| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| 1.1 角质酶概述 | 第9页 |
| 1.1.1 角质酶的性质和来源 | 第9页 |
| 1.1.2 角质酶的制备 | 第9页 |
| 1.2 P. pastoris表达系统 | 第9-11页 |
| 1.2.1 P. pastoris表达系统简介 | 第9-10页 |
| 1.2.2 P. pastoris发酵优化策略 | 第10-11页 |
| 1.2.3 P. pastoris共表达伴侣蛋白策略 | 第11页 |
| 1.3 短链芳香酯 | 第11-13页 |
| 1.3.1 短链芳香酯的用途 | 第11-12页 |
| 1.3.2 短链芳香酯的合成方法 | 第12-13页 |
| 1.4 立题依据及意义 | 第13页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料和方法 | 第15-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 实验菌株及药品 | 第15-16页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.3 培养基 | 第17页 |
| 2.2 重组P. pastoris的构建 | 第17-19页 |
| 2.2.1 S. conigenus角质酶基因的密码子优化 | 第17-18页 |
| 2.2.2 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.3 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA/pPICZA-MprI的构建 | 第19页 |
| 2.3 重组P. pastoris的诱导表达 | 第19-20页 |
| 2.3.1 重组P. pastoris的摇瓶发酵 | 第19页 |
| 2.3.2 重组P. pastoris的 3 L罐高密度发酵培养 | 第19-20页 |
| 2.4 分析方法 | 第20-23页 |
| 2.4.1 生物量的测定 | 第20页 |
| 2.4.2 蛋白质浓度的测定 | 第20页 |
| 2.4.3 角质酶酶活测定 | 第20页 |
| 2.4.4 SDS-PAGE分析 | 第20页 |
| 2.4.5 重组ScCutA的纯化及酶学定性 | 第20-21页 |
| 2.4.6 重组ScCutA合成短链芳香酯的研究 | 第21-23页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第23-49页 |
| 3.1 ScCutA在P. pastoris中的重组表达及发酵条件优化 | 第23-31页 |
| 3.1.1 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA的构建和筛选 | 第23页 |
| 3.1.2 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA的诱导表达 | 第23-24页 |
| 3.1.3 重组ScCutA的酶学性质 | 第24-27页 |
| 3.1.4 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA的 3 L罐发酵条件优化 | 第27-31页 |
| 3.2 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA/pPICZA-MprI的构建及发酵条件优化 | 第31-37页 |
| 3.2.1 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA/pPICZA-MprI的构建和筛选 | 第31-32页 |
| 3.2.2 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA/pPICZA-MprI的诱导表达 | 第32-33页 |
| 3.2.3 重组P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCutA/pPICZA-MprI的 3 L罐发酵条件优化 | 第33-37页 |
| 3.3 重组ScCutA合成短链芳香酯的研究 | 第37-49页 |
| 3.3.1 ScCutA在有机相合成短链芳香酯的工艺条件优化 | 第37-42页 |
| 3.3.2 ScCutA在水相中合成芳香酯的研究 | 第42-43页 |
| 3.3.3 ScCutA对原酒样品中芳香酯含量的影响 | 第43-46页 |
| 3.3.4 ScCutA在清香型白酒固态发酵中的应用研究 | 第46-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-51页 |
| 主要结论 | 第49-50页 |
| 展望 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |
