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毛竹赤霉素信号途径相关基因的克隆与功能分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第11-20页
    1.1 赤霉素发现与应用第11-13页
    1.2 赤霉素信号转导途径关键因子第13-18页
        1.2.1 GID1第13页
        1.2.2 GID2第13-14页
        1.2.3 DELLA第14-17页
        1.2.4 赤霉素信号转导途径第17-18页
    1.3 酵母双杂交系统的原理第18-19页
    1.4 研究目的和意义第19-20页
第二章 赤霉素对毛竹种子萌发及幼苗生长的影响第20-24页
    2.1 材料与仪器第20页
        2.1.1 试验材料第20页
        2.1.2 试剂与仪器第20页
    2.2 试验方法第20-21页
        2.2.1 种子发芽试验第20页
        2.2.2 幼苗生长实验第20-21页
        2.2.3 统计方法第21页
    2.3 结果与分析第21-23页
        2.3.1 毛竹种子发芽试验第21-22页
        2.3.2 幼苗生长试验第22-23页
    2.4 讨论第23-24页
第三章 毛竹Ph GID1、Ph GID2、Ph SLR1基因的克隆及在笋快速生长过程中的表达分析第24-40页
    3.1 材料和试剂第24-25页
        3.1.1 植物材料第24页
        3.1.2 菌种和载体第24页
        3.1.3 化学试剂和培养基第24页
        3.1.4 实验仪器第24-25页
    3.2 试验方法第25-30页
        3.2.1 基因克隆方法第25-26页
        3.2.2 Trizol法提取毛竹幼苗总RNA第26页
        3.2.3 毛竹笋总RNA提取(CTAB+Trizol法)第26-27页
        3.2.4 RNA反转录为cDNA第27-28页
        3.2.5 目的片段的克隆第28页
        3.2.6 目的片段胶回收与TA克隆第28-29页
        3.2.7 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第29页
        3.2.8 连接产物转化大肠杆菌第29页
        3.2.9 鉴定阳性克隆第29-30页
        3.2.10 序列的生物信息学分析第30页
        3.2.11 实时定量PCR分析第30页
    3.3 结果与分析第30-38页
        3.3.1 毛竹苗总RNA提取结果第30-31页
        3.3.2 PhGID1、PhGID2、PhSLR1基因克隆第31-32页
        3.3.3 PhGID1、PhGID2、PhSLR1基因序列分析第32-37页
        3.3.4 三个基因在毛竹笋快速生长时期的表达分析第37-38页
    3.4 讨论第38-40页
第四章 PhGID1、PhGID2和PhSLR1蛋白的原核表达与互作分析第40-53页
    4.1 试验材料第40-41页
        4.1.1 菌株和质粒第40页
        4.1.2 试剂第40页
        4.1.3 引物设计与合成第40-41页
    4.2 试验方法第41-45页
        4.2.1 原核表达载体的构建第41页
        4.2.2 蛋白质的原核表达第41-42页
        4.2.3 酵母双杂交重组载体的构建第42-43页
        4.2.4 酵母感受态细胞的制备—LiAc法第43页
        4.2.5 重组载体转化酵母感受态细胞第43-44页
        4.2.6 酵母双杂交系统阴性对照实验第44页
        4.2.7 酵母双杂交实验第44-45页
    4.3 结果与分析第45-51页
        4.3.1 原核表达载体构建第45-46页
        4.3.2 原核表达结果第46-48页
        4.3.3 酵母双杂交载体构建第48-50页
        4.3.4 酵母双杂交结果第50-51页
    4.4 讨论第51-53页
第五章 PhSLR1转基因实验第53-60页
    5.1 实验材料第53页
        5.1.1 植物材料第53页
        5.1.2 载体与菌株第53页
        5.1.3 试剂耗材第53页
    5.2 试验方法第53-59页
        5.2.1 转基因载体构建第53-56页
            5.2.1.1 转基因用PhSLR1基因的克隆第53-54页
            5.2.1.2 目的片段胶回收第54页
            5.2.1.3 目的片段末端加A(腺嘌呤)和产物纯化第54-55页
            5.2.1.4 回收片段连接到pMD19-T(simple)第55页
            5.2.1.5 连接产物转化大肠杆菌第55页
            5.2.1.6 鉴定阳性克隆第55页
            5.2.1.7 构建转基因载体第55-56页
        5.2.2 重组载体的转化第56-57页
            5.2.2.1 热激法制备农杆菌感受态第56-57页
            5.2.2.2 转化农杆菌感受态第57页
            5.2.2.3 阳性转化子的鉴定第57页
        5.2.3 农杆菌侵染拟南芥第57-59页
            5.2.3.1 野生型拟南芥的种植第57-58页
            5.2.3.2 农杆菌侵染开花拟南芥第58页
            5.2.3.3 筛选鉴定转基因植株第58-59页
    5.3 结果与分析第59-60页
        5.3.1 转基因载体的构建第59页
        5.3.2 转基因植株的筛选与表型观察第59-60页
    5.4 讨论第60页
第六章 结论和展望第60-62页
    6.1 结论第60-61页
    6.2 展望第61-62页
参考文献第62-68页
个人简介第68页
在校论文发表情况第68-69页
致谢第69页

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