| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 综述 | 第10-18页 |
| ·结核病的现状 | 第10-11页 |
| ·国内外结核病研究现状 | 第11页 |
| ·结核病的诊断现状 | 第11-17页 |
| ·细菌学诊断现状 | 第11-12页 |
| ·分子生物学诊断现状 | 第12-14页 |
| ·结核病免疫学诊断方法 | 第14-17页 |
| ·展望 | 第17-18页 |
| 2 结核分枝杆菌Rv1984c基因的原核表达 | 第18-34页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·实验流程 | 第18页 |
| ·主要材料和试剂 | 第18-21页 |
| ·材料和方法 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·目的基因的制备 | 第21-23页 |
| ·重组质粒构建 | 第23-24页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第25-27页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第27页 |
| ·重组蛋白亲和层析分离纯化 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE分析纯化组分 | 第28页 |
| ·包涵体的透析复性 | 第28页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-34页 |
| ·目的基因的PCR扩增产物 | 第28-29页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组基因的测序鉴定结果 | 第30页 |
| ·重组基因的诱导表达结果 | 第30-34页 |
| 3 结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达 | 第34-42页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要溶液 | 第34页 |
| ·主要实验仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·目的基因的制备 | 第34-35页 |
| ·重组质粒构建 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白诱导表达表达 | 第36页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第36页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第36-37页 |
| ·重组pET30a-esat-6蛋白质浓度测定 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-42页 |
| ·PCR电泳结果 | 第37页 |
| ·目的片段酶切图 | 第37-38页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·重组基因诱导表达结果 | 第39-41页 |
| ·重组蛋白pET30a-Rv1984c浓度 | 第41-42页 |
| 4 ELISA法检测结核分枝杆菌特异性抗原及临床应用 | 第42-50页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·材料与方法 | 第42-43页 |
| ·诊断用抗原 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·rRv1984c最佳包被浓度确定和血清稀释浓度确定 | 第43-44页 |
| ·底物反应时间的选择 | 第44页 |
| ·ELISA法检测rRv1984c抗原的敏感性和特异性 | 第44页 |
| ·rESAT-6-ELISA检测方法的建立 | 第44页 |
| ·ESAT-6-CFP-10-16KD混合抗原ELISA检测方法的确立 | 第44-45页 |
| ·批内和批间抗原稳定性试验 | 第45页 |
| ·间接ELISA法检测结核分枝杆菌特异性抗原在临床上的应用 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-50页 |
| ·rRv1984c-ELISA最佳反应条件的确立 | 第46-47页 |
| ·rRv1984c-ELISA临界值确定 | 第47页 |
| ·底物反应时间结果的选择 | 第47页 |
| ·rRv1984c-ELISA在临床上的应用 | 第47-48页 |
| ·rESAT-6-ELISA和混合抗原最佳反应条件的确立 | 第48页 |
| ·批内和批间重复性试验 | 第48页 |
| ·rESAT-6-ELISA和ESAT-6-CFP-10-16KD-ELISA联合抗原在临床上的应用 | 第48-50页 |
| 5 讨论 | 第50-54页 |
| 6 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 中英文缩略语 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 发表论文和参加的研究课题 | 第66页 |
