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产细菌素乳酸菌的筛选及其所产细菌素leucocin B-K7的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第9-16页
    1.1 食品中微生物防治第9-10页
    1.2 乳酸菌产生的抑菌物质第10页
        1.2.1 有机酸类第10页
        1.2.2 细菌素类第10页
    1.3 细菌素概述第10-14页
        1.3.1 细菌素的分类第10-11页
        1.3.2 细菌素的合成、调控、转运和免疫第11-12页
        1.3.3 细菌素的作用机制第12-14页
        1.3.4 细菌素在食品中的应用第14页
    1.4 立题依据与意义第14-15页
    1.5 本论文的研究内容第15-16页
第二章 材料与方法第16-26页
    2.1 实验材料第16-17页
        2.1.1 实验样品第16页
        2.1.2 菌株第16页
        2.1.3 引物、载体、工具酶、试剂盒第16-17页
    2.2 主要仪器和试剂第17-18页
        2.2.1 主要仪器第17页
        2.2.2 主要试剂第17-18页
    2.3 培养条件第18-19页
        2.3.1 培养基第18页
        2.3.2 培养方法第18-19页
    2.4 产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定第19页
        2.4.1 产细菌素乳酸菌的筛选第19页
        2.4.2 产细菌素乳酸菌的鉴定第19页
    2.5 生物学特性第19-20页
        2.5.1 细菌素抗菌活力的检测第19-20页
        2.5.2 蛋白酶、温度和pH对细菌素的影响第20页
        2.5.3 抑菌谱的测定第20页
    2.6 分析编码细菌素的基因簇第20-21页
        2.6.1 细菌素基因的扩增第20页
        2.6.2 质粒消除实验第20-21页
    2.7 Leucocin B-K7的分离纯化第21-22页
        2.7.1 发酵上清液的预处理第21页
        2.7.2 阳离子交换层析第21页
        2.7.3 凝胶过滤层析第21-22页
    2.8 Tricine-SDS-PAGE第22页
        2.8.1 缓冲液的配制第22页
        2.8.2 凝胶的配制及电泳第22页
    2.9 Leucocin B-K7的作用机制研究第22-25页
        2.9.1 最小抑菌浓度(MIC)的测定第22-23页
        2.9.2 Leucocin B-K7对L. monocytogenes CMCC 54005的抑制效果第23页
        2.9.3 总ATP和胞外ATP的测定第23页
        2.9.4 胞外K+的测定第23-24页
        2.9.5 跨膜电势(ΔΨ)变化第24页
        2.9.6 pH梯度(ΔpH)变化第24-25页
    2.10 Leucocin B-K7在牛奶中实际应用效果第25-26页
        2.10.1 Leucocin B-K7在牛奶中的抑菌效果第25页
        2.10.2 Leucocin B-K7与甘氨酸配合使用在牛奶中的抑菌效果第25-26页
第三章 结果与讨论第26-39页
    3.1 产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定第26页
    3.2 生物学特性第26-28页
        3.2.1 蛋白酶、温度和pH对细菌素的影响第26-27页
        3.2.2 抑菌谱第27-28页
    3.3 编码细菌素的基因序列分析第28-31页
        3.3.1 细菌素基因的扩增和测序第28-29页
        3.3.2 质粒消除第29-30页
        3.3.3 质粒序列分析第30-31页
    3.4 Leucocin B-K7的分离纯化第31-34页
        3.4.1 SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析第31-32页
        3.4.2 Sephadex G50凝胶过滤层析第32-33页
        3.4.3 Leucocin B-K7的纯化效果及Tricine-SDS-PAGE第33-34页
    3.5 Leucocin B-K7的作用机制第34-37页
        3.5.1 MIC的测定第34页
        3.5.2 Leucocin B-K7对L. monocytogenes CMCC 54005的抑制效果第34页
        3.5.3 总ATP和胞外ATP、K~+的测定第34-35页
        3.5.4 质子驱动力(PMF)的变化第35-37页
    3.6 Leucocin B-K7在牛奶中实际应用效果第37-39页
        3.6.1 Leucocin B-K7在牛奶中的抑菌效果第37-38页
        3.6.2 Leucocin B-K7和甘氨酸配合使用在牛奶中的抑菌效果第38-39页
主要结论与展望第39-41页
    主要结论第39页
    展望第39-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-46页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第46页

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