88页 |
| 3.6.1 类黄酮组分 | 第81-87页 |
| 3.6.2 种皮木质素含量的变化 | 第87-88页 |
| 3.7 种子脂肪酸组分GC分析 | 第88-90页 |
| 3.8 种子近红外扫描分析和种皮不溶性原花青素含量测定 | 第90-96页 |
| 3.8.1 近红外扫描分析 | 第90-92页 |
| 3.8.2 不溶性原花青素含量测定 | 第92-96页 |
| 第4章 讨论与结论 | 第96-104页 |
| 4.1 油菜TT1基因家族RNA干扰后的表型变化 | 第96页 |
| 4.2 油菜TT1具有与拟南芥类似的调控类黄酮途径和种皮发育的功能 | 第96-97页 |
| 4.3 BnTT1基因家族影响公共苯丙烷途径基因的表达 | 第97-98页 |
| 4.4 沉默BnTT1基因家族会明显上调种皮木质素生物合成 | 第98页 |
| 4.5 油菜TT1有可能还参与种胚发育和种子脂肪酸代谢 | 第98-101页 |
| 4.6 BnTT1基因家族对甘蓝型油菜植株生长发育影响的可能机理 | 第101-102页 |
| 4.7 主要结论 | 第102页 |
| 4.8 创新点 | 第102-104页 |
| 缩略词 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-116页 |
| 附录 | 第116-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第151页 |
