摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-16页 |
1.1 食品中微生物防治 | 第9-10页 |
1.2 乳酸菌产生的抑菌物质 | 第10页 |
1.2.1 有机酸类 | 第10页 |
1.2.2 细菌素类 | 第10页 |
1.3 细菌素概述 | 第10-14页 |
1.3.1 细菌素的分类 | 第10-11页 |
1.3.2 细菌素的合成、调控、转运和免疫 | 第11-12页 |
1.3.3 细菌素的作用机制 | 第12-14页 |
1.3.4 细菌素在食品中的应用 | 第14页 |
1.4 立题依据与意义 | 第14-15页 |
1.5 本论文的研究内容 | 第15-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-26页 |
2.1 实验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 实验样品 | 第16页 |
2.1.2 菌株 | 第16页 |
2.1.3 引物、载体、工具酶、试剂盒 | 第16-17页 |
2.2 主要仪器和试剂 | 第17-18页 |
2.2.1 主要仪器 | 第17页 |
2.2.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.3 培养条件 | 第18-19页 |
2.3.1 培养基 | 第18页 |
2.3.2 培养方法 | 第18-19页 |
2.4 产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定 | 第19页 |
2.4.1 产细菌素乳酸菌的筛选 | 第19页 |
2.4.2 产细菌素乳酸菌的鉴定 | 第19页 |
2.5 生物学特性 | 第19-20页 |
2.5.1 细菌素抗菌活力的检测 | 第19-20页 |
2.5.2 蛋白酶、温度和pH对细菌素的影响 | 第20页 |
2.5.3 抑菌谱的测定 | 第20页 |
2.6 分析编码细菌素的基因簇 | 第20-21页 |
2.6.1 细菌素基因的扩增 | 第20页 |
2.6.2 质粒消除实验 | 第20-21页 |
2.7 Leucocin B-K7的分离纯化 | 第21-22页 |
2.7.1 发酵上清液的预处理 | 第21页 |
2.7.2 阳离子交换层析 | 第21页 |
2.7.3 凝胶过滤层析 | 第21-22页 |
2.8 Tricine-SDS-PAGE | 第22页 |
2.8.1 缓冲液的配制 | 第22页 |
2.8.2 凝胶的配制及电泳 | 第22页 |
2.9 Leucocin B-K7的作用机制研究 | 第22-25页 |
2.9.1 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第22-23页 |
2.9.2 Leucocin B-K7对L. monocytogenes CMCC 54005的抑制效果 | 第23页 |
2.9.3 总ATP和胞外ATP的测定 | 第23页 |
2.9.4 胞外K+的测定 | 第23-24页 |
2.9.5 跨膜电势(ΔΨ)变化 | 第24页 |
2.9.6 pH梯度(ΔpH)变化 | 第24-25页 |
2.10 Leucocin B-K7在牛奶中实际应用效果 | 第25-26页 |
2.10.1 Leucocin B-K7在牛奶中的抑菌效果 | 第25页 |
2.10.2 Leucocin B-K7与甘氨酸配合使用在牛奶中的抑菌效果 | 第25-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-39页 |
3.1 产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定 | 第26页 |
3.2 生物学特性 | 第26-28页 |
3.2.1 蛋白酶、温度和pH对细菌素的影响 | 第26-27页 |
3.2.2 抑菌谱 | 第27-28页 |
3.3 编码细菌素的基因序列分析 | 第28-31页 |
3.3.1 细菌素基因的扩增和测序 | 第28-29页 |
3.3.2 质粒消除 | 第29-30页 |
3.3.3 质粒序列分析 | 第30-31页 |
3.4 Leucocin B-K7的分离纯化 | 第31-34页 |
3.4.1 SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析 | 第31-32页 |
3.4.2 Sephadex G50凝胶过滤层析 | 第32-33页 |
3.4.3 Leucocin B-K7的纯化效果及Tricine-SDS-PAGE | 第33-34页 |
3.5 Leucocin B-K7的作用机制 | 第34-37页 |
3.5.1 MIC的测定 | 第34页 |
3.5.2 Leucocin B-K7对L. monocytogenes CMCC 54005的抑制效果 | 第34页 |
3.5.3 总ATP和胞外ATP、K~+的测定 | 第34-35页 |
3.5.4 质子驱动力(PMF)的变化 | 第35-37页 |
3.6 Leucocin B-K7在牛奶中实际应用效果 | 第37-39页 |
3.6.1 Leucocin B-K7在牛奶中的抑菌效果 | 第37-38页 |
3.6.2 Leucocin B-K7和甘氨酸配合使用在牛奶中的抑菌效果 | 第38-39页 |
主要结论与展望 | 第39-41页 |
主要结论 | 第39页 |
展望 | 第39-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |