| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1.1 羊奶营养及泌乳机制 | 第13-14页 |
| 1.2 乳脂形成的分子调控 | 第14-20页 |
| 1.2.1 脂肪酸的从头合成调控 | 第14-16页 |
| 1.2.2 外源脂肪酸的摄取 | 第16-17页 |
| 1.2.3 脂肪酸的转运及去饱和 | 第17-18页 |
| 1.2.4 甘油三酯的合成及脂滴的分泌 | 第18-20页 |
| 1.3 FASN的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.4 FASN和MAT对脂肪酸合成的调控 | 第24-28页 |
| 1.4.1 硫酯酶Ⅱ与中链脂肪酸的形成 | 第24-26页 |
| 1.4.2 短中链脂肪酸的从头合成 | 第26-28页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第28-29页 |
| 第二章 山羊乳腺不同泌乳时期基因表达谱测序与分析 | 第29-41页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 2.1.3 样品采集与RNA提取 | 第29页 |
| 2.1.4 数字基因表达谱文库制备 | 第29-30页 |
| 2.1.5 数据质控 | 第30页 |
| 2.1.6 数据处理 | 第30-31页 |
| 2.1.7 基因表达丰度分析 | 第31页 |
| 2.2 结果 | 第31-39页 |
| 2.2.1 Illumina测序与基因注释 | 第31-32页 |
| 2.2.2 不同时期差异表达基因的聚类分析 | 第32-38页 |
| 2.2.3 GO分类 | 第38页 |
| 2.2.4 差异基因的表达趋势分析 | 第38-39页 |
| 2.2.5 奶山羊泌乳核心调控基因筛选 | 第39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 奶山羊乳腺脂代谢相关基因与乳脂肪酸成分的相关性研究 | 第41-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.1.1 实验动物及样品采集 | 第42页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第42页 |
| 3.1.4 RNA提取及反转录 | 第42-43页 |
| 3.1.5 脂肪酸成分分析 | 第43-44页 |
| 3.1.6 RNA提取和实时荧光定量PCR（q RT-PCR） | 第44页 |
| 3.1.7 数据分析 | 第44页 |
| 3.2 结果 | 第44-51页 |
| 3.2.1 乳脂肪酸之间的相关性分析 | 第44-46页 |
| 3.2.2 山羊乳腺脂肪酸代谢相关基因间相关性分析 | 第46-49页 |
| 3.2.3 脂代谢相关基因与乳脂肪酸成分之间的相关性分析 | 第49-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-52页 |
| 3.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 干扰FASN基因对山羊乳腺上皮细胞脂肪酸代谢的影响 | 第53-68页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53-59页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第53-54页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第54页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第54页 |
| 4.1.4 RNA提取及实时荧光定量PCR | 第54页 |
| 4.1.5 细胞的复苏 | 第54-55页 |
| 4.1.6 细胞传代培养 | 第55页 |
| 4.1.7 FASN基因的干扰 | 第55页 |
| 4.1.8 腺病毒的包装与扩增 | 第55-56页 |
| 4.1.9 腺病毒滴度的测定 | 第56页 |
| 4.1.10重组腺病毒的鉴定 | 第56页 |
| 4.1.11 Olistat处理 | 第56页 |
| 4.1.12 C75处理 | 第56页 |
| 4.1.13 FASN活性的测定 | 第56-57页 |
| 4.1.14 Malonyl-Co A处理 | 第57页 |
| 4.1.15油红O染色 | 第57页 |
| 4.1.16甘油三酯的测定 | 第57页 |
| 4.1.17 Western blotting检测 | 第57页 |
| 4.1.18 脂肪酸提取与测定 | 第57-58页 |
| 4.1.19 数据分析 | 第58-59页 |
| 4.2 结果 | 第59-65页 |
| 4.2.1 FASN基因的组织表达分析 | 第59页 |
| 4.2.2 FASN干扰对脂滴积累及分泌相关基因的影响 | 第59-60页 |
| 4.2.3 FASN干扰后对细胞脂质积累及分泌的影响 | 第60-61页 |
| 4.2.4 FASN抑制后对细胞中链脂肪酸合成的影响 | 第61-63页 |
| 4.2.5 FASN干扰后对Malonyl-Co A浓度的影响及Malonyl-Co A对FASN功能的介导作用研究 | 第63-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-67页 |
| 4.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 奶山羊MAT基因的克隆及功能的初步研究 | 第68-76页 |
| 5.1 材料与方法 | 第68-72页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.1.2 仪器设备 | 第68-69页 |
| 5.1.3 实验动物及样品采集 | 第69页 |
| 5.1.4 总RNA提取及c DNA合成 | 第69页 |
| 5.1.5 引物设计及基因克隆 | 第69页 |
| 5.1.6 PCR扩增产物的纯化与回收 | 第69页 |
| 5.1.7 目的基因的连接、转化 | 第69-70页 |
| 5.1.8 质粒提取及鉴定 | 第70页 |
| 5.1.9 腺病毒穿梭载体p Ad Track-CMV-MAT/TE的构建 | 第70-71页 |
| 5.1.10重组腺病毒载体Ad-MAT/TE的构建 | 第71-72页 |
| 5.1.11腺病毒包装及扩繁 | 第72页 |
| 5.1.12 MAT蛋白表达及活性测定 | 第72页 |
| 5.1.13 RNA提取及q PCR检测 | 第72页 |
| 5.1.14 Western blotting检测 | 第72页 |
| 5.1.15数据分析 | 第72页 |
| 5.2 结果 | 第72-74页 |
| 5.2.1 MAT蛋白的纯化及活性测定 | 第72-73页 |
| 5.2.2 MAT/TE对山羊乳腺上皮细胞脂代谢相关基因的影响 | 第73-74页 |
| 5.3 讨论 | 第74-75页 |
| 5.4 本章小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 本研究的创新点 | 第77-78页 |
| 存在问题 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-90页 |
| 附录 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 作者简介 | 第93页 |
